利用Calcium Orange测定Harderian腺细胞中的钙离子浓度

探讨了CalciumOrange作为Harderian腺细胞胞浆Ca2 + 荧光指示探针的可能性 .发现选用 5 5 9nm作为激发光波长时 ,CalciumOrange有较强的吸收 ,而Harderian腺细胞 (含大量卟啉 )在此波长没有吸收 .利用CalciumOrange作为指示剂可以避免紫外光所引发的原卟啉介导的光动力作用 .在CalciumOrange加载的Harderian腺细胞 ,Ionomycin引起荧光强度的增加 ,而用TritonX 10 0破裂细胞后加入钙离子螯合剂EGTA ,可使CalciumOrange荧光降到低于加入Ionomycin前的强度 .说明用 5 5 9nm为激发光波长 ,CalciumOrange可以用于Harderian腺细胞胞浆Ca2 + 的测定 .

兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白致患儿严重过敏性休克2例的护理

本研究回顾性分析2例患儿在造血干细胞移植预处理阶段中,使用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rATG)出现严重过敏性休克现象。经验总结包括:全面评估病史,精准识别过敏风险;规范用药流程,严格执行预防措施;常态化应急演练,确保快速高效抢救;实施人文关怀,缓解焦虑情绪。经过及时有效的抢救治疗,2例患儿均顺利度过预处理阶段,成功完成造血干细胞移植手术,分别在术后28 d和23 d好转出院。

ProExC免疫细胞化学染色与高危人乳头瘤病毒检测在宫颈液基细胞学非典型腺细胞女性中的诊断价值

目的探讨ProExC免疫细胞化学染色及高危人乳头瘤病毒(HPV)检测在宫颈液基细胞学非典型腺细胞(AGC)女性中的诊断价值。方法选取2019年2月至2020年12月于江西省妇幼保健院行宫颈液基细胞学诊断AGC病例168例,取剩余液基细胞学标本制成细胞蜡块,进一步行ProExC免疫细胞化学染色。所有病例均行二代杂交捕获技术(HC2)高危HPV检测,以组织病理学诊断为金标准,比较ProExC、HPV及联合检测的诊断效能。结果168例AGC患者中,严重宫颈病变79例,包括鳞状上皮病变32例及腺上皮病变47例。ProExC、HPV及联合检测严重宫颈病变阳性率分别为78.5%、74.7%、81.0%,宫颈原位腺癌(AIS)以上阳性率分别为78.7%、70.2%、78.7%。对严重宫颈病变的诊断,ProExC、HPV及联合检测与组织病理学诊断相比一致性均较好(Kappa值分别为0.699、0.569、0.583,P<0.05);ProExC诊断严重宫颈病变的诊断价值>联合检测>HPV(AUC分别为0.847、0.793、0.784,P<0.05)。对AIS以上病变的诊断,ProExC与组织病理学诊断相比一致性很好(Kappa值为0.883,P<0.05),HPV及两者联合与组织病理学相比一致性较好(Kappa值分别为0.545、0.558,P<0.05);ProExC诊断AIS以上的诊断价值>联合检测>HPV(AUC分别为0.931、0.787、0.772,P<0.05)。结论ProExC、HPV及联合检测均可应用于宫颈液基细胞学非典型腺细胞女性的诊断,其中以ProExC诊断准确性最高。

Dectin-1对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响

目的:探究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖(GM)、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响。方法:大鼠随机分为对照组、Ad-EGFP组和Ad-Dectin-1-EGFP组。检测大鼠肺功能(肺容积变换、静息通气量);ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)含量和血清中GM含量;H-E染色观察肺组织病理学变化;检测胸腺指数;TUNEL检测胸腺细胞凋亡;免疫印迹检测肺组织中Dectin-1、T-bet、GATA-3蛋白表达。结果:与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显降低,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显升高,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显降低。与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显降低,GATA-3蛋白表达明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显升高,GATA-3蛋白表达明显降低。结论:Dectin-1重组质粒可减轻侵袭性肺曲霉病大鼠肺损伤,降低血清中GM值,通过抑制胸腺细胞凋亡维持体内免疫功能平衡,其机制可能与T-bet、GATA-3蛋白表达有关。

