固相萃取-高效液相荧光法测定食品接触材料中双酚A、双酚F和双酚S的迁移量

本研究建立了同时检测食品接触材料中双酚A、双酚F和双酚S的固相萃取-高效液相荧光的分析检测方法。根据食品类型,选择水性和油性食品模拟液进行迁移实验,浸提液经HLB固相萃取柱富集、浓缩、净化提取,采用甲醇-水作为流动相,荧光检测器检测。试验表明,在0.10~100.0μg/L质量浓度内线性关系良好,相关系数≥0.9997,双酚A、双酚F的检出限均为0.02μg/L,双酚S的检出限为0.05μg/L。测得3种双酚类物质在5种食品模拟液中加标回收率分别为80.2%~100.1%、83.3%~101.6%、77.6%~90.7%,相对标准偏差(RSD)为1.7%~4.0%,方法符合研究要求。同时模拟液在60℃浸提30 min条件下测定了市售4款食品接触材料的180个样品,,结果在5个样品中检测到双酚类物质迁移量。该方法灵敏、检测快速、结果准确,适用于食品接触材料中双酚A、双酚F和双酚S迁移量研究。

ERA实时荧光法快速检测乙肝病毒的建立与应用

基于酶促重组等温扩增(ERA)技术构建一种快速检测乙肝病毒的实时荧光检测方法。根据乙肝病毒聚合酶编码区(P区)保守序列设计引物和探针,对引物、温度、荧光探针浓度等反应条件进行优化,建立ERA实时荧光法最佳反应体系,再对其敏感性、特异性、抗干扰能力、临床样本检出效果进行验证。结果显示:ERA实时荧光法在42℃、20 min内可完成对乙肝病毒的检测,最低检出限为102 copies/μL;除乙肝病毒外,其他4种病毒(甲肝病毒、丙肝病毒、EB病毒、巨细胞病毒)均未产生荧光扩增曲线,具有良好的特异性和抗干扰能力;以实时荧光PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法检测58份乙肝病毒临床样本的灵敏度为97.37%、特异度为100%、阴性预测值为95.24%、阳性预测值为100%、Kappa值为0.96。成功建立了一种简单、快速、灵敏、特异、低成本的乙肝病毒早期检测方法,满足乙肝病毒快速检测的需要。

四甲基联苯胺催化荧光法测定葡萄糖氧化酶活性

基于四甲基联苯胺(TMB)催化荧光法测定葡萄糖氧化酶(GOD)活性。在pH 4.5的乙酸盐缓冲液及37℃水浴条件下,GOD作用下的葡萄糖定量生成H_(2)O_(2),当有Fe^(2+)存在时,H_(2)O_(2)氧化TMB生成具有较强荧光信号的TMB氧化产物(TMBox),TMBox荧光强度与GOD活性有关联。分析过程分3个阶段:创建H_(2)O_(2)标准曲线方程;完成酶催化反应和TMB荧光反应;测定TMBox荧光强度。结果表明,GOD活性检测范围为3.33×10^(-5)~3.33×10(-3)U/mL,检测限(3σ/k)为1.11×10^(-6)U/mL。所建立方法具有操作简单、方法灵敏度高和成本低的优点。利用TMB催化荧光法测定了食品添加剂中GOD的活性,加标回收率在94.60%~102.0%之间。

熔融制样-X射线荧光法快速分析硅铁合金中的元素

针对传统化学分析方法分析硅铁合金元素含量操作繁琐、效率低的问题,开发建立了熔融制样-X射线荧光分析法来快速分析硅铁合金元素含量。研究显示:选用碳酸锂熔融剂对硅铁合金预处理,并在1050℃×15 min条件下熔融,可避免高温硅铁试样对铂金坩埚的损坏,且熔融样品成分均匀;采用X射线荧光分析法分析硅铁合金元素的分析曲线相关系数均在0.99以上,分析结果与标准样品结果、传统国标法一致,多次分析再现性均在允差范围内,分析结果准确可靠;更重要的是,一次分析可快速表征硅铁合金中各元素含量。

紫外荧光法测定液化气总硫的探讨

通过对测定液化气汽化温度、进样压力、载气流速、燃气流速、燃烧温度等五个影响因素的探讨并与以前的方法进行对比,最终确定了合适的分析条件。紫外荧光法测定液化气总硫的重复性好、准确度高、操作简单,实现了快速准确测定液化气总硫的目的。

X荧光法测定保护渣中氧化钙的测量不确定度的评定

本文按照JJF 1059.1—2012的不确定度评定方法,参考CSM 01 010108—2006,对X射线荧光光谱法测定氧化钙的过程中的“制样引起的不确定度”、“多次测量结果的重复”、“工作曲线的变动性”、“标准物质标准值的不确定度”和“高低标校正产生的变动性的不确定度”进行了分别评定,并分析其不确定度贡献的来源。

