榄香烯诱导肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3凋亡的实验研究

研究了榄香烯诱导肝癌腹水瘤细胞系ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３凋亡的作用。结果表明：凋亡抑制基因ｂｃｌ２在对照组呈高度表达，榄香烯作用后，可使强表达ｂｃｌ２细胞数显著减少（Ｐ＜０．０１）；ＤＮＡ凝胶电泳结果表明榄香烯可使ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３ＤＮＡ出现凋亡特征（呈慧星状或梯形条带）。提示榄香烯可能通过使ＤＮＡ断裂及抑制ｂｃｌ２表达而诱导该细胞株凋亡，榄香烯诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。

榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3的抗肿瘤作用及对细胞周期的影响

榄香烯可明显抑制ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３ 细胞的增殖，杀伤肿瘤细胞，榄香烯对Ｇ０／Ｇ１ 期细胞无明显作用，主要作用于Ｓ 期，阻止由Ｓ 期进入Ｇ２／ Ｍ 期，从而抑制肿瘤生长；可在Ｇ０／Ｇ１

扶正荡邪合剂诱导肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/cl-16A_3凋亡的实验研究

扶正荡邪合剂可使小鼠腹水肝癌细胞ＨｃａＦ２５／ｃｌ１６Ａ３ＤＮＡ凝胶电泳出现梯形条带；ｂｃｌ２蛋白表达显著减少，ＳＤＳ聚丙烯凝胶电泳２５ＫＤ蛋白含量显著降低。提示该合剂通过使ＤＮＡ断裂及抑制ｂｃｌ２表达而诱导该细胞的凋亡。

榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3的抗肿瘤作用机理的实验研究 Ⅳ.榄香烯的抗肿瘤作用及光镜、透射电镜的观察

本文研究了榄香烯对Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３肝癌腹水瘤细胞系的抗肿瘤作用。结果表明，体外试验榄香烯能直接引起肿瘤细胞变性坏死，整体实验中榄香烯也可使肿瘤细胞亚细胞结构改变。

榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3抗肿瘤作用机理的实验研究 Ⅲ.榄香烯对小鼠血清脂肪酸组分相对百分浓度变化的影响

用气相色谱法测定了正常及荷瘤小鼠血清脂肪酸组分的相对百分浓度，同时研究了榄香烯对荷瘤小鼠血清脂肪酸的影响。结果表明，荷瘤小鼠血清中十六碳一烯酸、十八碳二烯酸、十八碳三烯酸、二十碳五烯酸相对百分浓度均显著低于正常小鼠，榄香烯腹腔注射可使荷瘤小鼠血清中十八碳三烯酸含量显著增高，提示榄香烯可能通过影响血清中脂肪酸成分比例而影响肿瘤的生长。

THE STUDY OF ELEMENE OF INDUCTION APOPTOSIS ON ASCITES HEPATOMA CELL LINE Hca-F25/CL-16A3

Objective: To investigate the effect of inducing apoptosis of Elemene on ascites hepatoma cell line Hca F25/cL 16A3. By using immunhistochemistry and DNA electrophoresis, the mechanism of Elemene antitumor was studied. Results: The results showed that the Elemene can inhibit expression of bcl 2 in ascites hepatoma cell line Hca F25/CL 16A3, and the Elemene also can make DNA fragmentation in this cell line in vitro and in vivo . Conclusion: The data suggest that Elemene can inhibit the growth of tumor by inducing apoptosis.

CLONING AND DETERMINING OF BAC GENE AND Bcl-2 ANDCDK4 EXPRESSION ON ASCITES HEPATOMA CELLLINE Hca-F25125CL-16A3

Objective: TO study the mechanism of cancer, theDNA for BAC was cloned from an ascites hepatoma cellline Hca-F25lCL-16A3 using PCR. Methods: The nucleotide sequences were determined using ABI PRISMTM377 DNA sequencer. The expression of hcf-2 and CDK4gene were determined using im munohis tochemis try.Results: The sequences of BAC segment on Hca-F25lCL-16A3 have nearly identical sequences withhuman BAC. The hcl-2 and CDK4 are highly expressionon this cell line. Conclusion: The highly expression ofhcf-2 and CDK4 may the one of mechanisms for tumorgrowth.