宫颈非典型腺细胞的临床意义探讨及随访的研究

目的通过对液基细胞学诊断中包含有AGC的患者进行病理随访,探讨临床中对AGC的管理策略。方法随访江西省妇幼保健院2018年至2019年细胞学包含AGC且有病理资料的患者268例。结果(1)268例随访病理中良性改变的为89例(33.21%);有病变患者为179例(66.79%)。(2)268例患者中,行HPV检测的有254例。通过结合细胞学及HPV分析发现,在AGC-NOS组、AGC合并鳞状上皮细胞异常组及AGC-FN组的HPV阳性患者中均发现更高的病变发生率,尤其在AGC-NOS组别中,合并HPV感染患者与HPV阴性组别对照有统计学意义(χ^(2)=9.931,P=0.002)。(3)将所有患者按年龄分为4组,其中≤30岁组22例,31~40岁组37例,41~50岁组116例,≥51岁组93例。随着年龄增加,病变发生率明显增加且差异有统计学意义(χ^(2)=56.684,P<0.001)。其中≤30岁组别中以良性改变为主;31~40岁组别中,以良性改变及宫颈病变为主,子宫内膜或卵巢病变发生率极低;41~50岁组别中,子宫内膜或卵巢病变发生率明显升高,但与良性改变及宫颈病变发生率相差不大;>50岁组别中,以宫颈病变及子宫内膜或卵巢病变为主。(4)对42例病理呈良性改变的患者进行进一步的临床随访,其中液基细胞仍异常的有3例,HPV阳性的有6例,对筛查异常者进一步行病理活检,均未发现宫颈病变或子宫内膜病变。结论AGC对宫颈病变及子宫内膜病变都有指示作用,对于>40岁细胞学包含AGC者应对子宫内膜进行充分评估;HPV在细胞学在AGC-NOS患者中辅助诊断意义大;在对组织学为良性的AGC患者进行常规随访即可,避免过度诊疗。

宫颈液基细胞学中非典型腺细胞的形态结构特征与临床意义

目的:探讨宫颈液基细胞学中非典型腺细胞诊断的临床意义,评估有临床意义的细胞学形态结构特征,研究细胞学中鉴别腺上皮细胞病变与鳞状细胞病变的形态线索。方法:对我院2011年至2019年液基细胞学筛查为非典型腺细胞(atypical glandular cell,AGC)的病例复阅,通过与组织学结果对照,评估相关的细胞学特征。结果:514例AGC患者中,组织学结果阳性232例(45.1%),包括腺细胞病变114例(22.2%),鳞状上皮细胞病变104例(20.2%),腺细胞病变合并鳞状上皮细胞病变11例(2.1%),其他恶性肿瘤3例(0.6%)。评估的11个细胞学特征中,有8个特征在良性变化和癌或癌前病变之间有显著的统计学差异(P<0.05),分别为失去极性、羽毛状结构、乳头样结构、核膜不规则、出现大核仁、粗糙的染色质、中性粒细胞口袋、细胞浆内大空泡。有6个与腺上皮病变相关,前3位依次是:中性粒细胞口袋、羽毛状结构、细胞浆内大空泡;有4个与鳞状上皮病变相关,前3位分别是:核膜不规则、核深染、粗糙的染色质;羽毛状结构对于区别腺上皮病变和鳞状上皮病变最有意义。结论:AGC随访恶性率高,细胞学中应重点关注失去极性、羽毛状结构、乳头样结构等8个特征,而拥挤重叠、核浆比升高、核深染不应作为评估肿瘤性变化的标准。

