心脏移植术后多模态影像学评估研究进展

心脏移植是治疗终末期心力衰竭的有效方法。术后早期急性细胞排斥反应(ACR)和中远期心脏移植物血管病变(CAV)是影响患者总生存率的主要因素。多模态影像学可准确、及时评估移植心脏结构和功能,对早期诊断及管理术后并发症具有重要意义。本文就心脏移植术后多模态影像学评估研究进展进行综述。

青藤碱对大鼠心脏移植排斥反应期间ICAM-1和IL-2的影响

目的:观察大鼠同种异位心脏移植排斥反应期间的病理特征,探讨青藤碱对大鼠心脏移植排斥反应的影响及其发生机制。方法:SD健康大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,建立大鼠异位心脏移植模型。实验分4组:A组为健康SD大鼠心脏作对照组,B组为SD大鼠到SD大鼠的同基因移植组,C组为SD大鼠到Wistar大鼠异基因移植组,D组为清藤碱治疗组。以ELISA、免疫组织化学检测移植心组织中IL-2和ICAM-1的表达。结果:A、B组未见排斥反应发生,心脏组织中的ICAM-1和IL-2表达水平很低;C组有明显的炎症反应并见大量淋巴细胞浸润,组织中ICAM-1和IL-2的表达水平明显升高(P<0.05);D组炎症反应有所减轻,同时少有淋巴细胞浸润;组织仅微弱表达ICAM-1和IL-2。结论:移植心脏ICAM-1和IL-2的表达水平与排斥反应的发生和发展有关,青藤碱能显著抑制移植心ICAM-1和IL-2的表达和淋巴细胞的浸润,减轻排斥反应,明显延长移植物的存活。

异种肝移植急性排斥反应中细胞凋亡的研究

目的 观察肝移植急性排斥反应中移植肝细胞凋亡 ,并初步探讨其分子机制。 方法 三袖套法建立肝移植急性排斥反应模型 ,普通组织及原位末端标记法检测移植肝中细胞凋亡 ,免疫组织化学方法检测移植肝中Fas -L ,TGF -β1的表达。 结果 在肝移植急性排斥反应中 ,移植肝出现细胞凋亡 ,并表达Fas -L ,TGF -β1,随着肝移植急性排斥反应的加重 ,其细胞凋亡增多 ,Fas L ,TGF β1表达增高。结论的 细胞凋亡作为细胞死亡的一种机制 ,存在于肝移植急性排斥反应中 ,其机制与Fas L ,TGF β1有关 。

受者同系骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠的免疫调节作用

目的观察静脉注射受者同系骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠心脏移植免疫反应的影响。方法以20只成年雄性Lewis大鼠作为心脏供体,20只成年雄性Wistar大鼠作为受体,将其随机分为2组,每组10只,行颈部心脏移植:对照组(A组)手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9%氯化钠注射液;MSC处理组(B组)手术后24h,经尾静脉注射2×106个MSC(悬浮于3ml 0.9%氯化钠注射液中)。术后1周,每组随机取受体大鼠4只,检测静脉血及移植物CD4+、CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25highfoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值。其余6只大鼠用于继续观察移植物存活时间。结果 A组大鼠移植心脏存活7.2±1.3d,B组大鼠移植心脏存活14.8±2.9d,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。B组静脉血中CD4+/CD8+值、CD4+CD25highT细胞占总淋巴细胞的比例、CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为1.18±0.07、2.51%±0.56%、2.05%±0.62%)均明显高于A组(分别为0.49±0.05、0.96%±0.19%、0.82%±0.09%),差异有统计学意义(P<0.01)。移植心脏中CD4+/CD8+值在两组间无统计学差异(P>0.05);B组移植心脏中CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为2.74%±0.28%、2.54%±0.31%)均明显高于A组(分别为0.61%±0.06%、0.53%±0.06%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论静脉注射受者同系骨髓MSC可诱导大鼠心脏移植免疫耐受,延长移植心脏的存活时间。