高效液相色谱-荧光法测定饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)

为建立以高效液相色谱-荧光法测定饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)的分析方法,实验通过高温高压法对饲料进行前处理,而后衍生,以乙酸钠-甲醇为流动相,分别在不同波长下对维生素B_(1)和B_(2)进行测定。结果显示:维生素B_(1)和维生素B_(2)在0.03~5.00μg/mL线性范围内,相关系数R均大于0.9999;加标回收率为92.7%~98.1%;维生素B_(1)和维生素B_(2)的检出限分别为0.04、0.06 mg/kg,定量限分别为0.15、0.18 mg/kg。本方法对饲料中维生素B_(1)和维生素B_(2)的测定,具有便捷、准确的优势。

荧光法检测血小板在异常血小板计数中的临床研究

目的:研究荧光法检测血小板(PLT)在异常PLT计数中的临床价值。方法:收集EDTA-K2抗凝的门诊标本195例,分为对照组、低值PLT组、小红细胞组、PLT异常直方图组和PLT聚集组。采用电阻抗法(PLT-I)和荧光法(PLT-F)检测各组PLT水平,并与人工镜检法(PLT-M)进行相关性分析和差值百分比的Bland-Altman分析。结果:对照组PLT-M与PLT-F的相关性和PLT-I接近(r=0.995、0.987),具有较好的一致性。低PLT组PLT-F与PLT-M具有更高的相关性(r=0.990)和一致性;小红细胞组PLT-M与PLT-F具有更高的相关性(r=0.996);PLT异常直方图组PLT-F与PLT-M相关性(r=0.996)和一致性均优于PLT-I。结论:在小红细胞症以及存在红、白细胞碎片或巨大PLT、PLT微小聚集等异常血液标本中,荧光检测法由于其高度的特异性,适用于复查此类标本的PLT计数。

HPLC-柱后衍生荧光法测定水产品中河豚毒素含量结果的不确定度评定

通过建立HPLC-柱后衍生荧光法测定水产品中河豚毒素含量的不确定度评定方法,量化分析测定结果的不确定度分量,并对各分量相对贡献进行比较。结果表明:测定结果的不确定度主要来源于标准品的校准过程、样品称量、实验过程移取及定容、样品重复实验误差、前处理过程中的回收率不同等。其中校准不确定度中标准溶液配制的不确定度贡献最多,称样量不确定度最小;当水产品中河豚毒素的含量为90.6μg/kg时,其扩展不确定度为0.69μg/kg(包含因子k=2)。

PCR-荧光法与PCR-膜杂交法在检测HPV-DNA中的比较分析

分析PCR-荧光法与PCR-膜杂交法在检测HPV-DNA中的比较。方法 选取HPV-DNA检测的女性患者114例,时间为2020年7月-2022年7月。所有患者在明确细胞学诊断的基础上,分别采用PCR-荧光法和PCR膜杂交法检测HPV-DNA,比较各组HPV-DNA阳性率。结果 细胞学诊断结果显示,所选114例患者中,85例细胞正常,29例细胞异常。其中15例为ASC-H,12例为低级别鳞状上皮增生,1例为 HSIL,1例为 HSIL。、SCC(宫颈鳞癌)1例。HPV-DNA检测结果显示,细胞正常组与细胞异常组相比,用PCR-荧光染色及PCR-膜杂交方法对大肠癌的检出率,经统计学处理,均有统计学意义, P<0.05。PCR-荧光和PCR-膜杂交分别为12.94%和28.24%,二者相比,有显著差异,P<0.05。细胞异常组中,PCR-荧光和PCR-膜杂交分别为93。10%和96 5%,P>0.05。结论 在HPV-DNA检测当中,PCR核酸扩增检测技术的灵敏度、特异度都比较高。其中PCR-荧光法在临床筛查诊疗当中应用价值更高,PCR-膜杂交法在非高危性HPV检测及科研方面优势更明显。临床上对于HPV诊断可采取细胞学检查与HPV-DNA检测联合应用的方法,可以使准确性大大提高,为临床提供充分依据。

