^(60)Co γ 射线所致 HeLa MR 细胞 hprt 基因突变谱研究

将正常ＨｅＬａＭＲ细胞用６０Ｃｏγ射线分别进行０～８．０Ｇｙ照射后，在含６巯基鸟嘌呤（６ＴＧ）的培养基中克隆和筛选ｈｐｒｔ基因突变细胞。细胞的突变频率与γ射线的照射剂量有关，共获得３个自然突变的细胞克隆和１８个γ射线诱导的突变细胞克隆，用８对ｈｐｒｔ寡核苷酸引物进行多聚酶链式反应（ＰＣＲ），从培养细胞提取ＤＮＡ中分别扩增ｈｐｒｔ基因的９个外显子片段，分析突变细胞的ｈｐｒｔ基因外显子突变情况。结果表明，在辐射致突的克隆中，约７７．８％（１４／１８）的ｈｐｒｔ基因突变为外显子缺失，其中２个突变是外显子全部缺失，而１２个是外显子部分缺失。另外，约有２２．２％（４／１８）的突变无明显的ＰＣＲ扩增变化，属于点突变，且突变程度与照射剂量有关。在３个自然突变克隆中，点突变和缺失突变的比例分别为６７％（２／３）和３３％（１／２），突变程度远远低于照射组。这对于估计辐射剂量和辐射远后效应观察，揭示辐射致突的分子机理提供了信息。