心脏移植中远期急性排斥反应的临床观察

目的分析心脏移植受者中远期急性排斥反应的临床特点,提高心脏移植远期效果。方法14例心脏移植受者,男11例,女3例。经典免疫方案3例,诱导方案11例,维持治疗采用环孢素A+硫唑嘌呤或霉酚酸酯+泼尼松三联方案。急性排斥反应发生时间:移植后3～6个月1例,6个月～1年3例,1～2年3例,2～5年6例,5年以上1例。结果经典方案与诱导方案受者的中远期排斥率间比较无统计学差异(P>0.05)。8例自行减量或停药。激素敏感急性排斥反应9例,耐激素急性排斥反应5例;接受激素冲击或抗胸腺细胞免疫球蛋白治疗,硫唑嘌呤转换为霉酚酸酯。5例死亡,4例为耐激素急性排斥反应,1例为激素敏感急性排斥反应;其余受者生活质量良好,无再发急性排斥反应、感染等并发症。结论心脏移植受者中远期急性排斥反应与早期免疫方案无关而多与依从性有关,程度较严重,激素冲击或多克隆抗体治疗有效。

大鼠心脏移植急性排斥反应动物模型的建立

目的为探索器官移植后急性排斥反应的一种快速可靠的诊断方法。方法先暴露和游离受体的吻合段血管,再获取供心以缩短移植心脏冷缺血时间;保留供者的心脏及右上肺,将其胸主动脉与受者的腹主动脉间断端侧吻合;开放血流时,先开放远心端再间断开放近心端,同时按摩心脏至心脏搏动规律、有力,其色泽恢复红润,右上肺亦充盈良好。结果A组(n=20)成功16只,动脉吻合口出血2只、心脏复跳失败1只、吻合口狭窄1只;B组(n=20)成功17只,2只死于吻合口出血,1只死于吻合口狭窄。A组手术成功率为80%,B组为85%(P>0.05)。结论(1)先暴露并游离好受体血管吻合段,再获取供心,可以缩短移植心冷缺血时间。(2)边灌注边获取的方法利于快速而又完整的获取供心。(3)在切取和植入的过程中一定要注意低温保护。(4)利用腹主动脉段进行移植,使手术方便易行。左心做功的大鼠腹部心脏移植模型简单、安全、实用,因其左心参与循环而使血流动力学更接近生理状态,是进行心脏移植及血流动力学研究的较理想模型。

落新妇甙对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用

目的探讨落新妇甙对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用。方法采用小鼠颈部心脏移植模型。随机将心脏移植后的48只小鼠分为四组:A组心脏移植后每天用生理盐水1 m l灌胃,B组心脏移植后每天用环孢素A 5 m g/kg灌胃,C组心脏移植后每天用落新妇甙1 m l/kg灌胃,D组心脏移植后每天用环孢素A 2.5 m g/kg及落新妇甙1 m l/kg灌胃。观察移植心脏的存活时间及心脏跳动情况。结果B组、C组及D组移植心脏存活时间均较A组显著延长(P<0.01);D组移植心脏存活时间最长,优于C组(P<0.05)和B组(P<0.01)。结论落新妇甙对心脏移植排斥反应有较强的抑制作用,并与环孢素A有协同作用。

复方丹参对异种移植物的保护作用

目的 :研究复方丹参在异种移植中对移植物的保护作用。方法:采用颈部套袖法建立豚鼠对大鼠心脏异种移植模型。于术前24h按0.5mg/kg 腹腔注射中华眼镜蛇蛇毒 (CCV) ,术中以复方丹参注射液灌注供心并静注复方丹参。研究对照组、CCV组和CCV +丹参组供心存活时间、复跳时间的改变。结果 :复方丹参注射液缩短异种移植心脏复跳时间 ,合用CCV可使供心存活时间进一步延长。结论 :在异种移植中应用复方丹参可减少供心缺血损伤 ,并改善微循环 ,与CCV合用能抑制异种移植的超急性排斥反应。

