硫酸软骨素纳米硒的结构表征及其对Hela细胞迁移和侵袭的影响

对硫酸软骨素纳米硒(selenium-chondroitin sulfate nanoparticles,SeCS)的结构进行鉴定,并考察其对Hela细胞迁移和侵袭的影响。以硫酸软骨素为模板,采用亚硒酸钠-维生素C氧化还原法制备SeCS,并运用透射电镜、扫描电镜、X射线光电子能谱仪和傅立叶红外光谱仪对SeCS进行结构表征;通过划痕实验和细胞迁移侵袭实验(Transwell)检测SeCS对Hela细胞迁移及侵袭的影响;通过Western blot免疫印迹法检测SeCS对细胞内基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)表达水平的影响。实验结果表明,制备所得的SeCS是零价态的分散良好的球形纳米粒,表面光滑。Hela细胞经20μg/mL SeCS处理后,细胞的迁移率和侵袭率分别从对照组的100%下降到(59.19±7.74)%和(82.43±4.21)%,表明SeCS能够抑制细胞的迁移和侵袭。进一步的研究发现,SeCS下调了MMP-2和MMP-9蛋白的表达量,表明SeCS通过降低MMP-2和MMP-9的蛋白表达来抑制细胞的迁移和侵袭。

UC001kfo通过靶向α-SMA对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用

目的 探讨UC001kfo是否通过靶向α-平滑肌肌动蛋白(SMA)对宫颈癌HeLa细胞生物学行为产生影响。方法 采用RT-聚合酶链反应(PCR)技术检测UC001kfo在宫颈上皮永生化细胞株H8与宫颈癌细胞株HeLa中的表达;通过转染构建空白对照组、pCDNA3.1(+)-UC001kfo组、pCDNA3.1(+)-Vector组、siRNA-UC001kfo组和siRNA-NC组;分别利用CCK-8、划痕实验、Transwell检测细胞增殖、迁移与侵袭能力;运用RT-PCR技术检测α-SMA表达水平。结果 UC001kfo在Hela细胞中表达显著高于H8细胞(P<0.05);细胞功能实验结果显示上调UC001kfo表达能显著促进HeLa细胞增殖、迁移与侵袭能力;RT-PCR结果提示,与空白对照组和pCDNA3.1(+)-Vector组比较,pCDNA3.1(+)-UC001kfo组α-SMA mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 UC001kfo在HeLa细胞中可能起促癌作用,其作用机制可能通过调节α-SMA产生对Hela细胞的影响,说明UC001kfo可能是宫颈癌靶向治疗的新型标记分子。

虫草素通过调控miR-135b-5p表达抑制宫颈癌Hela细胞侵袭、转移的实验研究

目的研究虫草素通过调控miR-135b-5p表达对宫颈癌Hela细胞侵袭、转移的影响及其调控机制。方法用浓度为50μmol/L(虫草素Ⅰ组)和100μmol/L(虫草素Ⅱ组)的虫草素处理宫颈癌Hela细胞,另设空白对照组,用MTT法测定Hela细胞的生长情况。采用Transwell法测定Hela细胞侵袭情况,采用划痕实验检测宫颈癌Hela细胞的转移能力,采用Real-time PCR法测定人永生化表皮细胞Hacat和宫颈癌Hela细胞中miR-135-5p的表达水平及不同浓度虫草素处理后对miR-135-5p的表达水平的影响。转染miR-135b-5p mimic至宫颈癌Hela细胞,并采用Transwell技术和划痕实验检测宫颈癌Hela细胞的侵袭能力和转移能力。结果加入虫草素后宫颈癌Hela细胞生长受到显著的抑制,且高浓度的虫草素抑制作用更明显(P<0.05)。宫颈癌Hela细胞中miR-135b-5p的表达水平为(1.97±0.07),显著高于人永生化表皮细胞Hacat细胞中miR-135b-5p的表达水平(1.01±0.03),组间比较差异具有统计学意义(t=28.187,P=0.000)。加入虫草素后,宫颈癌Hela细胞侵袭率和转移率及miR-135b-5p表达明显降低;且高浓度虫草素处理后,宫颈癌Hela细胞侵袭率和转移率更低,组间比较差异均具有统计学意义(t=138.614~317.100,P<0.05)。过表达miR-135b-5p显著增加宫颈癌Hela细胞的侵袭率和转移率(t=7.145,t=7.465,P<0.05),且Vimentin表达增加、E-cad表达降低(t=8.223,t=7.473,P<0.05)。结论虫草素可通过抑制miR-135b-5p表达进而抑制Hela细胞的侵袭和转移。