MG、25(OH)D3及CXCL16对高血压脑梗死合并认知功能障碍的评估价值

目的 分析甲基乙二醛(MG)、25-羟维生素D3[25(OH)D3]、CXC趋化因子配体16(CXCL16)对高血压脑梗死合并认知功能障碍的评估价值。方法 收集2018年10月至2020年12月河北大学附属医院收治的199例高血压脑梗死患者的临床资料,根据是否合并认知功能障碍分为合并认知功能障碍者(合并组),未合并认知功能障碍者(未合并组),比较两组MG、25(OH)D3、CXCL16水平变化情况及蒙特利尔认知评分(MoCA)。分析MG、25(OH)D3、CXCL16与认知功能的相关性,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析上述因子对高血压脑梗死合并认知功能障碍的预测价值。结果 199例患者中,合并认知功能障碍者102例(合并组),未合并认知功能障碍者97例(未合并组)。合并组MG、CXCL16水平明显高于未合并组,25(OH)D3水平、MoCA评分明显低于未合并组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析发现,MG、25(OH)D3、CXCL16是高血压脑梗死合并认知功能障碍的独立危险因素。相关性分析结果显示,MG、CXCL16与MoCA评分呈负相关(P<0.05),25(OH)D3与MoCA评分呈正相关关系(P<0.05)。ROC曲线结果显示,MG+25(OH)D3+CXCL16三者联合检测对高血压合并AMI预测敏感度和特异度分别为0.903、0.865,AUC=0.890,明显高于各项指标单独预测(P<0.05)。结论 MG、25(OH)D3、CXCL16与高血压脑梗死认知功能密切相关,在临床中监测三者水平变化有助于高血压脑梗死患者认知功能障碍的临床诊断。

子痫前期患者的血清25(OH)-D_(3)、CXCL16、sFlt-1水平及其诊断价值

目的 探讨子痫前期患者的血清25羟基维生素D_(3)[25(OH)-D_(3)]、CXC趋化因子配体16(CXCL16)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)水平及其诊断价值。方法 选取2019年9月至2021年2月我院收治的108例子痫前期患者作为子痫前期组,按照病情严重程度将其分为轻度子痫前期组(62例)与重度子痫前期组(46例),并于同期选取健康孕妇60例作为健康对照组。比较各组的25(OH)-D_(3)、CXCL16、sFlt-1水平;采用Spearman法分析各血清指标与子痫前期患者病情严重程度的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析各指标单独及联合检测的诊断效能。结果 子痫前期组的25(OH)-D_(3)水平明显低于健康对照组,CXCL16及sFlt-1水平明显高于健康对照组(P<0.05)。轻度子痫前期组的25(OH)-D_(3)水平明显高于重度子痫前期组,CXCL16及sFlt-1水平明显低于重度子痫前期组(P<0.05)。25(OH)-D_(3)水平与子痫前期患者病情严重程度呈负相关(r=-0.551,P<0.05),CXCL16及sFlt-1水平与子痫前期患者病情严重程度呈正相关(r=0.550、0.494,P<0.05)。25(OH)-D_(3)、CXCL16、s Flt-1单独及联合检测诊断子痫前期的AUC分别为0.822、0.821、0.788、0.920;各指标联合检测诊断子痫前期的AUC明显高于单独检测(P<0.05)。结论 25(OH)-D_(3)、CXCL16、sFlt-1参与子痫前期的发生、发展,随着病情的发展,25(OH)-D_(3)水平下降,CXCL16、sFlt-1水平上升,且25(OH)-D_(3)、CXCL16、sFlt-1联合检测在子痫前期中具有较高的诊断价值。

