Hath1基因抑制结肠癌细胞的增殖

目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2、cyclinD1和p27表达;通过软琼脂克隆形成实验和裸鼠移植实验,观察Hath1基因对HT29细胞增殖能力的影响。结果 Hath1基因可上调p27和下调cyclinD1的表达,抑制HT29细胞的增殖。结论 Hath1基因可能在结肠癌的发病中扮演抗癌基因的作用。

Hath1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达。方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP)gfp基因;利用引物GFP-R和Hath1-F扩增融合基因gfp-Hath1,克隆至pMD18-T中;经XhoⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶酶切,构建重组表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1;转染SH-SY5Y细胞。结果:PCR扩增,融合基因gfp-Hath1扩增条带大小为2 023bp,表明成功扩增gfp-Hath1融合基因。经双酶切鉴定,成功构建真核表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1。采用间接免疫荧光技术在荧光显微镜下观察到5H-SY5Y细胞中有GFP表达。结论:本研究成功地使Hath1基因在SH-SY5Y细胞中得到表达,为转染耳蜗组织的实验及探索治疗耳聋新方法奠定基础。

Hes1、Hath1基因在恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤（malignantneoplasm），亦称癌症（cancer），是调控细胞生长增殖机制失常引起的一类疾病，预后差、死亡率极高，其治疗一直是医学上不断研究但又难以攻克的难题。目前认为各种肿瘤的发生都存在原癌基因的激活和（或）抑癌基因的失活，这使得肿瘤的研究进入了基因水平时代，而治疗则进入了基因靶向治疗时代。

Hath1在非黏液性结肠腺癌发病中的抑癌基因作用

目的:探讨Hath1基因在结肠腺癌发病中的潜在作用。方法:从48例非黏液性结肠腺癌患者的标本中取材,石蜡切片染色后观察正常结肠黏膜、癌旁黏膜和结肠腺癌组织中杯状细胞数量的变化;用定量实时逆转录PCR、免疫组织化学和Western blotting分别检测这3种组织中Hath1基因和Muc2基因的mRNA和蛋白表达。将Hath1基因转化至HT29人结肠癌细胞中,然后随机挑选3个转化了Hath1基因的克隆,用定量实时逆转录PCR检测Hath1和Muc2的mRNA表达,用Western blotting检测Hath1、Muc2、cyclin D1和p27蛋白的表达;通过软琼脂克隆形成实验和裸鼠移植实验,观察将Hath1基因转化到HT29细胞后,HT29细胞增殖能力的变化。结果:在非黏液性结肠腺癌组织中未发现杯状细胞,并且Hath1基因和Muc2基因的mRNA和蛋白表达均显著下调(P<0.05);在HT29细胞中,Hath1基因下调cyclin D1蛋白的表达(P<0.05),上调p27(P<0.05)和Muc2(P<0.01)蛋白的表达;过表达Hath1基因的HT29细胞在体外的克隆形成显著受到抑制(P<0.01),移植至裸鼠时移植肿瘤的体积显著缩小(P<0.01)。结论:Hath1基因表达的下调可能与非黏液性结肠腺癌的发生有关,Hath1基因在非黏液性结肠腺癌的发生中可能起着抑癌基因的作用。

相较正常结肠黏膜,Hath1在非粘液性结肠腺癌中的表达下调

目的:研究Hath1基因在非粘液性结肠癌中的表达。方法:从48例非粘液性结肠腺癌患者的标本中取材,石蜡包埋切片,H&E染色,观察正常结肠黏膜、癌旁黏膜和结肠癌组织中杯状细胞数量的变化。用定量实时RT-PCR和Western blot的方法,检测这3种组织中Hath1蛋白和Muc2蛋白的表达。结果:在结肠癌组织中未发现杯状细胞;结肠癌组织中Hath1 mRNA、Hath1蛋白、Muc2 mRNA和Muc2蛋白的表达均显著下调。结论:Hath1基因的表达下调,可能与非粘液性结肠腺癌的发生有关。