宫颈癌HeLa细胞外泌体与Wnt/β-catenin信号通路相关性研究

分析宫颈癌HeLa细胞外泌体对Wnt/β-catenin信号通路的作用机制。方法 选取对数生长期宫颈癌Hela细胞并以超速离心法将Hela细胞外泌体分离出来,外泌体标志蛋白通过Westernblotting检测,将Hela细胞分为实验组和对照组,细胞培养基分别含Hela细胞外泌体及无Hela细胞外泌体,细胞侵袭能力通过Transwell小室实验检测,细胞迁移能力通过细胞划痕实验检测,Wntl及β-catenin蛋白表达水平通过Westernblotting法进行检测。结果 相比于对照组,Hela细胞中有着更多的侵袭细胞数,迁移距离更长(P<0.05)。两组对比,Hela细胞中Wnt/β-catenin信号通路有着更高的Wntl及β-catenin蛋白表达水平(P<0.05)。结论 宫颈癌HeLa细胞外泌体可导致宫颈癌细胞侵袭能力以及迁移能力增强,原因可能在于Hela细胞来源外泌体可激活Wnt/β-catenin信号通路。

CXCR7对HeLa细胞增殖、粘附和侵袭能力的影响

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在肿瘤侵袭、转移过程中起着重要的调控作用.此前认为SDF-1是通过其唯一受体CXCR4来起作用.近年来发现SDF-1还有另一作用受体——CXCR7,SDF-1/CXCR7在部分肿瘤侵袭转移过程中起重要作用,但其在宫颈癌HeLa细胞中的作用目前尚未明确.通过Western blotting检测HeLa细胞中CXCR4和CXCR7的表达,阻断CXCR4或CXCR7后,通过MTT法评价细胞增殖能力,细胞粘附实验评价细胞粘附能力,Transwell实验评价细胞侵袭能力.结果表明,CXCR4和CXCR7在HeLa细胞中表达.阻断CXCR4或CXCR7后,SDF-1诱导的HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附能力均被阻断.结果提示CXCR7在SDF-1诱导HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附过程中起着重要作用,将有望成为治疗宫颈癌转移的新靶点.

膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。

黄芪甲苷下调PD-1及PD-L1的表达对宫颈癌Hela细胞侵袭和迁移的抑制作用

目的探究黄芪甲苷(Agal)对宫颈癌Hela细胞侵袭和迁移的作用和机制。方法将细胞随机分为Hela组、Agal(5 mmol/L)组、Agal(10 mmol/L)组和Agal(20 mmol/L)组并分别用0、5、10和20 mmol/L的Agal处理细胞,CCK8检测细胞增殖,Transwell实验和划痕实分别验检测细胞侵袭和迁移能力,ELISA检测培养液中炎性因子白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的质量浓度。建立宫颈癌裸鼠移植模型,RT-PCR检测血清程序性死亡分子1(PD-1)、程序性死亡受体-配体1(PD-L1)、P38和p-P38的表达。结果与Hela组比较,Agal作用细胞4 d后,Agal(5、10、20 mmol/L)组细胞增殖倍数明显降低,侵袭细胞数明显减少,划痕闭合率明显降低;同时,Agal(5、10、20 mmol/L)组血清PD-1和PD-L1的蛋白表达水平明显降低,p-P38/P38的比值也明显降低;此外,Agal(5、10、20 mmol/L)还能显著降低培养液中IL-4、TNF-α和IFN-γ的质量浓度。结论 Agal能抑制宫颈癌Hela细胞侵袭和迁移与下调PD-1及PD-L1的表达有一定的相关性。

