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Genome-Wide Identification of heat shock protein 10/60 Genes in Japanese Flounder (Paralichthys olivaceus) and Their Regulated Expression After Bacterial Infection
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作者 YAN Weijie QIAO Yingjie +3 位作者 LIU Yuxiang LIU Xiumei ZHANG Quanqi WANG Xubo 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2021年第4期886-896,共11页
Heat shock proteins 10/60(hsp10/60)are a family of conserved ubiquitously expressed heat shock proteins which are produced by cells in response to exposure to stressful conditions.Besides the chaperone and housekeepin... Heat shock proteins 10/60(hsp10/60)are a family of conserved ubiquitously expressed heat shock proteins which are produced by cells in response to exposure to stressful conditions.Besides the chaperone and housekeeping functions,they are also known to be involved in immune response during bacterial infection.In this study,we identified and annotated 10 hsp10/60 genes through bioinformatic analysis in Japanese flounder(Paralichthys olivaceus).Among them one member of hsp10(hspe)family and nine members of hsp60(hspd)family were identified.Phylogenetic and selection pressure analysis showed that the hsp10/60 genes were evolutionarily constrained and their function was conserved.Besides,hsp10/60 genes were involved in different embryonic and larval stages and acted as the sentinel role in an unchallenged organism.In addition,we also observed the expression patterns of hsp10/60 genes after Edwardsiella tarda infection,for the first time in Japanese flounder.Eight out of 10 genes were differentially expressed after bacterial challenges,the significantly regulated expressions of flounder hsp10/60 genes after bacterial infections suggested their involvement in immune response in flounder.Our results provide valuable information for clarifying the evolutionary relationship,and early insights of the immune functions of hsp10/60 genes in Japanese flounder. 展开更多
关键词 heat shock protein hsp10/60 Japanese flounder Edwardsiella tarda immune response
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人热休克蛋白10和鼠热休克蛋白10的克隆、序列分析及其原核表达 被引量:3
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作者 王丽 杜晓明 +6 位作者 王林林 史西保 藤蔓 李功权 权凯 郭军庆 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期56-59,共4页
提取人肝癌SMMC-7721细胞和小鼠NS0细胞总RNA,对热休克蛋白10基因(Hsp10)进行RT-PCR扩增、TA克隆和测序。结果表明,从上述2种细胞中获得的cDNA分别由312,313 bp组成,与报道的人HSPE1 mRNA(NM-002157)、鼠肌肉Hspe1 mRNA(NM-008303)序列... 提取人肝癌SMMC-7721细胞和小鼠NS0细胞总RNA,对热休克蛋白10基因(Hsp10)进行RT-PCR扩增、TA克隆和测序。结果表明,从上述2种细胞中获得的cDNA分别由312,313 bp组成,与报道的人HSPE1 mRNA(NM-002157)、鼠肌肉Hspe1 mRNA(NM-008303)序列同源性分别为99%,97%,命名为HSPE1-1和Hspe1-1,序列分析表明,二者之间在核苷酸水平上的同源性为92%,氨基酸水平上的同源性为97%。将上述2种cDNA进行双酶切、亚克隆,成功构建了重组表达载体pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1,转化大肠杆菌并进行了诱导表达。检测结果表明,pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1均能在大肠杆菌中表达,表达蛋白分子量大小约为14 kDa,与预期大小一致。Western-Blot结果证实了其为目的蛋白,经镍树脂柱纯化,获得了相应的重组蛋白。为进一步研究这2种蛋白的结构、功能及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 热休克蛋白 人热休克蛋白1 鼠热休克蛋白1 基因克隆 原核表达
