蒿秦化斑方对紫外线损伤角质形成细胞黏附分子及PI3K/AKTAKT/GSK-3β通路的影响

目的:观察蒿秦化斑方对HaCat细胞紫外线B(UVB)急性损伤模型细胞黏附分子及PI3K/AKT/GSK-3β通路的影响,探讨该方治疗光敏感性皮肤病的作用机制。方法:采用300 mJ/cm2 UVB建立HaCat细胞急性光损伤模型,使用不同剂量蒿秦化斑方干预,分为空白对照组、UVB模型组、及蒿秦化斑方高、中、低剂量组。采用RT-PCR法检测细胞黏附分子ICAM-1、ELAM-1、VCAM-1相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法分析PI3K/AKT/GSK-3β通路相关节点p-AKT(Ser-473)、p-AKT(Thr-308)、GSK-3β、PI3K相对表达量。结果:UVB急性光损伤可有效减少HaCat细胞ICAM-1的表达(P<0.01),对VCAM-1及ELAM-1表达影响不显著;蒿秦化斑方高剂量组能有效抑制HaCat细胞3种细胞黏附分子的表达(P<0.05);蒿秦化斑方中剂量组能有效抑制HaCat细胞内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达(P<0.01)。UVB急性光损伤对HaCat细胞AKT磷酸化、PI3K表达影响不显著,蒿秦化斑方低剂量处理对HaCat细胞AKT磷酸化具有促进作用(P<0.05)。UVB急性光损伤使HaCat细胞糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)表达水平升高(P<0.01),蒿秦化斑方高、中、低剂量处理均对HaCat细胞GSK-3β表达水平有所抑制(P<0.01)。结论:蒿秦化斑方能降低由UVB急性损伤造成的HaCat细胞ICAM-1、ELAM-1、VCAM-1等黏附分子的表达进而缓解局部炎症和迟发型超敏反应的发生,并且能够激活HaCat细胞PI3K/AKT/GSK-3β通路,在UVB造成的急性光损伤中起到抗氧化、抗凋亡和降低炎症反应的作用。

蒿秦化斑方对紫外线B诱导的HaCaT细胞光损伤的影响

目的观察蒿秦化斑方对紫外线B(ultraviolet-B,UVB)诱导的HaCaT细胞光损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法建立300 mJ/cm 2 UVB辐射损伤HaCaT细胞的病理模型,使用蒿秦化斑方干预,实验分为空白对照组、UVB模型组及蒿秦化斑方高、中、低剂量组。使用MTT法测定蒿秦化斑方的安全性及HaCaT细胞的增殖;吸光度法测定HaCaT细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;ELISA法检测HaCaT细胞细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)、内皮细胞选择素(endothelium-selectin,E-selectin)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β(transforming growth facor-β,TGF-β)的含量。结果与空白对照组比较,UVB模型组细胞增殖能力降低(P<0.05),与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高、中、低剂量组细胞增殖能力均增强(P<0.05);与空白对照组比较,UVB模型组SOD、CAT活性降低(P<0.05),MDA含量增加(P<0.05);与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高剂量组SOD、CAT的活性增强(P<0.05),MDA的含量降低(P<0.05)。与空白对照组比较,UVB模型组ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10含量均增加(P<0.05),TGF-β含量表达降低(P<0.05);与UVB模型组比较,蒿秦化斑方高剂量组ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10的含量均降低(P<0.05),TGF-β含量升高(P<0.05)。结论高剂量蒿秦化斑方能够通过增强抗氧化酶SOD、CAT的活性及减少脂质过氧化物MDA的产生抑制UVB诱导的HaCaT细胞氧化损伤,通过降低HaCaT细胞中炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、IL-10的表达抑制UVB诱导的HaCaT细胞炎症反应,通过细胞增殖和上调TGF-β的表达修复HaCaT细胞屏障功能,从而对UVB诱导的HaCaT细胞光损伤起到保护作用。

蒿秦化斑方治疗光敏性皮肤病思路探析

光敏性皮肤病是一种常见病症,与遗传、环境等因素密切相关。传统治疗方法虽有效,但存在复发及较多不良反应等问题,在一定程度上影响了患者的生活质量。笔者团队认为本病起病多因外邪侵袭,热迫血分;禀赋不耐,正虚邪凑;脏腑失职,湿热内生所致,依据多年临床经验拟定蒿秦化斑方(青蒿、秦艽、水牛角、生地黄、赤芍、牡丹皮、防风、生甘草),以清热凉血、固表除湿为法,临证加减可有效改善患者的临床症状。附临床验案1例,以探析蒿秦化斑方辨证论治光敏性皮肤病思路,丰富光敏性皮肤病临床治疗方法。