姜黄素通过降低一氧化氮合酶水平抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭和转移

目的探讨姜黄素抗宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其可能机制。方法分别以0、10、25、50、100、150和200μmol/L浓度的姜黄素干预宫颈癌HeLa细胞。24 h后,采用MTT法观察其对HeLa细胞增殖的抑制作用,TUNEL法染色观察其对HeLa细胞凋亡的诱导作用。应用Transwell小室检测姜黄素对HeLa细胞侵袭转移能力的抑制作用,Western-blot检测其对金属基质蛋白酶-9(MMP-9)以及E-钙粘素(E-cad)表达水平的影响。通过RT-PCR及Western-blot检测姜黄素对诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平的影响;采用Griess法观察姜黄素对HeLa细胞生成一氧化氮(NO)能力的影响。结果姜黄素可通过诱导凋亡抑制HeLa细胞的增殖,且呈现浓度依赖性;姜黄素可显著降低HeLa细胞的侵袭能力并能够降低MMP-9的表达水平,同时升高E-cad的表达水平;姜黄素可显著降低HeLa细胞内iNOS的表达水平,并降低NO的合成。结论姜黄素可能通过降低iNOS的表达水平抑制HeLa细胞的侵袭、转移能力。

黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用及其机制

目的观察黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其相应机制。方法利用MTT法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;Transwell小室法检测黄芩苷对HeLa细胞侵袭能力的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9RNA表达水平的影响;Western blot法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blot法检测黄芩苷对P38和p-P38蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷和sb203580联合应用对MMP-2和MMP-9RNA表达水平的影响。结果黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的增值,当质量浓度超过60μg/mL时,与对照组相比(0μg/mL)差异出现统计学意义。在低于细胞增殖抑制浓度时,黄芩苷也能够有效抑制HeLa细胞的侵袭,10、20、40μg/mL组穿过基质胶到达小室底端的细胞数目分别为对照组的(97.58±17.78)%、(67.95±49.75)%和(32.35±20.41)%。黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞中MMP-2和MMP-9的表达及有效抑制HeLa细胞中P38的磷酸化水平;P38信号通路抑制剂预处理,能够增强黄芩苷对MMP-2和MMP-9表达的抑制作用。结论黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的侵袭转移,这种作用可能与其通过调节P38信号通路的活性进一步调节MMP-2和MMP-9的表达有关。

胡桃醌对人宫颈癌HeLa细胞侵袭与迁移的影响

目的观察胡桃醌对HeLa细胞侵袭及迁移的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法常规体外培养人HeLa细胞,加入10、20、50、100μmol/L浓度的胡桃醌,继续培养24 h。通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用MTT法检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测胡桃醌对细胞迁移能力的影响,用Transwell小室法检测细胞侵袭能力的影响。Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的表达。结果细胞形态学观察显示,不同浓度胡桃醌均可导致细胞形态学发生改变;MTT检测表明,胡桃醌对HeLa细胞的生长有明显抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强(P<0.05或P<0.01);划痕实验结果显示,随胡桃醌药物浓度的增加,细胞的平面运动能力明显下降;Transwell侵袭小室实验结果显示,胡桃醌对HeLa细胞体外的侵袭力具有很强的抑制作用;Western blotting结果表明,胡桃醌给药能够抑制HeLa细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结论胡桃醌能够抑制HeLa细胞的增殖并抑制细胞侵袭,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9的表达有关。

