我国异常Hb的研究Hb H及Hb E-复合β-地中海贫血的化学结构及其红细胞可变形性的研究

对3例切脾患者的Hb进行醋酸纤维素薄膜电泳检查,例1,2Hb溶液含有一条相当于HbH的快速带;例2尚具有一条可以分辨的相当于Bart’s的快带;

罕见缺失型α-珠蛋白基因突变导致α-地中海贫血Hb H病

目的:分析罕见基因突变导致血红蛋白H(Hb H)病的临床和血液学特征。方法:收集2020年5月至2021年2月到广西医科大学第一附属医院就诊、经Hb分析确诊为Hb H病的88例病例,应用跨越断裂点PCR(Gap-PCR)、荧光PCR熔解曲线法(FCMA)检测常见的缺失型和非缺失型α-地中海贫血基因突变,应用二代测序技术检测罕见基因突变。结果:在88例病例中发现3例由-α^(27.6)缺失型突变导致Hb H病的病例,3例均为广西人。病例1为11个月大的女婴,病例2为44岁女性,病例3为10岁男童,3例均表现为中度小细胞低色素贫血,Hb平均值为76.8 g/L,红细胞平均容积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)均下降。无黄疸、肝脾肿大和输血史。Hb分析结果显示,3例病例有Hb Bart’s和Hb H,依次为Hb Bart’s 7%,Hb H 4%和Hb H 3%。基因检测结果均显示为α-珠蛋白基因27.6 kb缺失复合东南亚缺失型突变(--^(SEA)/-α^(27.6))。结论:在广西地区发现-α^(27.6)缺失型突变,当复合东南亚缺失型突变可导致Hb H病,临床上表现为中度贫血,Hb分析有Hb Bart’s和Hb H。此类型基因突变较为罕见,容易漏诊,需进一步的基因分析确诊。

HB-Continuous Mappings in L-Topological Space

In this paper, we introduce and study the notion of HB-closed sets in L-topological space. Then, HB-convergence theory for L-molecular nets and L-ideals is established in terms of HB-closedness. Finally, we give a new definition of fuzzy H-continuous [1] which is called HB-continuity on the basis of the notion of H-bounded L-subsets in L-topological space. Then we give characterizations and properties by making use of HB-converges theory of L-molecular nets and L-ideals.

HB-H-6树脂血浆灌流吸附胆红素的动物实验

目的 探讨HB-H-6树脂血浆灌流治疗黄疸犬动物模型的有效性和安全性。方法 HB-H-6树脂经过筛、酸、碱、乙醇、冷热水和高压灭菌处理,黄疸犬动物模型采用胆总管-腔静脉搭桥术,灌流方式采用血浆灌流。结果 总胆红素下降82％,直接胆红素下降76％,间接胆红素下降97％,对蛋白质没有明显吸附,对血常规、凝血指标、血气分析和钠、氯、磷没有明显影响;对钾、钙和镁吸附明显。结论 HB-H-6树脂对胆素菜素吸附率高,对治疗黄疸犬动物模型安全有效,但对钾、钙和镁吸附明显,应注意补充。

HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗慢性肝病重度黄疸适用范围

目的进一步评价HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流在治疗慢性肝病重度黄疸中的价值及最佳适用范围。方法选择2006年10月～2010年7月天津市第三中心医院94例不同病因慢性肝病重度黄疸患者,其中男性68例,女性26例;年龄29～76岁,中位年龄57岁。接受HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗,比较单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗前后血清胆红素变化;并探讨不同初始胆红素水平及初始凝血酶原活动度(PTA)水平对HB-H-6树脂吸附胆红素能力的影响。结果单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗前血清总胆红素(TBiL)、直接胆红素(DBiL)、间接胆红素(IBiL)分别为(387.80±183.08)、(238.66±103.52)、(127.23±62.00)μmol/L;治疗后分别为(291.80±135.58)、(183.10±76.29)、(92.85±54.25)μmol/L,血浆灌流治疗能显著降低治疗后血清TBiL、DBiL及IBiL的水平(P<0.01);单次HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流治疗对TBiL、DBiL及IBiL的清除率分别为23.68%±9.14%、21.54%±9.90%及27.09%±16.84%,HB-H-6树脂对IBiL的吸附能力略强于TBiL及DBiL(P<0.01)。HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流对不同层次的初始TBiL水平均有效,均能引起治疗后胆红素水平的显著降低(P<0.01);初始TBiL水平越高,HB-H-6树脂清除胆红素的绝对值越高(P<0.01);对初始TBiL水平在200μmol/L以上HB-H-6树脂吸附能力明显高于初始TBiL水平在200μmol/L以下时(P<0.01)。HB-H-6树脂吸附胆红素的能力不受初始PTA影响;无明显不良反应。结论 HB-H-6树脂吸附胆红素血浆灌流作为黄疸的人工肝治疗方法之一,安全有效,且适用于TBiL浓度200μmol/L以上的重度黄疸患者。