体外混合淋巴细胞培养对心脏移植急性排斥反应的监测作用

目的:研究体外单向混合淋巴细胞培养作为无创的心脏移植排斥反应监测方法的可行性.方法:通过改良的单向混合淋巴细胞培养与心肌内膜活检(EMB)相对照,测定淋巴细胞活性与心肌活检病理等级的相关性.结果:改良的体外单向混合淋巴细胞培养方法与心肌内膜活检病理等级有很好的相似性.结论:改良的体外单向混合淋巴细胞培养方法可作为无创监测心脏移植排斥反应的有效手段之一.

微囊化异种肝细胞移植对大鼠爆发性肝衰竭治疗作用的研究

目的 探讨微囊化异种肝细胞移植对暴发性肝衰竭 (FHF)大鼠的治疗作用。方法 ACP微囊化处理原代豚鼠肝细胞 ,于诱发FHF前 2 4h移植到大鼠腹腔内大网膜附近 ,采用 90 %肝切除法诱发FHF。在FHF诱发后 2 4h取静脉血检测大鼠肝功能谷丙转氨酶 (ALT ) ,清蛋白 (ALb) ,总胆红素(TB) ,血糖 (BS)和凝血酶原时间 (PT)等指标 ;取腹腔移植入的微囊进行组织学检查观察细胞形态、功能及数量的变化 ;动态全程观察大鼠生活质量及存活时间并绘制生存曲线。结果 微囊化肝细胞移植组大鼠生活质量明显改善 ,出现共济失调等中枢神经系统症状及腹水的时间明显延长。微囊化肝细胞移植组大鼠的ALT ,Alb ,TB ,BS和PT均明显改善并且与对照组均有差异的显著性 (P <0 .0 5 )。微囊化肝细胞移植组大鼠平均生存时间为 60h ,空白对照组为 2 2h(P <0 .0 1)。组织学检查 :移植后 72h开腹 ,约有 80 %微囊呈无粘连游离状态 ,镜下见微囊周围纤维化率约为 8% ,囊内肝细胞形态正常。未微囊化肝细胞移植组则很少见到正常的肝细胞 ,且周围有大量淋巴细胞浸润。结论 对异种肝细胞进行微囊化处理后移植治疗FHF大鼠 ,可以减少移植排斥反应 ,提高治疗效果 ,是一种治疗FHF的较好方法。

心肌细胞凋亡与急性心脏移植排斥的关系

目的 探讨心肌细胞凋亡、Fas蛋白、FasL蛋白表达与心脏移植急性排斥的关系。方法 利用大鼠腹腔异位心脏移植模型。实验组为异基因心脏移植 ,供体为Wistar大鼠 ,受体为SD大鼠。对照组为同基因心脏移植 ,供体与受体均为SD大鼠。设立 4个观察点 ,分别为术后第 1,3,5 ,9天。每个观察点 7只动物。应用免疫组化法检测心肌组织Fas蛋白、FasL蛋白的表达。应用 3′ 原位末端标记法 (TUNEL法 )检测凋亡心肌细胞。结果 ①实验组移植心肌术后第 3天即有一定量TUNEL阳性心肌细胞。术后第 5天TUNEL阳性心肌细胞数达高峰 ,持续至术后第 9天。对照组心肌检测到极少量的TUNEL阳性细胞。②术后第 5 ,9天标本 ,实验组检测到大量FasL阳性心肌浸润细胞。③实验组与对照组心肌都检测到大量Fas阳性信号。结论 ①心肌细胞凋亡是心脏移植排斥心肌细胞死亡的一种方式。②心脏移植排斥时同时检测到了Fas蛋白、FasL蛋白、TUNEL(+)心肌细胞 ,可能是表达FasL的心肌浸润细胞诱导Fas阳性心肌细胞凋亡 。