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MMP-9和CC10在小鼠变应性鼻炎中的表达和相关性研究
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作者 王水斌 王显红 +2 位作者 陈卫民 毕蓓 吴立连 《咸宁学院学报(医学版)》 2010年第5期377-381,共5页
目的研究MMP-9和CC10在小鼠变应性鼻炎中的表达和两者之间是否有相关性。方法用卵清蛋白来建立野生型小鼠和CC10基因敲除小鼠变应性鼻炎动物模型。分别用免疫组织化学、过碘酸-希夫染色、苏木素-伊红染色,检测小鼠鼻黏膜组织CC10和MPP9... 目的研究MMP-9和CC10在小鼠变应性鼻炎中的表达和两者之间是否有相关性。方法用卵清蛋白来建立野生型小鼠和CC10基因敲除小鼠变应性鼻炎动物模型。分别用免疫组织化学、过碘酸-希夫染色、苏木素-伊红染色,检测小鼠鼻黏膜组织CC10和MPP9表达、杯状细胞、浸润的嗜酸性粒细胞。结果和对照组相比,MMP-9、嗜酸性粒细胞、杯状细胞,在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达明显升高,并且在CC10基因敲除小鼠中升高更加显著,均P<0.01。相反,而和对照小鼠相比,CC10在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达明显下降,P<0.01。MMP-9和CC10表达呈显著负相关,相关系数为-0.57,P<0.01。结论 MMP-9和CC10参与了小鼠变应性鼻炎的发病过程,而且CC10直接或者间接抑制了MMP-9的表达。 展开更多
关键词 变应性 鼻炎 哮喘 动物模型 Clara细胞10-kda蛋白 基质金属蛋白酶
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趋化因子IP-10在病理性瘢痕组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 于学伟 郭澍 +2 位作者 肖汀 王晨超 张欣 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期165-167,共3页
目的研究趋化因子γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)在病理性瘢痕中的表达,探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法应用免疫组化技术检测趋化因子IP-10在28例瘢痕疙瘩(K组)、34例增生性瘢痕(HS组)及20例正常皮肤(N组)中的表达,并进行统计学... 目的研究趋化因子γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)在病理性瘢痕中的表达,探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法应用免疫组化技术检测趋化因子IP-10在28例瘢痕疙瘩(K组)、34例增生性瘢痕(HS组)及20例正常皮肤(N组)中的表达,并进行统计学分析。结果IP-10在K组及HS组中均呈高表达,与N组比较差异均具有统计学意义(P<0.01),但K组与HS组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论IP-10可能通过趋化T淋巴细胞定向迁移,引发一系列免疫炎性反应,从而促进病理性瘢痕的形成。 展开更多
关键词 γ干扰素诱导蛋白10 瘢痕疙瘩 增生性瘢痕
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Nuclear domain 10 of the viral aspect 被引量:7
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作者 Yisel A Rivera-Molina Francisco Puerta Martínez Qiyi Tang 《World Journal of Virology》 2013年第3期110-122,共13页
Nuclear domain 10(ND10) are spherical bodies distributed throughout the nucleoplasm and measuring around 0.2-1.0 μm. First observed under an electron microscope, they were originally described as dense bodies found i... Nuclear domain 10(ND10) are spherical bodies distributed throughout the nucleoplasm and measuring around 0.2-1.0 μm. First observed under an electron microscope, they were originally described as dense bodies found in the nucleus. They are known by a number of other names, including Promyelocytic Leukemia bodies(PML bodies), Kremer bodies, and PML oncogenic domains. ND10 are frequently associated with Cajal bodies and cleavage bodies. It has been suggested that they play a role in regulating gene transcription. ND10 were originally characterized using human autoantisera, which recognizes Speckled Protein of 100 kD a, from patients with primary biliary cirrhosis. At the immunohistochemical level, ND10 appear as nuclear punctate structures, with 10 indicating the approximate number of dots per nucleus observed. ND10 do not colocalize with kinetochores, centromeres, sites