软式消化内窥镜改良生物荧光法非常规监测点清洗质量检测研究

目的:研究通过增加消化内窥镜非常规监测点,全面提高消化内窥镜清洗质量检测能力和质量控制水平。方法:选取2022年9-11月复旦大学附属中山医院内镜中心用于临床检查的160根普通软式消化内窥镜,通过随机抽样法分别采用传统三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测和改良ATP生物荧光法检测方式进行消化内窥镜清洗质量检测,每种检测方式80根。传统ATP检测方式使用ATP表面测试棒采样内窥镜先端部20 cm处外表面与使用ATP水质测试棒采样从内窥镜先端部收集注入钳子管道内腔的40 ml无菌水进行检测;改良ATP检测方式在传统ATP检测方式的基础上在钳子管道出口内表面增加1个非常规监测点,使用无菌采样拭子对消化内窥镜钳子管道出口5 cm处内表面,由里向外旋转取样进行检测,对比两种检测方式的清洗质量。结果:在传统ATP检测方式检测结果合格的情况下,改良ATP检测方式在非常规监测点发现消化内窥镜清洗质量阳性物。传统ATP检测方式检测不合格检出率为5.00%(4/80),改良ATP检测方式不合格检出率为25.00%(20/80),其差异有统计学意义(x^(2)=12.549,P<0.05)。结论:增加软式消化内窥镜钳子管道出口非常规监测点,能明显地增加消化内窥镜清洗不合格的检出率,有助于提高消化内窥镜清洗质量控制水平。

氧氟沙星-Fenton体系荧光法测定和评价中草药抗氧化活性

研究利用荧光法测定和评价中草药抗氧化活性。氧氟沙星(Ofloxacin,OFL)能产生强荧光,在酸性环境中,Fenton反应产生的羟基自由基(·OH)能氧化OFL使其荧光猝灭,加入抗氧化剂或含有抗氧化成分的中草药可清除·OH使与OFL反应的·OH量减少,导致OFL荧光猝灭程度减弱。OFL荧光猝灭程度与加入抗氧化剂量或中草药中抗氧化成分的量呈定量关系,据此建立了一种测定和评价中草药抗氧化活性的新方法。应用该法测定和评价了7种常见中草药抗氧化活性,其中夏枯草、连翘和黄连的抗氧化活性较强。该方法操作简单,体系稳定,可用于中草药抗氧化活性测定和评价。

荧光法酶标分析仪的校准方法

参考荧光法酶标分析仪的工作原理、出厂指标及相关标准,建立了荧光法酶标分析仪的校准方法。参考相关计量技术规范,对荧光法酶标仪的计量技术指标进行了研究,荧光法酶标分析仪的主要校准项目有检出限、测量线性、测量重复性。参考指标为线性相关系数不小于0.995,检出限不大于5×10^(-10) g/mL,测量重复性不大于1.5%。利用校准案例对校准方法进行验证,结果表明建立的校准方法科学合理、可操作强,可为荧光法酶标分析仪的计量校准作参考。

β-环糊精敏化荧光法测定黄柏中盐酸小檗碱的含量

采用β环糊精敏化荧光法测定黄柏提取液中盐酸小檗碱的含量.盐酸小檗碱是黄柏的主要提取物,与β环糊精可以形成包合物,产生敏化荧光作用.在7.50mg/mLβ环糊精水溶液中,选择荧光激发波长(λex)345nm,发射波长(λem)540nm,工作曲线线性范围0.10~1.00μg/mL,检出限1.33ng/mL,测得黄柏中盐酸小檗碱的含量为1.56%.此方法操作简单、准确,对中药中盐酸小檗碱的含量测定具有一定的参考价值.

基于自动化提取HCV RNA荧光定量检测系统的性能验证

目的 基于Stream SP96全自动核酸提取仪、ABI7500实时荧光定量PCR仪对丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量检测系统的性能指标进行验证。方法 依据《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 420-2013性能验证方案,采用Stream SP96全自动核酸提取平台及ABI7500荧光定量PCR仪检测HCV RNA,对其准确度、精密度、线性区间、检测限、定量限和抗干扰能力等进行方法学性能验证。结果 低、高浓度标准物质的均值与靶值的误差分别为0.20和0.25,均小于靶值对数值±0.4 log;低浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为0.79%、1.01%,高浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为0.52%、1.22%,均<5%;线性相关系数r>0.980,线性区间可达20~1.0×10^(8),呈良好线性(R^(2)=0.997 3);检出限为20 IU/mL,最低定量限为50 IU/mL;含胆红素(300 mg/L)、血红蛋白(300 g/L)、甘油三酯(3 000 mg/L)的干扰物质对样本检测结果无影响。结论 HCV RNA实时荧光PCR定量法检测系统准确度、精密度、线性范围、检出限、定量限、抗干扰能力均符合厂家声明,能够满足临床对HCV RNA定量检测的需求。