用HB-H-6树脂血浆灌流清除细胞因子治疗银屑病的临床研究

目的观察血液灌流治疗严重银屑病患者细胞因子的变化及与临床疗效的关系。方法选择5例银屑病患者,其中男性4例,女性1例,平均年龄32.1岁。均伴有重型肝炎或药物性肝损伤。在常规药物治疗基础上进行血浆灌流治疗,灌流前后分别取患者血浆,测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8),检测其他相关生物化学、临床指标并观察记录临床表现情况。结果血液灌流前后比较,TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8均显著下降(P<0.05),血浆胆红素显著下降(P<0.05),其他生物化学及临床指标变化不明显,患者临床治疗效果明显。结论血液灌流能吸附严重银屑病患者血浆中的TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8,能明显改善临床症状,可以成为严重银屑病的新的治疗手段。

HbH病的α基因分析与临床观察

本文应用限制性内切酶、α珠蛋白基因探针分析了24例HbH病,并进行了临床观察和血液学分析;结果9例为非缺失型与α地贫_1双重杂合子,5例为HbCS与α地贫_1双重杂合子;他们病情重,有11例作了牌切除。另10例是α地贫_2与α地贫_1双重杂合子,临床症状和贫血程度轻,脾切除的仅1例。

NH_4HB_4O_7·3H_2O为硼源添加剂高温高压合成金刚石研究

为了研究金刚石中硼元素含量对合成金刚石的颜色与热稳定性的影响。以石墨粉体和Fe70Ni30合金触媒为原料，NH4HB4O7·3H2O为硼源添加剂，采用静态高温高压技术合成出金刚石。利用体视显微镜观察合成金刚石的颜色；AES检测金刚石中B元素的含量；TG—DSC进行热稳定性分析。结果表明：合成金刚石的初始氧化温度均超过837℃，最高达到917．8℃；1200℃时热失重率在59％-96％之间，放热峰值在893—1144℃之间；随着硼元素含量的增加，合成金刚石的颜色由淡黄色逐渐向黑色转变，热稳定性提高。

HB-H-7树脂用于内毒素吸附的体外实验研究

目的:体外实验探讨使用HB-H-7树脂血浆灌流吸附内毒素的有效性和安全性。方法:静态吸附实验:取内毒素阳性病人血浆10ml、树脂1ml(树脂与血浆按体积比1:10比例混合),置37℃恒温水浴震荡2h,震荡前后测定血浆内毒素、蛋白质和电解质浓度,计算吸附率;动态吸附实验:取内毒素阳性病人血浆50ml,将HB-H-7树脂5ml置入一自制灌流器中,以输液泵控制血浆流速为4ml/min进行血浆灌流,灌流时间为2h,灌流前及灌流30、60和120min取样测定血浆内毒素浓度,计算吸附率并与静态吸附实验比较。用紫外分光光度计扫描树脂浸液上清,测定溶出物。结果:HB-H-7树脂吸附后,血浆中的内毒素含量显著降低(P<0.05);血浆中的蛋白质变化较小(P<0.05)、电解质无显著变化(P>0.05),动态吸附率高于静态吸附率(P>0.05)。以紫外分光光度计检测树脂浸液的上清,结果显示基本不含有溶出物。结论:HB-H-7树脂对血浆中的内毒素有明显吸附效果,对电解质无明显影响,对蛋白质有一些影响,可以进一步进行血浆灌流治疗内毒素血症的体内研究。