中华芦荟多糖对辐射小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究芦荟多糖(AP)对受60Coγ射线辐射后小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响。方法取小鼠辐射后不同时间点胸腺单细胞悬液,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的改变,1.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形条带,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果辐射前30minip50mg/kgAP能显著降低6Gyγ射线辐射后4h、8h和12h小鼠胸腺细胞凋亡率,显著提高各时间点G0/G1期细胞所占比例,降低G2/M期细胞比例。能使DNA片段明显减少;显著改善细胞超微结构,明显减少凋亡小体数量。结论AP对辐射小鼠胸腺细胞的保护作用与改善细胞周期紊乱、抑制细胞凋亡有关。

人胎儿胸腺细胞表型分析

利用流式细胞计分析了人中期妊娠引产胎儿胸腺细胞的某些表面分子的表达,结果表明从胎儿发育的第17周直到儿童期,胸腺细胞 CD1、CD2、CD3、CD4、CD8、CD38、TCR 以及 HLA 抗原的表达无明显变化.在这一发育阶段,胸腺细胞表型呈现以下特征:1.CD3/TCRαβ分子的表达呈现从弱到强的连续性分布,可以分为三个亚群,从弱到强依次称为 L-CD3/TCRαβ、M-CD3/TCRαβ和 H-CD3/TCRαβ.个体之间三个亚群含量差异很大.2.大部分单阳性成熟型胸腺细胞也表达 CD1抗原.3.HLA Ⅰ类抗原在胸腺细胞上表达呈现密度不等的变化.大部分胸腺细胞为弱阳性,少部分为强阳性.HLA Ⅰ类抗原表达量和胸腺细胞成熟度相关.4.根据胸腺细胞比重将胸腺细胞分为 Thy-L 和 Thy-H2个亚群.Thy-L 亚群中成熟型和早期胸腺细胞含量较多,而 Thy-H 主要由中间发育阶段的胸腺细胞构成.

黄芪和何首乌抗环磷酰胺诱导胸腺细胞凋亡

研究了黄芪和何首乌单用和联用对环磷酰胺诱导的胸腺细胞凋亡改变的影响。环磷酰胺对照组 (C组 )的胸腺细胞呈现明显的凋亡改变 ,与AM、PM和AMPM组 (环磷酰胺处理的小鼠加用相应的黄芪、何首乌或黄芪加何首乌 )比较 ,结果表明流式细胞仪检测所出现的反映凋亡细胞数量的亚G1峰 Ap峰 ,各组的高低不一 ,依次为AMPM组 <AM组 <PM组 <C组 ;而正常对照组 (O组 )未出现Ap峰。超微结构显示的凋亡细胞密度和凋亡形态改变的程度 ,各组也依次为AMPM组 <AM组 <PM组 <C组。上述结果表明 ,黄芪和何首乌对环磷酰胺所致的胸腺细胞凋亡改变有拮抗作用 。

鸭胸腺细胞自然凋亡的电镜观察

应用透射电镜观察了鸭胸腺细胞自然凋亡的超微结构变化。结果表明 ,胸腺细胞发生凋亡时 ,表现为染色质凝聚、边集 ,细胞核呈现新月形、“C”形、花瓣状、圆环状或圆斑状 ;粗面内质网、线粒体、溶酶体先是大量增生 ,之后粗面内质网包裹各种细胞成分形成自噬体并与溶酶体融合 ,再逐渐演变成凋亡小体 ;线粒体在凋亡小体内发生肿胀和空泡化 ;最后 ,凋亡细胞及凋亡小体被巨噬细胞吞噬、清除。

家蚕五龄幼虫中部丝腺细胞的蛋白质组成比较

对家蚕5龄期中部丝腺细胞不同区段的蛋白质组成研究,有利于发现与丝胶蛋白合成和分泌有关的功能蛋白质。本研究采用蛋白质双向电泳和图像分析技术,发现家蚕中部丝腺前、中、后3个不同区段的细胞的蛋白质组成具有显著差异;仅在前段表达的20个特异性蛋白质,可能与Ser2A、Ser2B、S4和S5这4种丝胶蛋白的合成与分泌有关;仅在中段表达的22个特异性蛋白质,可能与Ser1B、Ser1C、Ser1D和S3这4种丝胶蛋白的合成与分泌有关;仅在后段表达的27个特异性蛋白质,可能与Ser1A和S3这2种丝胶蛋白的合成与分泌有关。另外,在中段和后段表达、前段不表达的51个差异性蛋白质、表达量在中段和后段比在前段高的20个差异性蛋白质,可能参与了中、后段相应的丝胶蛋白的合成。