of mR NA processing, or chromosomes. Resistance of ND10 antigens to nuclease digestion and salt extraction suggest that ND10 are associated with the nuclear matrix.They are often identified by immunofluorescent assay using specific antibodies against PML, Death domainassociated protein, nuclear dot protein(NDP55), and so on. The role of ND10 has long been the subject of investigation, with the specific connection of ND10 and viral infection having been a particular focus for almost 20 years. This review summarizes the relationship of ND10 and viral infection. Some future study directions are also discussed. 展开更多
关键词 Nuclear domain 10 PROMYELOCYTIC LEUKEMIA SPECKLED protein of 100 kda Death domainassociated protein Virus VIRAL replication
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CC10与小鼠心肌梗死后心肌纤维化的关系
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作者 黄挺 沈竹夏 +4 位作者 段云娇 刘佳榛 冯京 孙育民 王骏 《老年医学与保健》 CAS 2022年第2期252-256,262,共6页
目的探究克拉拉细胞10-kDa蛋白(CC10)与心肌梗死后心肌纤维化的关系。方法取6~8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠32只,随机分为模型组与假手术组,每组16只。模型组小鼠结扎冠状动脉左前降支,构建心肌梗死模型。检测小鼠心脏的CC10 mRNA、α-SMA... 目的探究克拉拉细胞10-kDa蛋白(CC10)与心肌梗死后心肌纤维化的关系。方法取6~8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠32只,随机分为模型组与假手术组,每组16只。模型组小鼠结扎冠状动脉左前降支,构建心肌梗死模型。检测小鼠心脏的CC10 mRNA、α-SMA mRNA表达及肺内的CC10 mRNA表达。观察小鼠心肌纤维化程度;分析CC10在组织层面和蛋白表达的变化;明确CC10在心脏梗死区定位的细胞类型;测定CC10 mRNA随心脏成纤维细胞增殖的表达变化。结果心肌梗死后,随着心肌纤维化加重,CC10在心脏与肺组织中的表达上升(P<0.05)。CC10的表达主要定位于心脏梗死区的成纤维细胞,且伴随成纤维细胞增殖,CC10的表达不断增加。结论伴随心肌纤维化程度加重,CC10在小鼠心肌梗死后的心脏与肺组织中表达上升。 展开更多
关键词 克拉拉细胞10-kda蛋白 心肌梗死 心肌纤维化 成纤维细胞
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Clara细胞10-KDa蛋白在小鼠细菌性慢性鼻-鼻窦炎模型中的表达 被引量:3
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作者 王恒 刘争 +3 位作者 陆翔 游学俊 高起学 崔永华 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期937-940,共4页
目的:观察Clara细胞10-KDa蛋白(CC10)在小鼠细菌性慢性鼻-鼻窦炎(BCRS)模型中的表达。方法:C57BL/6J小鼠用鼻腔阻塞加肺炎链球菌接种的方法建立BCRS模型。用RT-PCR、免疫组织化学、组织病理染色及图像分析方法检测小鼠鼻窦黏膜组织CC10 ... 目的:观察Clara细胞10-KDa蛋白(CC10)在小鼠细菌性慢性鼻-鼻窦炎(BCRS)模型中的表达。方法:C57BL/6J小鼠用鼻腔阻塞加肺炎链球菌接种的方法建立BCRS模型。用RT-PCR、免疫组织化学、组织病理染色及图像分析方法检测小鼠鼻窦黏膜组织CC10 mRNA及蛋白水平表达、CC10阳性细胞数及鼻窦黏膜形态学参数。结果:BCRS模型组小鼠鼻窦黏膜固有层内多型核中性粒细胞(PMN)数、上皮下胶原纤维沉积、上皮厚度及杯状细胞数均较假手术对照组增多(均P<0.01);BCRS组小鼠鼻窦黏膜上皮CC10阳性细胞数、CC10 mRNA及蛋白表达均较假手术对照组减少(均P<0.01)。CC10阳性细胞数分别与黏膜固有层PMN数、固有层胶原纤维沉积、上皮杯状细胞数及上皮厚度呈显著负相关,相关系数分别为-0.734、-0.776、-0.841和-0.805,均P<0.01;CC10平均灰度值分别与黏膜固有层PMN数、固有层胶原纤维沉积、上皮杯状细胞数及上皮厚度呈显著正相关,相关系数分别为0.771、0.802、0.887和0.855,均P<0.01。结论:小鼠BCRS模型鼻窦黏膜中CC10表达下调。CC10作为一种内源性负调控蛋白可能参与慢性鼻-鼻窦炎的发病过程。 展开更多
关键词 鼻-鼻窦炎 动物模型 Clara细胞10-kda蛋白
原文传递
结核分枝杆菌特异性分泌抗原克隆和融合表达及抗原性鉴定
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作者 娄培安 章辉 +4 位作者 刘加彬 王晓婷 周艳秋 赵广法 朱荫昌 《中国校医》 2006年第1期1-6,共6页