15例Hb Westmead复合东南亚缺失型α地中海贫血1分析

目的分析Hb Westmead(HbWS)复合东南亚缺失型α地中海贫血(地贫)1的临床和血液学特点,以更好指导临床遗传咨询。方法临床检查、血液学分析、血红蛋白分析和基因检测确诊的HbWS复合东南亚缺失型α地贫1患者15例,男6例,女9例,年龄2～34岁。以Cell Dyn1700全自动血细胞分析仪进行血细胞分析,以电泳法和高效液相法进行血红蛋白分析和血红蛋白F和血红蛋白A2定量检测,以Gap-PCR技术和反向斑点杂交技术分别检测缺失型和突变型α地贫基因。结果15例患者中只有6例有贫血,且均较轻,血红蛋白最低93g/L,平均红细胞体积和平均红细胞含量均低于正常,血红蛋白分析均无HbH区带,但均有较少量的HbBart’s,基因型为ααWS/--SEA。结论Hb WS复合东南亚缺失型α地贫1的临床特点有别于其它组合的HbH病,贫血较轻或不贫血。

HB-H-6树脂的血液相容性研究

目的:用白蛋白预充技术改善HB-H-6树脂的血液相容性。方法:实验分为两部分,首先用HB-H-6树脂对血浆和全血进行体外动静态吸附实验,对比二者之间共有成分之间的差异;然后用白蛋白预充后的HB-H-6树脂和未预充的HB-H-6树脂对全血进行体外动静态吸附实验,对比未预充组与预充组血细胞与血小板的变化情况。结果:(1)血浆未预充组和全血未预充组的动静态吸附实验结果表明,未经处理的HB-H-6树脂对血浆和全血之间共有成分的吸附效果基本一致,灌流前后仅部分电解质有所变化。(2)动静态实验结果均表明,全血预充组中白细胞、红细胞和血小板的吸附率较全血未预充组均明显改善。结论:白蛋白预充技术改善了HB-H-6树脂的血液相容性,为临床上直接进行全血灌流提供了理论基础。

广西地区200例儿童α地中海贫血血红蛋白H病基因突变的研究

目的:对广西地区儿童α地中海贫血血红蛋白H病(Hb H病)进行基因分析,明确基因突变类型。方法:应用多重PCR、反向斑点杂交及DNA测序方法进行α地中海贫血基因突变分析;应用统计软件SPSS13.0对数据进行统计分析。结果:200例Hb H病患儿检出104例缺失型Hb H病,占52.0%,包括67例--SEA/-α3.7,36例--SEA/-α4.2,1例--Thai/-α3.7;非缺失型HbH病96例,占48.0%,包括86例--SEA/αCSα,8例--SEA/αQSα,1例--Thai/αCSα及1例--SEA/α△30α。血红蛋白分析显示非缺失型Hb H病患儿的Hb H水平高于缺失型Hb H病(P<0.001)。结论:广西地区儿童Hb H病基因突变类型多样,以缺失型HbH病为主。首次在广西儿童中检出罕见的α2珠蛋白基因密码子30缺失及泰国缺失型α地中海贫血导致的Hb H病,丰富了Hb H病基因突变的研究,可为遗传咨询及将来的产前诊断提供重要的依据和指导。

泰国缺失型α-地中海贫血1导致血红蛋白H病的产前诊断

目的探讨泰国缺失型α-地中海贫血1(泰国缺失型)导致的血红蛋白H病(Hb H病)产前诊断方法。方法收集2010年6月～2011年12月间在广西妇幼保健院优生遗传门诊就诊的3对可能生育泰国缺失型Hb H病胎儿夫妇,采用先后检测常规6种常见α-地中海贫血(α-地贫)基因型和检测泰国缺失型的方法,对这3对高风险夫妇进行产前诊断。结果 3对夫妇产前诊断胎儿均为Hb H病,1例是泰国缺失型复合右侧缺失型双重杂合子,基因型是(--THAI/-α3.7);1例是泰国缺失型复合左侧缺失型双重杂合子,基因型是(--THAI/-α4.2);1例是泰国缺失型复合HbWestmead双重杂合子,基因型是(--THAI/αWSα)。结论综合分析常规检测和泰国缺失型检测结果 ,能有效的产前诊断泰国缺失型导致的Hb H病。