靶向GPR48的shRNA抑制人宫颈癌HeLa细胞的侵袭转移

背景与目的:GPR48受体偶联Gs蛋白介导细胞内信号转导通路,通过调节微管聚合状态和基质金属蛋白酶活性,影响肿瘤细胞的侵袭转移。本研究探讨靶向GPR48的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对人宫颈癌细胞株HeLa体外侵袭能力及在体转移能力的影响。方法:以人GPR48mRNA编码区中两条不同序列作为RNA干扰靶点,构建靶向GPR48的shRNA真核表达质粒,同时构建不针对任何已知mRNA的阴性shRNA真核表达质粒,分别转染至HeLa细胞,新霉素抗性筛选稳定表达siRNA的转化克隆。采用RT-PCR和Western blot检测GPR48的表达变化。通过Boyden小室实验以穿过人工基底膜的细胞数量评估HeLa细胞体外侵袭能力的变化;分别将转染和未转染GPR48shRNA的HeLa细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况及肺部转移情况。结果:RNA干扰使HeLa细胞GPR48表达下调80%;与阴性对照组比较,转染靶向GPR48重组质粒的实验组穿膜细胞数显著减少(28.3±1.5和17.6±1.5vs.94.4±15.7,P<0.01)。裸鼠在体肺转移实验中,与阴性对照组比较,转染靶向GPR48重组质粒的实验组肺转移结节数显著减少(1.3±0.2和1.5±0.4vs.7.8±1.8,P<0.01)。结论:shRNA真核表达载体能明显抑制HeLa细胞的GPR48表达,有效抑制HeLa细胞的体外侵袭和在体转移。

鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性

为研究鸭源鸡杆菌(G.anatis)体外黏附和侵袭细胞的能力,选择HeLa细胞为感染模型,分别以细菌黏附和侵袭HeLa细胞数量为指标,借助革兰和姬姆萨染色及电镜观察来研究2株不同来源的鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性。结果显示:黏附计数表明鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG能高水平黏附HeLa细胞,菌株感染30、60、90、120、150min后每细胞黏附的细菌数分别为0.84、4.68、8.52、9.27、8.2个,而菌株F149T对HeLa细胞有较低的黏附作用。侵袭试验表明Yu-PDS-RZ-1-SLG有低度侵袭力,侵袭的细菌数在150min时达到最大,约8.27·1 000细胞-1,随后细胞破碎,细胞逐渐脱落,而菌株F149T未检测到侵袭力。染色及电镜试验进一步证实鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG可黏附于HeLa细胞表面并侵入细胞内部。菌株经胰蛋白酶处理后,细菌的黏附率显著降低,表明细菌的表面蛋白参与黏附。黏附和入侵特性是鸭源鸡杆菌定殖在组织表面重要的能力,该细胞模型的建立为进一步研究其致病机制提供了条件。

microRNA-26b对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨microRNA-26b(miR-26b)在宫颈癌组织的表达水平及其对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响。方法收集36例宫颈癌及癌旁组织的手术标本,应用实时荧光定量PCR技术,检测miR-26b mRNA的表达水平。以人宫颈癌细胞系HeLa细胞为研究对象,转染miR-26b成熟体及反义核苷酸,通过MTS方法和Transwell实验检测miR-26b对HeLa细胞增殖和侵袭的影响。结果 (1)miR-26b mRNA在宫颈癌组织中呈低水平表达。(2)MTS实验研究显示,与空白对照组(仅加转染试剂)相比,转染miR-26b成熟体,HeLa细胞的增殖能力明显下降(P<0.01);转染miR-26b反义核苷酸,HeLa细胞的增殖能力明显增强(P<0.01),而无义对照,没有明显变化(P>0.05)。(3)Transwell小室实验研究显示,与空白对照组相比,转染miR-26b成熟体,HeLa细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01);转染miR-26b反义核苷酸,HeLa细胞的侵袭能力明显增强(P<0.05),而无义对照,没有明显变化(P>0.05)。结论 miR-26b具有抑制HeLa细胞的增殖和侵袭作用,miR-26b可能成为治疗宫颈癌的靶基因。

过表达TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的影响

目的通过TPX2过表达慢病毒载体在人宫颈癌HeLa细胞过表达TPX2基因,在体外研究TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的作用及其相关机制。方法构建TPX2过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)及阴性对照(LV11-NC),选取稳定感染过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)的HeLa细胞作为过表达组,将稳定感染(LV11-NC)的HeLa细胞作为阴性对照组,未感染病毒的人宫颈癌HeLa细胞作为空白对照组(CON)。采用Transwell基底膜侵袭实验测定各组细胞的侵袭能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡及侵袭相关蛋白质Bcl-2、Bax、Caspase-3、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)及nm23-H1的表达。结果成功构建TPX2过表达慢病毒载体(LV11-TPX2),可有效过表达TPX2 mRNA及蛋白质。与对照组比较,TPX2过表达组的HeLa细胞凋亡率明显减少(P<0.05),穿过Transwell小室基底膜细胞明显增加(P<0.01)。LV11-TPX2感染组HeLa细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显上调(P<0.05),Caspase-3及Bax的表达明显下调(P<0.05);侵袭相关蛋白质nm23-H1及TIMP-1水平明显下调(P<0.05),MMP-9水平明显上调(P<0.05)。结论在宫颈癌细胞过表达TPX2基因后,能抑制细胞凋亡,增强其侵袭能力,可能的机制为在宫颈癌细胞过表达TPX2能诱导凋亡和侵袭相关蛋白Caspase-3、Bax、nm23-H1及TIMP-1水平下调,Bcl-2及MMP-9水平上调。