移植途径对骨髓间充质干细胞调节小鼠心脏移植排斥反应的影响

目的探讨不同途径注射骨髓间充质干细胞(BMSCs)对调节小鼠心脏移植排斥反应的影响。方法 BALB/c和C57小鼠分别作为供体和受体,建立颈部心脏移植模型,随机分为4组,每组12只,A组在移植成功后立即经移植心脏升主动脉注射C57来源绿色荧光BMSCs悬液30μL(含1×10~6细胞),B组同样时间点经移植心脏右心室腔内注射相同数量细胞,C组同样时间点移植心脏心肌内注射相同数量细胞,D组为空白对照组。移植后第7天各组处死4只小鼠,切取移植心脏,荧光显微镜下观察绿色荧光细胞的存活情况,HE染色观察移植心脏的病理学改变,流式细胞学检测移植物浸润白细胞中巨噬细胞的比例,其余8只小鼠用来观察移植心脏的存活时间。结果术后第7天,仅A组移植心脏内可见绿色荧光细胞,病理学检测发现A组排斥反应受到明显抑制,心肌间质内细胞浸润明显减少,局灶性的心肌细胞损害,B组和C组移植心脏间质内可见多灶性淋巴细胞浸润并伴有心肌细胞变性坏死,而D组小鼠心脏见满视野大量白细胞浸润,心肌结构消失,心肌坏死。流式细胞学检测发现A组移植心脏内巨噬细胞的比例明显高于其他3组,A组的心脏存活时间明显长于其他3组。结论 BMSCs能减轻心脏移植排斥反应,动脉途径注射优于静脉和心肌局部注射途径,其机制可能与骨髓间充质干细胞在移植心脏内存活时间以及巨噬细胞比例增加有关。

心脏移植术后的免疫抑制治疗

目的 :探讨原位心脏移植术后免疫抑制经验 .方法 :2 0 0 0 0 1 / 2 0 0 3 1 0施行 2 6例原位心脏移植手术 ,术后1 7例采用他克莫司 (FK5 0 6 )、霉酚酸酯 (MMF)及泼尼松组成的三联疗法进行免疫抑制治疗 ,9例采用环孢素 A(CsA)、霉酚酸酯 (MMF)及泼尼松三联疗法进行免疫抑制治疗 .结果 :死亡 3例 ,存活 2 3例 ,生活质量良好 ,其中 6例发生了 1 1次急性排异反应 ,经冲击治疗后逆转 .但同时出现一些药物副作用 ,如肾功能损害、高血压、高血糖等 .结论 :心脏移植术后采用FK5 0 6 ,MMF及泼尼松新三联或CsA、MMF及泼尼松三联免疫抑制治疗效果良好 。

Th1/Th2细胞因子对器官移植排斥反应的影响

目的:研究Th1/Th2细胞因子对同种异系小鼠心脏移植存活时间的影响。方法:使用野生型BALB/c小鼠作为供体,野生型B6小鼠、IL-4基因去除B6小鼠及IFN-γ基因去除B6小鼠作为受体,行腹部异位小鼠心脏移植。部分IL-4基因去除小鼠、IFN-γ基因去除小鼠联合应用α-半乳糖神经酰胺(α-galactosylceramide,α-GalCer),以获得更强的Th1/Th2偏移。比较移植物存活时间。向野生型、IL-4基因去除及IFN-γ基因去除B6小鼠腹腔内注射供体小鼠脾细胞,提取受体小鼠脾脏CD8+T细胞行淋巴细胞毒试验。结果:IFN-γ基因去除组小鼠的移植物存活时间为(6.40±0.55)d,联合应用α-GalCer组移植物存活时间为(8.00±1.15)d。IL-4基因去除组小鼠的移植物存活时间为(8.00±1.00)d,联合应用α-GalCer组移植物存活时间为(8.60±1.34)d。淋巴细胞毒试验显示IFN-γ基因去除小鼠的CD8+T细胞毒性明显增强。结论:Thl/Th2细胞因子与排斥反应之间并不存在简单的对应关系。