两个NIH小鼠种群对不同种类的乙肝疫苗免疫应答效应的比较

目的比较两种不同的NIH小鼠种群基因组DNA中H-2q单倍型的百分比,对重组基因乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)、重组基因乙型肝炎疫苗(CHO)、重组基因乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)和治疗性乙型肝炎疫苗(乙克)免疫应答的影响。方法检测乙肝疫苗免疫效力用酶标法,测定乙肝疫苗的ED50值,再通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分数,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性。结果经验证,经1号NIH小鼠检测结果证实,重组基因乙型肝炎免疫效力依次为CHO>汉逊>酿酒,疗性乙型肝炎疫苗(乙克)效力检测合格,但经2号NIH小鼠检测结果显示除CHO疫苗合格外,其他三种疫苗检测结果均为不合格。基因检测结果为,1号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,而2号种群NIH小鼠含有H-2q型基因基因百分比为30%,因此不同的q型基因百分比导致了不同的检测结果。结论根据本研究结果表明虽然NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,但不同来源的小鼠种群之间会存在差异,经不同的环境饲养后,小鼠的基因会发生不同的变化,因此在进行生物制品检定时,要注意不同品系小鼠及同一品系小鼠不同种群之间的差异对试验本身的影响。建立一种"动物免疫"的概念。

大豆液泡膜H^+-ATPase功能与构象关系的初步研究

大豆液泡膜V型H+ ATPase是ATPases中的一种 ,它在植物细胞的生长发育中有重要的作用 .利用竹红菌乙素 (HB)和KI这两种分别猝灭蛋白质疏水区域内源荧光和亲水区域内源荧光的荧光猝灭剂 ,在不同pH值、温度条件下对纯化的大豆液泡膜V型ATPase进行荧光猝灭实验 ,初步探讨了V型H+ ATPase的水解活性同其蛋白质折叠状态间的关系 .研究表明 ,通过比较不同 pH值、温度条件下蛋白质疏水区域和亲水区域内源荧光的荧光猝灭常数 (KSV) ,发现当环境pH值、温度偏离酶的最适 pH值和温度时 ,蛋白质的内源荧光强度降低且疏水区域和亲水区域内源荧光的荧光猝灭常数 (KSV)降低 ,说明伴随着酶的水解活性降低 ,蛋白质的折叠状态发生了变化 .我们认为蛋白质在膜内的折叠状态变化是酶失活机制的一个重要方面 。

抗氧化Ⅱ号治疗血红蛋白H病9例的临床研究

从中药筛选纯品抗氧化Ⅱ号（ＡＡ２）治疗血红蛋白Ｈ病９例，男性４例，女性５例，年龄４－２５岁，平均１１．２岁，轻度至中度贫血，肝肿大２例，脾肿大者８例、Ｈｂ４６－８８ｇ／Ｌ，平均６９．３ｇ／Ｌ，ＨｂＨ成分０．０９１－０．１８，平均０．１２，红细胞包涵体均为阳性。治疗结果７例Ｈｂ增加７－１９ｇ／Ｌ，平均１１．２ｇ／Ｌ，红细胞增加（０．１２－０．６８）×１０（１２）／Ｌ，平均０．３５×１０（１２）／Ｌ，网织红细胞增加０．０１－０．０５，平均０．０２４。未观察到毒副作用。

广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

目的:对广东省湛江地区血红蛋白H病(Hb H病)进行基因分析,了解其基因突变类型及临床特征。方法:采用血常规、血红蛋白分析、Gap-PCR及荧光PCR熔解曲线法、DNA测序等方法对Hb H病进行基因分析。结果:83例Hb H病患者中检出73例缺失型Hb H病(88.0%),包括--SEA/-α3.7 51例,--SEA/-α4.2 22例。检出10例非缺失型Hb H病(12%),包括--SEA/αCSα7例,--SEA/αQSα1例,--SEA/αPoly Aα2例。非缺失型Hb H病血常规结果显示,红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)的平均水平比缺失型Hb H病低,非缺失型Hb H病的Hb H平均水平比缺失型Hb H病的高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:湛江地区Hb H病基因类型以缺失型为主,其中--SEA/-α3.7最多见,--SEA/-α4.2次之。非缺失型Hb H病比缺失型Hb H病的贫血严重,非缺失型Hb H病比缺失型Hb H病的Hb H含量高。首次在广东地区发现--SEA/αPoly AαHb H病,临床上有中度贫血。