扇贝多肽对^(60)Co辐射损伤的胸腺细胞影响作用的研究

本文用噻唑盐比色方法探讨在 60 Co辐射损伤条件下扇贝多肽对胸腺细胞的保护作用 ,和对 60 Co辐射损伤的胸腺细胞修复能力的影响。结果表明 :(1) 60 Co辐射后胸腺细胞的活性明显下降。 (2 )先加扇贝多肽后辐射组的胸腺细胞的活性较未加扇贝多肽的辐射组强 (P<0 .0 5 ) ,0 .2 5 %～ 4 %浓度范围内 ,胸腺细胞的活性与扇贝多肽的浓度呈正比。当辐射强度加大到 9～ 10 GY时 ,0 .5 %以下的扇贝多肽保护能力减弱或丧失。(3)先 60 Co辐射后 2 h,再加入扇贝多肽孵育 ,胸腺细胞的活性随扇贝多肽浓度的加大而增强。辐射后 7h或 19h再加入扇贝多肽 ,仅在辐射 7h后加入 2 %的扇贝多肽孵育的胸腺细胞的活性较对照组活性强 ;辐射后 19h再加入扇贝多肽组的胸腺细胞的活性均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 )。结果提示 :提示扇贝多肽具有抵抗 60 Co辐射对胸腺细胞的损伤作用 ,并且呈剂量依赖性 ;

环磷酰胺诱发大鼠胸腺细胞凋亡的研究

目的：研究环磷酰胺的免疫抑制作用机制。方法：以大鼠胸腺为对象，采用细胞凋亡的原位特异性染色及ＤＮＡ凝胶电泳的方法，观察不同剂量、不同时间环磷酰胺处理后胸腺细胞的凋亡现象。结果：剂量为２０和７０ｍｇ／ｋｇ的环磷酰胺可引起广泛的胸腺细胞凋亡。该作用最早发生在环磷酰胺处理后的８ｈ，１２～２４ｈ最明显，４８ｈ消失。结论：环磷酰胺的免疫抑制作用可能是通过诱导免疫细胞凋亡而产生的。

人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

用大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）所致小鼠胸腺细胞凋亡模型和琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术及免疫组织化学等方法，研究不同浓度高丽人参水提取物体内对小鼠胸腺细胞的影响。结果表明，每只小鼠腹腔注射１０～２０ｍｇ人参水提取物可防止ＬＰＳ所致小鼠体重及胸腺减重，提高胸腺细胞存活力，抑制胸腺细胞ＤＮＡ降解和促凋亡蛋白Ｂａｘ的过量表达，免疫组织化学研究结果在蛋白水平上初步解释了人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的作用机制。

热应激诱导的胸腺细胞凋亡及相关分子表达

目的 :探讨体外热应激诱导胸腺细胞凋亡与细胞表达Fas、Fas L及HSP70的关系。方法 :用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas L和HSP70表达阳性率。结果 :体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas L表达阳性率均呈时间依赖性增高 ,体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas L的表达与凋亡明显相关。体外热应激后 ,HSP70表达明显增高 ,在 6h达到高峰 ,此后缓慢下降。结论 :HPS70是热应激胸腺细胞损伤的标志 ,Fas与Fas

人胎脾脏和胸腺细胞的LAK活性与增殖特性

本文报道用细胞毒及~3H-TdR掺入等方法,研究人重组IL-2对人胚胎中期脾脏和胸腺细胞LAK活性的诱导及细胞增殖反应影响的一般规律。在低剂量IL-2的作用下,人胎脾脏和胸腺细胞出现广谱杀瘤活性,但二者的活性表达有所不同;脾脏细胞出现很强的增殖反应,胸腺细胞没有出现。实验结果提示,胎儿脾脏和胸腺细胞对重组IL-2的反应性存在差异。