不同控制水平哮喘患儿血清25(OH)D3、CC16水平和FeNO的变化及临床意义

目的探讨不同控制水平哮喘患儿血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]、Clara细胞分泌蛋白16(CC16)水平和呼出气一氧化氮(FeNO)的临床意义。方法选取郑州大学附属儿童医院106例哮喘患儿为研究对象,依据哮喘控制水平分级标准分为良好控制组、部分控制组及未控制组。选取同期该院50例健康体检儿童为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组儿童血清25(OH)D3、CC16、白细胞介素-4(IL-4)、血管内皮生长因子(VEGF)水平,并行FeNO测定,运用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清25(OH)D3、CC16、IL-4、VEGF及FeNO对哮喘未控制的诊断价值。结果良好控制组、部分控制组及未控制组患儿血清25(OH)D3、CC16水平低于对照组(P<0.05),未控制组低于部分控制组及良好控制组(P<0.05);良好控制组、部分控制组及未控制组患儿血清IL-4、VEGF水平和FeNO值高于对照组(P<0.05),未控制组高于部分控制组及良好控制组(P<0.05);血清25(OH)D3与CC16呈正相关(P<0.05),与IL-4、VEGF及FeNO呈负相关(P<0.05);ROC曲线结果显示血清25(OH)D3、CC16诊断哮喘未控制的曲线下面积分别为0.902[(95%CI:0.809,0.966),P=0.001]和0.764[(95%CI:0.621,0.907),P=0.003],截断值分别为18.523 ng/ml、10.741μg/L,特异性分别为83.6%和76.4%,敏感性分别为89.2%和82.7%。结论哮喘患儿血清25(OH)D3、CC16与哮喘控制水平相关,检测哮喘患儿血清25(OH)D3及CC16水平,同时动态监测FeNO,对评估哮喘控制水平及调整治疗方案具有指导意义。

妊娠13～16周妇女血25-羟维生素D3水平和妊娠期糖尿病发病的关系临床研究

目的研究分析妊娠13-16周妇女25-羟维生素D3水平与患有糖尿病之间的关系。方法择取2014年02月-2014年08月妇产科接受产检及分娩的88例妊娠期糖尿病患者作为观察组,及同期的88例正常妊娠妇女作为对照组。分别检测妊娠13-16周时血25-羟维生素D3的含量。结果观察组患者的血25-羟维生素D3含量明显小于对照组,差异P〈0.05有统计学意义。观察组糖耐量测试1小时血糖异常患者的25-羟维生素D3水平显著小于糖耐量测试1 h血糖正常的患者,差异P〈0.05有统计学意义。结论妊娠13-16周时,患者血25-羟维生素D3含量越低,患有糖尿病的风险越高;25-羟维生素D3含量低下可能与糖尿量测试后1小时血糖增高具有显著相关性。

人参皂甙Rg3抑制小鼠肝癌淋巴道转移作用及其对免疫功能的影响

目的:观察人参皂甙Rg3抑制小鼠肿瘤生长及抗淋巴结转移的作用及对免疫功能的影响。方法:以Hca-F25//6A3-F(F)接种于615近交系小鼠,建立肝癌淋巴道转移动物模型,分为5组:Rg3预防组(接种肿瘤前给Rg3)、Rg3治疗组(Rg3)、阳性对照组(PDD)、联合治疗组(Rg3+PDD)和阴性对照组(生理盐水),比较各组的原发瘤抑制率和转移淋巴结抑瘤率,并通过流式细胞仪方法分析各组免疫指标CD4/CD8的变化。结果:联合治疗组原发瘤的抑瘤率明显提高,与阴性对照组相比具有统计学上明显差异(P<0·05);淋巴结转移抑制率含Rg3组均较阴性对照组高;Rg3预防组和Rg3治疗组CD4/CD8比值与阴性对照组相比升高,具有统计学上明显差异(P<0·05)。结论:人参皂甙Rg3具有明显的抗肿瘤作用,可以增强化疗药物PDD的抗癌作用,及抑制淋巴道转移作用,并提高荷瘤小鼠免疫功能。

citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症的SLC25A13基因IVS16ins3kb突变类型分析