FK506对心脏移植急性排斥反应Fas和Fas-L mRNA表达的影响

目的研究心脏移植急性排斥反应中供体心肌组织Fas及其配体Fas-L的mRNA的表达规律.同时探讨FK506在发挥免疫抑制作用时对二者的影响,阐述FK506在体内的作用机制.方法实验分为6组:①同系异体心脏移植组[Sprague-Dawley(SD)to SD,n=6];②同种异体移植组(Dahl to SD,n=6);③同种异体移植FK506治疗组(0.15 mg/kg·d肌肉注射,28 d,n=6),此3组观察移植心脏的存活时间.④～⑥分组情况与①～③相同,术后第5 d摘取移植心脏测定急性排斥反应强度,同时应用反转录-聚合酶链反应检测心肌Fas mRNA和Fas-L mRNA的表达水平.结果①同系异体移植组、同种异体移植FK506治疗组移植心脏存活时间(139.00±31.61)和(53.83±5.19)d明显长于同种异体移植组(7.17±0.75)d,(P＜0.001);同时,前二者的急性排斥反应强度也明显低于后者(P ＜0.001).②同种异体移植组心肌Fas mRNA和Fas-L mRNA的表达水平(Fas:0.62±0.26;Fas-L:0.34±0.12)明显高于同系异体移植组(Fas:0.39±0.16;Fas-L:0.16±0.05,P ＜0.05)和同种异体移植FK506治疗组(Fas:0.35±0.18;Fas-L:0.13±0.06,P ＜0.05).结论心脏移植急性排斥反应中FasmRNA和Fas-L mRNA的表达增强.由此可以认为,急性排斥反应中浸润性免疫细胞表面将大量表达Fas-L,从而诱导表达有Fas分子的心肌细胞的凋亡.FK506在发挥免疫抑制作用时能够阻止Fas和Fas-L mRNA的转录而抑制Fas死亡蛋白途径,抑制排斥反应的发生,延长移植心脏存活时间.

环孢素A对心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨环孢素A治疗急性排斥反应的作用机制。方法 采用Ono方法建立SD大鼠心脏移植排斥反应动物模型 ,将实验分为两组 :对照组n =10 ,未进行任何治疗 ;环孢霉素A(CsA)组 :n =2 0 ,术后 1～ 7d腹腔内注射CsA 10mg/ (kg·d)。采用ELISA法测定术后IL 2的含量 ,采用Tunel法检测心肌细胞凋亡 ,并计算凋亡指数。结果 两组移植物存活时间为 7 2 5d± 0 71d和 19 4d± 2 0 7d ,实验组比对照组延长 12d(P <0 0 1)。实验组术后IL 2含量明显减少 ,与对照组相比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。两组中心肌细胞凋亡指数分别为 2 84± 1 4 8和 0 5 4± 0 19(P <0 0 0 0 1)。结论 CsA通过抑制IL 2的分泌和心肌细胞凋亡 ,发挥抗排斥作用。