BALB/c小鼠胸腺细胞发育模型的建立

目的建立胸腺细胞体外研究模型,为T细胞早期发育及相关实验提供有效技术平台。方法无菌摘取14.5天龄胚鼠胸腺,胸腺器官体外培养,FACS检测不同培养时间点细胞存活状况和表型变化,计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果胸腺体外培养显示:经过6d的培养,胸腺细胞存活率均在88.0%以上,由双阴性发育至双阳性细胞,CD4+CD8+双阳性细胞由培养第0天的0上升到第6天的89.07%;细胞数量随胸腺发育(培养时间的增加)而增多,每个胸腺小叶胸腺细胞数量也由培养0d的0.75×104个上升到第6天的1.38×106个。而体内数据显示:胸腺细胞由胚龄14.5d的双阴性阶段发育到新生鼠的双阳性阶段,每个胸腺小叶细胞数量由14.5d的0.75×104个上升到新生鼠的2.56×106个,同时间段CD4+CD8+双阳性细胞比例由0上升到91.22%。体内、外胸腺细胞表型、数量变化趋势一致。结论体外培养状态下胸腺细胞数量和表型变化与体内自然变化趋势一致,在体外培养可以模拟体内胸腺细胞由双阴性到双阳性的发育过程,这将为T细胞发育的研究提供简易、有效的技术平台。

当归多糖增强放射损伤小鼠胸腺细胞增殖及红细胞C3b受体粘附功能的实验研究

目的 进一步探讨当归多糖 (Angelicapolysaccharide,AP)的药用价值。 方法 检测正常对照组、放射对照组及放射 +当归多糖治疗组 3组的刀豆蛋白A(ConA)诱导的胸腺细胞增殖反应和红细胞C3b受体花环率。结果 放射对照组胸腺细胞OD值和红细胞C3b受体花环率 [(0 .2 4± 0 .0 1) ,(16 .46± 0 .76 ) % ]明显低于正常对照组 [(0 .35± 0 .0 1) ,(2 2 .30± 1.2 6 ) % ],而放射 +当归多糖治疗组的胸腺细胞OD值和红细胞C3b受体花环率 [(0 .31± 0 .0 1) ,(2 1.0 7± 1.2 2 % ) ]显著高于放射对照组 [(0 .2 4± 0 .0 1) ,(16 .46± 0 .76 ) % ],P <0 .0 1,有统计学意义。结论 当归多糖能明显增强放射损伤小鼠的胸腺细胞增殖和红细胞C3b受体免疫粘附功能。

糖皮质激素诱导大鼠胸腺细胞程序性死亡研究

用甲基强的松龙（ＭＰＳ）与大鼠胸腺细胞共同培养，４ｈ后胸腺细胞超微结构显示胞浆及核固缩，形成大量空泡，而线粒体等细胞器结构变化不大，ＤＮＡ电泳分析有大量小分子片段，分子量为１８０ｂｐ的整倍数，呈梯状结构。结果提示ＭＰＳ可诱导胸腺细胞程序性死亡。

左归丸对大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2,Bax表达的影响

目的观察左归丸干预皮质酮致大鼠胸腺细胞凋亡及对Bcl-2、Bax表达的影响。方法 1×10-5mol/L皮质酮处理乳鼠胸腺细胞。实验分为正常对照组,模型组,左归组。Annexin V-PI双染色法结合FCM检测胸腺细胞凋亡情况;Real time PCR和Western印迹法检测Bcl-2、Bax的表达变化。结果 胸腺细胞经皮质酮处理后,胸腺细胞凋亡率显著升高(P<0.01);Bcl-2 mRNA表达显著降低;Bax表达显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01)。与模型组比较,左归组胸腺细胞凋亡率降低(P<0.01);Bax mRNA表达降低,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。结论左归丸鼠血清能通过调节bcl-2/bax比率的异常变化,抑制胸腺细胞过度凋亡。