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Hcmv-miR-UL112荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
陈琼娜
沈凯
+6 位作者
黄燕燕
査瑶
方建玮
续力云
周吉航
陈芬
刘晓光
《医学研究杂志》
2016年第4期53-56,共4页
目的建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法根据miRBase网站中公布的hcmv-miRUL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性...
目的建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法根据miRBase网站中公布的hcmv-miRUL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃10min,53℃2min;95℃15s,57℃40s,共40个循环。该方法的批内变异系数CV和批间CV均<5%,相关系数R2均>0.99,扩增效率均>90.0%。结论成功建立了一种敏感度高、特异性强、重复性好并且简便快速的hcmv-miR-UL112荧光定量qRT-PCR检测方法。
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关键词
hcmv
-
mir
-
ul
112
MICRORNA
RT
-
PCR
荧光定量
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职称材料
题名
Hcmv-miR-UL112荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
陈琼娜
沈凯
黄燕燕
査瑶
方建玮
续力云
周吉航
陈芬
刘晓光
机构
舟山医院检验中心
舟山医院心血管内科
舟山医院细胞分子生物学实验室
温州医科大学
出处
《医学研究杂志》
2016年第4期53-56,共4页
基金
浙江省自然科学基金资助项目(LY13H020001,LQ13H10001)
浙江省公益性技术应用研究计划(2012C37036)
舟山市科技计划项目(2011C32004,2012C13024)
文摘
目的建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法根据miRBase网站中公布的hcmv-miRUL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃10min,53℃2min;95℃15s,57℃40s,共40个循环。该方法的批内变异系数CV和批间CV均<5%,相关系数R2均>0.99,扩增效率均>90.0%。结论成功建立了一种敏感度高、特异性强、重复性好并且简便快速的hcmv-miR-UL112荧光定量qRT-PCR检测方法。
关键词
hcmv
-
mir
-
ul
112
MICRORNA
RT
-
PCR
荧光定量
Keywords
hcmv - mir - ul112
mir
NA
RT
-
RCR
Fluorescent quantitative
分类号
R71 [医药卫生—妇产科学]
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Hcmv-miR-UL112荧光定量RT-PCR检测方法的建立
陈琼娜
沈凯
黄燕燕
査瑶
方建玮
续力云
周吉航
陈芬
刘晓光
《医学研究杂志》
2016
2
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