目的探讨citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿SLC25A13基因IVS16ins3kb突变类型的第二代测序技术(NGS)数据分析特点。方法选择2017年7月与2020年4月,浙江大学医学院附属金华医院儿科收治的符合NICCD临床诊断标准,采用染色体组分析工具箱(GATK)、XHMM、CNVkit软件,对患儿NGS靶向外显子捕获测序数据进行单核苷酸变异(SNV)、插入与缺失突变、拷贝数变异(CNV)分析,仅提示SLC25A13基因单个位点杂合突变的2例患儿(患儿1、2)为研究对象。采用回顾性分析方法,收集患儿1、2的临床病例资料,包括病史、实验室检查结果、基因检测结果、治疗与预后等。利用福君基因动态实验室信息管理系统3.0(FLIMS系统),采用split read方法,对患儿1、2的NGS靶向外显子捕获测序原始数据(fastq格式)进行IVS16ins3kb突变类型分析,并采用长链、高保真PCR(LA-PCR)方法进行验证。本研究遵循的程序符合浙江大学医学院附属金华医院医学伦理委员会规定,并获得该委员会批准(审批文号:2018-119)。结果①病史采集:患儿1(女性)与患儿2(男性),分别因皮肤黄染2个月余与4个月余,于本院就诊,就诊时年龄分别为2个月+19 d、4个月+16 d,均为足月儿、均无家族遗传性疾病史。②实验室检查、治疗:入院时,对患儿1、2干血片采取串联质谱仪进行遗传代谢病检测结果显示,血液中瓜氨酸、甲硫氨酸等多种氨基酸含量显著增高;肘静脉血生化检查结果显示,血清氨、乳酸浓度及血清总胆红素(STB)、血清直接胆红素(SDB)、血清间接胆红素(SIB)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶均异常增高。对患儿1、2均采取无乳糖配方奶喂养3个月后,血液生化指标均明显好转。③NGS靶向外显子捕获及Sanger测序法验证结果:采用GATK、XHMM、CNVki软件对患儿1、2的NGS靶向外显子捕获测序数据进行SNV、插入与缺失突变、CNV分析结果提示,分别存在SLC25A13基因9号外显子c.852_855delTATG、16号外显子c.1638_1660dup杂合移码、功能缺失性热点突变,经Sanger测序法验证,上述突变分别遗传自患儿1、2父亲。④使用split read方法,对患儿1、2的NGS靶向外显子捕获测序原始数据(fastq格式)进行分析发现,SLC25A13基因16号内含子区域特征性split read一端为6号染色体DNA序列,另一端为7号染色体DNA序列,SLC25A13基因16号内含子区域特征性split read发生结构变异,可能为7号染色体SLC25A13基因发生IVS16ins3kb插入突变。⑤采用LA-PCR方法验证结果提示,患儿1、2分别存在SLC25A13基因c.852_855delTATG+IVS16ins3kb及c.1638_1660dup+IVS16ins3kb复合杂合热点突变,均被确诊为NICCD患儿。结论对于NGS结果呈阴性或检出SLC25A13基因单个位点杂合突变的临床疑似NICCD患儿,可采用split read方法,对其NGS原始数据(fastq格式)进一步进行IVS16ins3kb突变分析,降低对该病患儿漏诊及误诊率。

当归补血汤对小鼠肝癌淋巴道转移和脾细胞凋亡的影响

当归补血汤能明显抑制小鼠肝癌ＨｃａＦ２５／１６Ａ３淋巴结转移率和淋巴结转移程度，其作用机制是通过抑制脾细胞凋亡。

抗癌防转汤对肝癌淋巴道转移小鼠的层粘连蛋白和Ⅳ型胶原含量的影响

以层粘连蛋白和Ⅳ型胶原含量的变化为指标 ;探讨了此方药抑制淋巴道转移的作用机理 ,层粘连蛋白对内皮细胞的间接作用能增加肿瘤组织的血管化程度 ,而血管形成能刺激肿瘤细胞继续生长和转移。