血红蛋白H病的治疗进展

α-地中海贫血是人类最常见的遗传性血红蛋白病,根据α-基因缺陷的数目(1~4个),可引起从无症状到致命性的疾病。当有3个α-基因缺失或突变时,导致血红蛋白H病(HbH病),α-珠蛋白与β-珠蛋白比例失衡,引起红细胞无效生成和外周循环溶血,导致贫血、铁过载与脾肿大等,最终可导致一系列严重的并发症。HbH病可分为缺失型与非缺失型,在我国最常见非缺失型是Hb CS(Hemoglobin Constant Spring),非缺失型患者的症状往往更重。可以通过检测血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞的平均体积(MCV)、平均血红蛋白浓度(MCH)及红细胞分布宽度(RDW)对HbH病患者进行筛查,通过基因分析可以确诊,早期的诊断,对于疾病的管理和预后有着重要的意义。HbH病的治疗以预防和支持治疗为主,必要时进行输血、铁螯合治疗及脾切除治疗,实验证明中医治疗对HbH病有一定效果。

HB-H-6树脂血浆灌流治疗重度黄疸患者预后的影响因素分析

目的探讨HB—H-6树脂血浆灌流治疗对重度黄疸患者预后的影响因素。方法同顾性分析本院2006年10月至2010年7月住院接受HB—H-6树脂血浆灌流治疗的78例慢性肝性重度黄疸患者的资料，根据预后分为有效组（51例）及无效组（27例），采用多元logistic回归方法评价年龄、性别、住院天数、人工肝治疗次数、灌流前Child-Pugh积分、灌流前总胆红素（TBil）及平均TBil反弹率等因素对预后的影响作用。结果78例患者人均接受HB—H-6树脂血浆灌流治疗（3-3l±1．36）次。有效组灌流前Child-Pugh积分（分）、灌注前TBil水平（μmol／L）和平均TBil反弹率显著低于无效组[灌流前Child—Pugh积分：8．06±1．01比9．44±1．19．灌流前TBil：384．29±170．4l比504．93±206．88，平均TBil反弹率：-（7．35±20．76）％比（37．324-23．22）％]，且两组性别也存在明显差异（有效组男性30例、女性21例，无效组男性24例、女性3例，P〈0．05或P〈0．01）。多因素logistic回归分析表明，性别和平均TBil反弹率是影响HB-H-6树脂血浆灌流治疗慢性肝性重度黄疸预后的独立危险因素，两者的偏回归系数／3值分别为5．35和-2．82（χ2=64．42，P=0．000）。用平均TBil反弹率预测预后不良的受试者T作特征曲线下面积（AUC）为0．90（0．82，0．97），平均TBil反弹率高于29．5％提示预后不良。灌流后无明显不良反应。结论性别和平均TBil反弹率是决定HB—H-6树脂血浆灌流治疗慢性肝性重度黄疸预后疗效的独立危险因素，平均TBil反弹率高于29．5％提示预后不良：

非缺失型HbH病基因突变类型的研究

采用选择性聚合酶链反应扩增技术及等位基因特异寡核苷酸探针斑点杂交，分析了１２例经血液学检测及基因图谱分析确认为非缺失型ＨｂＨ病的样品。结果显示，１２例非缺失型ＨｂＨ病样品中，ＨｂＣｏｎｓｔａｎｔＳｐｒｉｎｇ８例（６６．７％），Ｈｂ广西２例（１６．７％），２例为未知突变类型（１６．７％），对这２例未知样品的α＿２％基因外显子ＩＩＩ及其旁侧的突变热点区域进行了扩增、克隆和测序，结果发现这２例的α＿２基因密码子１２４均有ＴＣＣ→ＴＣＧ突变，其中１例的α＿２基因３＇非编码区第３６位碱基发生Ａ→Ｃ突变。