中华眼镜蛇毒因子清除补体建立异种心脏移植急性血管性排斥反应模型

目的 采用纯化中华眼镜蛇毒因子 (CVF)清除补体 ,建立豚鼠 -大鼠非协调性异种心脏急性血管性排斥反应 (AVR)模型。 方法 供者豚鼠和受者 SD大鼠各 38只 ,分为 3组 : 组 (超急排组 ,n=2 0 ) ,受者不进行任何预处理 ; 组 (小剂量 CVF组 ,n=1 0 ) ,受者移植前 1 d经腹腔注射 CVF2 0 0 μg/ kg,移植后每日注射 1 0 0 μg/kg直至供心停搏 ; 组 (大剂量 CVF组 ,n=8) ,受者移植前 1 d经腹腔注射 CVF4 0 0 μg/ kg,移植后每日注射 2 0 0μg/ kg直至供心停搏。观察供心存活时间 ,供心停跳后行病理组织学检查。 结果 组和 组供心平均存活时间分别为 (4 1± 2 ) h和 (4 0± 3) h明显长于 组 [(1 7± 2 ) min,P<0 .0 1 ], 组与 组间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。病理检查 : 组呈超急性排斥反应 (HAR)改变 ,而 、 组呈 AVR改变 ; 、 组移植物炎症细胞浸润数明显多于 组(P<0 .0 1 ) ,移植物补体 C3沉积明显少于 组 (P<0 .0 1 )。 结论 适当剂量纯化 CVF具有良好的清除大鼠补体C3作用 ,克服豚鼠—大鼠非协调性异种心脏移植物 HAR的发生 ,延长其存活时间 ,建立以炎症细胞浸润为主的异种移植

心脏移植术后急性排异反应的监测

目的 总结原位心脏移植术后急性排异反应的监测 .方法 2 0 0 0 - 0 1/ 2 0 0 2 - 0 4施行 11例原位心脏移植手术 ,结合临床表现、心电图、超声心动图、化验检查及心内膜活检等检查 ,对心脏移植术后急性排异反应的监测进行分析 .结果 采用临床症状 +心电图 +超声心电图 +心肌血清学检测综合判断有 6次急性排异反应 ,行心内膜活检证实 b级 2次 , a级 3次 ;术后常规行心内膜活检 2 1次 ,仅发现急性排异反应 a或 b级 5次 .结论 急性排异反应是关系到心脏移植术后患者康复及愈后的重要因素 ,因此要及时、有效地进行监测 ;心内膜心肌活检是诊断急性排异反应敏感可靠的方法 ,但为有创性检查 ,有一定的并发症风险 ,其他多项无创性检查可作辅助指标 .

环孢菌素A抑制小鼠同种心脏移植急性排斥反应中Lymphotactin表达的研究

目的研究小鼠同种心脏移植急性排斥反应中淋巴细胞趋化因子(lptn)的表达情况及环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)的抑制作用。方法改良Banff评分系统判断同种小鼠移植心急性排斥反应程度,RT-PCR检测移植心组织内淋巴细胞趋化因子表达水平,ELISA方法检测心脏移植小鼠脾细胞活化T细胞核因子(NFAT)活性。结果C57BL/6-Balb/c急性排斥组小鼠移植术3d后脾脏显著增大。术后第5、7d移植心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为2.667±0.577和2.333±0.577。C57BL/6-Balb/c+CsA组小鼠移植术后脾脏肿大明显减轻,术后第5、7d心肌间淋巴细胞浸润程度评分分别为1.000±0.000和1.333±0.577。急性排斥组和CsA处理组小鼠移植心脏在术后第5d和第7d都可检测到Lptn mRNA阳性表达,但CsA处理组Lptn mRNA的表达明显弱于急性排斥组。治疗剂量的CsA可以完全抑制NFATc1活性。结论Lptn在早期移植免疫事件中具有重要的作用,CsA仅能部分抑制Lptn mR-NA的表达。活化T细胞Lptn的表达调控存在NFAT以外的途径。

应用普乐可复、霉酚酸酯与强的松预防心脏移植排斥反应

目的评价普乐可复、霉酚酸酯与强的松联合使用预防心脏移植排斥反应的效果及毒副作用。方法受者为４３岁， 终未期扩张型心肌病女性患者，于２０００年４月行同种异体原位心脏移植术。术后应用普乐可复、霉酸酚酯与强的松预 防心脏移植排斥反应。结果 患者术后１３个月无明显排斥反应征象，无感染、肝肾功能损害等严重并发症。药物的副作 用主要表现为胃肠道不适及轻度的骨髓抑制。结论新型免疫抑制剂普乐可复、霉酚酸酯联合强的松预防术后排斥反应 疗效显著，毒副作用少。