碱性彗星试验检测γ-射线照射与维生素K_3联合应用对人宫颈癌HeLa细胞的细胞毒性影响

目的 :为探讨妇科抗肿瘤新方法 ,检测单用维生素K3或与 4Gyγ 射线照射联合应用对人宫颈癌HeLa细胞细胞毒性的影响。方法 :水溶性维生素K3处理 2 4h ,合用或不用γ 射线照射人宫颈癌HeLa细胞 ,应用碱性彗星试验 (alkalinecometassay) ,也称碱性单细胞凝胶电泳法 ,测定彗星尾矩和彗星长度。结果 :对彗星尾矩影响 :单用维生素K31 0 ,2 0 ,40mmol·L- 1 ,彗星尾矩为空白对照组的 2 ,3和 5倍 ;与 4Gyγ 射线照射合用组是单纯用药组的 2 .5～ 4倍 ,差异有显著的统计学意义 (P <0 .0 1 )。实验组间比较 ,4Gyγ 射线照射与维生素K3合用组 1 0与 40mmol·L- 1组间有差异。对彗星长度影响 :单纯用药培养 2 4h ,各剂量组均比对照组的彗星长度值明显增加 (P <0 .0 1 ) ;4Gyγ 射线与维生素K3合用 ,实验组与对照组比较差异有显著统计学意义 (P <0 .0 1 ) ;合用组的 1 0与 40mmol·L- 1 ,2 0与 40mmol·L- 1 组间存在差异。结论 :维生素K3对人宫颈癌HeLa细胞产生细胞毒性 ,与γ

沉默人宫颈癌细胞Hela中FAL1的表达对人宫颈癌细胞Hela增殖、侵袭及迁移的影响

目的探讨沉默人宫颈癌细胞Hela中功能基因组趋化基因(FAL1)的表达对人宫颈癌细胞Hela增殖、侵袭及迁移的影响。方法设计并合成FAL1的si RNA片段转染Hele细胞分别命名为FAL1-si RNA/Hela细胞组和FAL1-NC/Hela细胞组。比较两组Hela细胞转染FAL1-si RNA后的FAL1 m RNA相对表达量、光密度(OD)值、穿膜细胞数、迁移距离的差异。结果 FAL1-si RNA/Hela细胞的FAL1 m RNA相对表达量(0.49±0.21)低于FAL1-NC/Hela细胞(1.34±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。FAL1-si RNA/Hela细胞在72、96和120 h的OD值分别为(2.04±0.15)、(2.43±0.08)和(2.48±0.15),低于FAL1-NC/Hela细胞的(2.36±0.18)、(3.11±0.27)和(3.44±0.26),差异有统计学意义(P<0.05);FAL1-si RNA/Hela细胞的穿膜细胞数(126.18±8.75)个低于FAL1-NC/Hela细胞(208.54±6.75)个,差异统计学意义(P<0.05);FAL1-si RNA/Hela细胞在24、48和72 h的细胞迁移距离为(6.34±1.48)、(11.65±2.52)和(15.08±3.19)μm低于FAL1-NC/Hela细胞的(11.42±2.73)、(19.56±4.33)和(27.71±5.12)μm,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FAL1-si RNA/Hela细胞的FAL1m RNA相对表达量下降,进而抑制Hela细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的影响及机制研究