香港坚木中的达玛烷型三萜

从楝科植物香港坚木（Ｄｙｓｏｘｙｌｕｍｈｏｎｇｋｏｎｇｅｎｓｅ（Ｔｕｆｃｈ．）Ｍｅｒ）的树叶中分得了４个新的达玛烷型三萜，基于详细的光谱分析及与同类化合物的光谱数据比较鉴定了其结构，分别命名为：２０Ｒ，２４Ｒ－表－２５－达玛烷烯－３－酮（３），１６β－羟基达玛烷－２０（２２），２５－二烯－３－酮（４），２６－羟基达玛烷－２０，２４－二烯－３－酮（５）和３β－乙酰基－７α，２１Ｓ，２５－三羟基－２１Ｓ，２３Ｒ－表－９（１１）－达玛烷烯（８）。

近十年来我国内部控制研究主题分析

内部控制作为公司提升经营业绩、财务报告可靠性的重要方式,其重要性日益凸显,上市公司内部控制的实施及相关信息披露已经成为强制性要求。我国关于内部控制领域的学术研究也较多,现通过总结2007年-2016年十年间《会计研究》《审计研究》《管理世界》期刊发表的与内部控制主题相关的文献,试图分析我国与内部控制相关的理论研究的发展轨迹和方向,并结合分析结果对未来的研究方向和重点提出建议。

灰毛浆果楝茎的化学成分

目的研究灰毛浆果楝Cipadessa cinerascens茎的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱与Sephadex LH-20凝胶柱色谱进行分离纯化,并运用各种波谱方法对分离的化合物进行结构鉴定。结果从灰毛浆果楝茎中分离得到17个化合物,分别鉴定为羊毛甾-7-烯-3-酮-22,25-环氧-23,24-丙酮乙缩醛(1)、chisopanin M(2)、3β-羟基-5-烯-豆甾(3)、7α-羟基-4-烯-3-酮-豆甾(4)、3β-羟基-5-烯-7-酮-豆甾(5)、7α-羟基-谷甾醇(6)、22E-7α-甲氧基-5α,6α-环氧-8(14),22-二烯-3β-羟基麦角甾(7)、7β-羟基-4-烯-3-酮-胆甾(8)、3β-乙酰氧基-2β,4β-二羟基-16-酮-孕甾(9)、17α,20R-二羟基-3,16-二酮-孕甾(10)、2β,3β-二羟基-16-酮-孕甾(11)、3β,7α-二羟基-20-酮-孕甾(12)、2α,3β-二羟基-5-烯-20-酮-孕甾(13)、1,4-二烯-3,16-二酮-2-羟基雄甾(14)、5-烯-17-酮-3β,16β-二羟基雄甾(15)、芹菜素(16)和annuionone D(17)。结论除化合物14和17外,其余化合物均为首次从灰毛浆果楝中分离得到。

肾母细胞瘤患儿外周血调节性T细胞和自然杀伤T细胞的表达研究

目的研究肾母细胞瘤患儿外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞(Treg)和CD3^+CD16^+CD56^+自然杀伤T细胞(NKT)的表达变化,初步探讨发生改变的原因及其临床意义。方法选取2015年11月至2016年7月就诊的21例肾母细胞瘤患儿作为病例组,21例于本院体检的同年龄段健康儿童为健康对照组,采用流式细胞术检测两组儿童外周血中CD4^+CD25^+CD127^(low) T细胞占CD4^+T细胞百分比和CD3^+CD16^+CD56^+T细胞占CD3^+T细胞百分比,分别代表Treg水平和NKT水平。结果病例组肾母细胞瘤患儿外周血Treg水平低于健康对照组(P<0.05);病例组肾母细胞瘤患儿外周血NKT水平高于健康对照组(P<0.05)。结论 Treg和NKT水平变化与肾母细胞瘤的发生与发展有关,Treg和NKT水平可能是反映肾母细胞瘤患儿免疫功能状态的较好指标。