新Hantzsch试剂对甲基-N-乙酰乙酰苯胺荧光法测定微量甲醛

介绍了一种基于Hantzsch反应测定微量甲醛的新试剂，对甲基-N-乙酰乙酰苯胺（AAPT）。采用AAPT的Hantzsch反应可在室温下进行。产物可用荧光法进行检测，产物的最大激发与发射波长分别为385和450nm。对反应温度、乙醇用量和pH进行优化后，建立了测定微量甲醛的AAPT荧光法。甲醛浓度在3．0×10^-7～1．5×10^-5mol／L范围内与荧光强度呈线性关系，检出限为3．2×10^-3mol／L。AAPT荧光法测定室内空气中甲醛的结果与乙酰丙酮分光光度法相符，加标回收率为93．1％～107％，室内空气中的其他共存物质不干扰测定。

基于荧光法的生物气溶胶实时检测系统的研究进展

生物气溶胶是指含有细菌、真菌、花粉等生物性粒子的气溶胶。生物气溶胶的传播会造成严重的危害,对人体健康、大气环境等有着潜在的影响。此外,在军事活动中,生物气溶胶还可作为生物战剂的释放方式。因此,对空气中生物气溶胶进行实时检测,快速识别气溶胶种类,判断生物气溶胶浓度、危险程度等,是降低致病性生物气溶胶暴露,保护人员及环境安全,以及防范生物恐怖袭击的重要手段。基于荧光法的生物气溶胶实时检测系统利用生物粒子含有色氨酸、酪氨酸、核黄素等典型荧光基团,通过激光诱导生物荧光基团产生特定的荧光光谱,从而完成对生物气溶胶的检测和识别,具有甄别气溶胶颗粒生物特性的同时,获取其粒径尺寸及形态等物理特征的技术优势。简要介绍了生物气溶胶及其实时检测的基本原理,概述了生物气溶胶实时检测系统在三个方面的研究,包括荧光激发光源的触发方式、荧光激发光源类型以及信号采集系统。最后,对生物气溶胶实时检测系统的发展方向进行了探讨,为后续生物气溶胶实时检测系统的研究开发提供了参考。

利用绿色碳点-流动注射荧光法测定环境水中化学需氧量

为了达到快速、在线监测水质指标化学需氧量(COD)的目的,首次以废弃物核桃绿皮为碳源、乙二胺为氮源,水热法制备得到绿色碳点,并利用紫外可见光谱、荧光光谱及透射电镜对碳点进行了表征。基于高锰酸根内滤光效应及氧化作用猝灭碳点荧光的机理,建立了流动注射荧光猝灭法快速、自动测定水样中COD的方法。在最佳条件下,测定COD的线性范围为0.5~80 mg/L,检出限为0.15 mg/L,Cl^(-)质量浓度至10000 mg/L时不干扰测定。最后,采用该方法测定了几种环境水样的COD,结果与国标法一致。

优化高效液相色谱荧光法测定水产品中孔雀石绿残留量

为了提高国家标准GB/T 20361—2006中测定水产品中孔雀石绿残留量的高效液相色谱荧光法的回收率,分析影响方法回收率和重复性的关键因素,进行旋转蒸发和固相萃取优化实验。结果表明:在最佳旋转蒸发模式下,旋转蒸发总时间为40 min,浓缩回收率大于95%,采用混合阳离子固相萃取柱进行净化,净化回收率大于97%;优化高效液相色谱荧光法的总体回收率为85.5%~92.5%,相对标准偏差为2.04%~4.88%,测定限为0.33μg/kg;对浓缩和净化过程进行优化后使得前处理步骤简化,方法灵敏度高,重现性好,适用于水产品中孔雀石绿残留量的测定。

基于Al^(3+)与ATP协同增敏荧光法快速检测牛奶中氧氟沙星

目的利用铝离子(aluminumions,Al^(3+))与三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)对氧氟沙星(ofloxacin,OFL)荧光的协同增强特性,建立一种灵敏、快速、准确地定量检测牛奶中OFL的方法。方法通过Al^(3+)与ATP协同增强OFL荧光强度对OFL进行定量检测,对荧光激发波长、pH、反应温度、反应时间等条件进行优化,并在实际样品牛奶中进行加标回收实验。结果Al^(3+)与ATP可协同增强OFL溶液荧光强度,并使荧光发射峰红移以实现对OFL选择性检测。在最优实验条件(pH 7.0、反应时间5 min和反应温度25℃)下,在0.1~100.0μmol/L范围内,OFL荧光强度与其浓度呈现良好的线性关系,其相关系数r^(2)为0.9973,检出限为4.48 nmol/L。在两种牛奶中的加标回收率分别为98.59%~102.48%和87.32%~104.29%,相对标准偏差小于5%。结论本方法具有操作简便、灵敏、快速等优点,并成功地用于测定牛奶中的OFL,具有良好的回收率,为牛奶中OFL的灵敏快速检测提供了一种可行的方法。