目的:研究雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的影响及其机制。方法:将HeLa细胞分为对照组和雷帕霉素低、中、高剂量(10、30、100 nmol/L)组,药物作用48 h后,MTT法检测细胞活力,计算抑制率;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测细胞中蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平,以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果:与对照组比较,雷帕霉素各剂量组细胞的抑制率增加(P<0.01),迁移细胞数目和侵袭细胞数目减少(P<0.01),MMP-2、MMP-9、Vimentin表达水平降低(P<0.01或P<0.05),E-cadherin表达水平增强(P<0.01或P<0.05),Akt及mTOR磷酸化水平降低(P<0.01)。结论:雷帕霉素可通过Akt/mTOR信号通路抑制He La细胞的侵袭转移。

槲皮素抑制X线照射后宫颈癌Hela细胞侵袭性的作用

目的:研究放射线及槲皮素对人宫颈癌Hela细胞侵袭性变化的影响,并初步探讨VEGF、MMP-9表达对其影响。方法:MTT法检测不同浓度的槲皮素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响;Transwell体外侵袭实验分别观察放射线及不同浓度槲皮素作用后24h细胞的侵袭能力的改变。Western blot法检测不同浓度槲皮素、放射线单独及联合应用后Hela细胞中VEGF、MMP-9蛋白的表达。结果:槲皮素对Hela细胞具有增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05),24小时的IC50值约为120μmol/L。与空白组比较,X线照射24h后细胞侵袭能力增加(P<0.01),槲皮素对He La细胞的侵袭能力具有抑制作用(P<0.01),槲皮素与X线共同处理细胞后,仍具有明显的抑制侵袭能力(P<0.01),组间差异具有统计学意义。X线单独作用后VEGF、MMP-9蛋白表达在一定时间内有增加的趋势(P>0.05),槲皮素、以及联合X线组VEGF、MMP-9蛋白表达降低(P<0.05)。结论:X线照射后宫颈癌Hela癌细胞侵袭潜能短暂增强;槲皮素能抑制X线照射后宫颈癌细胞的侵袭能力。机制可能与槲皮素能下调VEGF、MMP-9的表达有关。

鞘氨醇-1磷酸盐对宫颈癌HeLa细胞生长及细胞侵袭的影响

目的探讨鞘氨醇-1磷酸盐(S1P)对宫颈癌He La细胞生长和侵袭能力的影响。方法分别应用S1P(实验组)和无脂肪型牛血清白蛋白(BSA)载体溶液(对照组)处理宫颈癌He La细胞,采用噻唑蓝和5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记法细胞增殖分析法检测肿瘤细胞活力和增殖变化,趋化小室和侵袭小室检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力变化。结果与对照组细胞相比,实验组He La细胞活力及细胞增殖、He La细胞迁移和侵袭能力显著增强(P<0.05)。结论 S1P可以导致宫颈癌He La细胞生长和侵袭能力增强,提示S1P蛋白在宫颈癌进展中可能发挥重要作用。

STAT3反义寡核苷酸对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响

目的观察转染信号转导与转录激活因子3(STAT3)的反义寡核苷酸对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭功能的影响。方法针对人STAT3的基因序列设计并合成反义寡核苷酸,用阳离子脂质体介导转染人宫颈癌He-La细胞。应用RT-PCR和Western blot法分别检测STAT3基因mRNA及蛋白表达水平,软琼脂集落培养检测细胞的定植功能,体外侵袭实验检测HeLa细胞的侵袭能力。结果转染STAT3反义寡核苷酸HeLa细胞(HeLaSTAT3-ASODN)STAT3基因的mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(HeLaSTAT3-SODN)和正义组(HeLa),P<0.05;各组细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数分别为:HeLa组(74.31±7.62)、(44.85±6.26)个,HeLaSTAT3-SODN组(71.57±6.92)、(45.46±6.79)个,HeLaSTAT3-ASODN组(45.18±7.69)、(22.41±5.98)个。与HeLa组、HeLaSTAT3-SODN组比较,HeLaSTAT3-ASODN组克隆形成数和透膜细胞数明显减少(P<0.05)。结论 STAT3基因特异反义寡核苷酸可通过下调STAT3基因表达抑制细胞的定植和侵袭。