目的融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白CFP10-ESAT-6或ESAT-6-CFP10,研究其免疫学特性,为结核病的血清学诊断提供物质基础。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入原核表达载体pET32c(+)中,构建pET32c(+)-linker。PCR法扩增CFP10、ESAT-6基因... 目的融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白CFP10-ESAT-6或ESAT-6-CFP10,研究其免疫学特性,为结核病的血清学诊断提供物质基础。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入原核表达载体pET32c(+)中,构建pET32c(+)-linker。PCR法扩增CFP10、ESAT-6基因。将CFP10克隆入改建的载体pET32c(+)的linker前,ESAT-6克隆入linker后,构建CFP10-ESAT-6融合基因;或将ESAT-6克隆入改建的载体pET32c(+)linker前,CFP10克隆入linker后,构建ESAT-6-CFP10融合基因,分别转化大肠杆菌XL1-blue,抽提质粒,酶切鉴定;在大肠肝菌BL21中表达,通过Westernblot分析其抗原性。结果二个目的基因分别被按顺序成功克隆入载体pET32c(+)的linker前或后。重组质粒pET32c(+)-CFP10-ESAT-6或pET32c(+)-ESAT-6-CFP10靶基因的测序结果与预计序列完全一致。融合蛋白在BL21菌中高效表达。Westernblot分析表明,融合蛋白与活动性肺结核患者血清能发生特异性免疫反应。结论成功地构建了多抗原基因DNA质粒;pET32c(+)-CFP10-ESAT-6或pET32c(+)-ESAT-6-CFP10质粒在BL21菌中能高效表达rCFP10-ESAT-6或rESAT-6-CFP10融合蛋白,该蛋白兼具CFP10和ESAT-6二种蛋白的抗原性。本研究为rCFP10-ESAT-6或rESAT-6-CFP10融合蛋白在结核病血清学诊断的中应用奠定了基础。 展开更多
关键词 CFP-10蛋白(71—85) 结核杆菌 6-kda早期分泌性抗原靶 重组蛋白 血清学检验
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人热休克蛋白10在毕赤酵母中的表达及纯化
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作者 李晓颖 侯增淼 +4 位作者 邓晗 李敏 李哲 杨小琳 赵金礼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第10期1066-1070,共5页
目的在毕赤酵母中表达及纯化人热休克蛋白10(heat shock protein 10,Hsp10)。方法取新鲜人胎盘组织提取总RNA,反转录合成c DNA。以其为模版PCR扩增Hsp10基因片段,构建外分泌重组表达载体pPIC9KHsp10,电击转化毕赤酵母GS115菌株,经组氨... 目的在毕赤酵母中表达及纯化人热休克蛋白10(heat shock protein 10,Hsp10)。方法取新鲜人胎盘组织提取总RNA,反转录合成c DNA。以其为模版PCR扩增Hsp10基因片段,构建外分泌重组表达载体pPIC9KHsp10,电击转化毕赤酵母GS115菌株,经组氨酸缺陷筛选,获得阳性菌株pPIC9K-Hsp10/GS115。重组菌经甲醇诱导,SDS-PAGE检测蛋白含量,Western blot分析Hsp10特异性。结果获取了序列正确的Hsp10基因及高表达菌株。表达产物在相对分子质量11 000处可见特异表达条带,Hsp10蛋白表达量为400 mg/L,纯度大于90%;Western blot分析表明,Hsp10具有良好的反应原性和特异性。结论 Hsp10在毕赤酵母GS115中成功表达,为该蛋白的放大生产及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 人热休克蛋白10 毕赤酵母 真核表达 纯化
原文传递
Biomarkers in kidney transplantation: From bench to bedside
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作者 Natavudh Townamchai Somchai Eiam-Ong 《World Journal of Nephrology》 2015年第5期487-491,共5页
Immunosuppressive drug level monitoring and serum creatinine are widely used for kidney transplantation(KT) monitoring. Monitoring of drug level is not the direct measurement of the immune response while the rising of... Immunosuppressive drug level monitoring and serum creatinine are widely used for kidney transplantation(KT) monitoring. Monitoring of drug level is not the direct measurement of the immune response while the rising of creatinine is too late for detection of allograft injury. Kidney biopsy, the gold standard for KT monitoring, is invasive and may lead to complications. Many biomarkers have been discovered for direct monitoring of the immune system in KT and the benefit of some biomarkers has reached clinical level. In order to use biomarkers for KT monitoring, physicians have to understand the biology including kinetics of each marker. This can guide biomarker selection for specific condition. Herein, we summarize the recent findings of donor specific anti-human leukocyte antigen antibody, B lymphocyte stimulator, interferon-gamma induced protein of 10 kD a, and intracellular adenosine triphosphate monitoring, all of which have very strong evidence support for the clinical use in KT. 展开更多
关键词 免疫抑制药物 肾移植 治疗方法 临床分析
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