Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响

目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

基于Hedgehog通路探讨理肺消积丸对NSCLC A549细胞周期、增殖和迁移的影响

目的探讨理肺消积丸对A549细胞的影响作用及对Hedgehog通路的调控作用。方法采用MTT实验筛选理肺消积丸含药血清对A549细胞最佳干预浓度后,将细胞分为6组:对照组、理肺消积含药血清组、Hedgehog通路抑制剂组(Vismodegib组)、顺铂组、理肺消积含药血清+Vismodegib组、理肺消积含药血清+顺铂组。不同干预后,分别采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,采用克隆形成实验观察细胞克隆形成能力,采用Transwell实验观察A549细胞迁移能力,采用流式细胞术观察细胞周期比例的变化,采用qRT-PCR和Western blot技术检测Hedgehog通路中Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达的变化。结果浓度为10%的理肺消积丸含药血清能显著抑制A549细胞增殖(P<0.05),降低细胞克隆形成和迁移能力(P<0.05),阻滞细胞周期从G1期到S期转变,同时抑制Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),且与Vismodegib有良好的协同作用。结论理肺消积丸可显著抑制A549增殖和迁移能力,作用机制可能与其调控Hedgehog通路阻滞细胞周期有关。

Hedgehog通路异常激活对小鼠关节软骨稳态的影响

目的:探索Hedgehog通路在小鼠骨关节炎中的作用。方法:选取10周龄C57BL/6J雄性小鼠,在左侧后肢膝关节建立内侧半月板不稳定模型,右侧后肢膝关节为自身对照。术后8周处死建模组及对照组小鼠,收集其膝关节样本,体视镜观察膝关节破坏程度,显微CT(micro-CT)扫描分析半月板钙化程度,番红O-固绿软骨染色、甲苯胺蓝染色、苏木素-伊红染色和Ⅱ型胶原蛋白(Col2)免疫荧光染色观察软骨细胞外基质及软骨细胞变化,实时荧光定量PCR检测膝关节软骨Hedgehog信号通路重要分子平滑蛋白(Smo)、补缀同源物1(Ptch1)、神经胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli1)基因表达水平及Col2、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)、基质金属蛋白酶13(Mmp13)等软骨及其细胞外基质稳态相关分子表达变化。白细胞介素-1β(IL-1β)诱导ATDC5软骨细胞建立骨关节炎细胞模型,使用Smo抑制剂NVP-LDE225作用于细胞,实时荧光定量PCR检测Smo、Ptch1、Gli1、Col2、Sox9、Mmp13基因表达水平。结果:成功构建小鼠骨关节炎模型,建模组膝关节肿大,关节软骨表面出现损伤,钙化半月板体积高于对照组(P<0.01);膝关节软骨破坏,细胞外基质蛋白聚糖含量减少,软骨细胞排列紊乱;免疫荧光染色Col2阳性信号不连续;Col2、Sox9基因表达降低,Mmp13及Hedgehog通路相关分子Smo、Ptch1、Gli1基因表达高于对照组(P<0.05)。对软骨细胞使用Smo抑制剂NVP-LDE225可拮抗IL-1β诱导的Col2、Sox9基因表达降低及Mmp13、Smo、Ptch1、Gli1表达升高(P<0.05),挽救骨关节炎相关表型。结论:在骨关节炎状态下Hedgehog通路被异常激活,Hedgehog通路参与骨关节炎的发生发展。

抗纤软肝颗粒对肝纤维化大鼠Hedgehog通路核转录因子Gli1的影响

目的观察抗纤软肝颗粒对肝纤维化模型大鼠Hedgehog通路核转录因子Gli1的影响。方法将60只SPF级Wistar大鼠随机分成空白对照组,模型组,抗纤软肝颗粒低、中、高剂量组和环靶明对照组。除空白对照组外,所有实验大鼠均以四氯化碳(CCl4)复合因素法诱导肝纤维化模型8周。第9周开始给药干预,抗纤软肝颗粒低、中、高剂量组分别给予1.125 g/kg、2.5 g/kg、5 g/kg相应药物灌胃,环靶明对照组给10 mg/kg环靶明灌胃;均连续灌胃2周,灌胃期间造模继续。采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠肝功能指标及Ⅰ型胶原水平;采用Gomori银染法观察各组肝脏组织病理学改变;采用Real-time PCR法检测各组大鼠肝组织Gli1 mRNA表达水平,Western-blot法检测各组大鼠肝组织Gli1蛋白质表达水平,免疫组化法检测各组大鼠肝组织Gli1表达。结果Gomori银染显示,模型组大鼠肝组织中胶原纤维广泛增生,纤维间隔相互连接,假小叶形成;抗纤软肝颗粒各剂量组大鼠肝脏组织纤维化程度较模型组减轻,但不如环靶明对照组。与模型组比较,抗纤软肝颗粒中、高剂量组、环靶明组血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平显著降低(P<0.05),且高剂量组显著低于低剂量组(P<0.05);与模型组比较,抗纤软肝颗粒低、中、高剂量组Ⅰ型胶原含量明显降低(P<0.01),且高剂量组明显低于低、中剂量组(P<0.05);与环靶明对照组比较,抗纤软肝颗粒高剂量组ALT、AST水平及I型胶原含量差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,抗纤软肝颗粒各剂量组Gli1 mRNA及蛋白表达均降低(P<0.01);与环靶明对照组比较,抗纤软肝颗粒中、高剂量组Gli1 mRNA差异无统计学意义(P>0.05),而抗纤软肝颗粒各剂量组Gli1蛋白表达均增加(P<0.05)。免疫组化结果显示,抗纤软肝颗粒各剂量组大鼠肝脏组织Gli1的表达较模型组出现不同程度减少,其中以高剂量组减少最显著,但各剂量组减少程度均不如环靶明对照组。结论抗纤软肝颗粒对CCl4复合因素法所致的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能与下调Hedgehog通路核转录因子Gli1有关。

单体C反应蛋白介导的hedgehog通路对急性心肌梗死心功能的影响

目的探讨C反应蛋白(mCRP)对hedgehog通路的影响及hedgehog通路对急性心肌梗死心功能的影响。方法通过结扎左前降支构建兔急性心肌梗死模型,将兔随机分为对照组、手术组(结扎左前降支)、手术+mCRP稳定组(结扎左前降支,通过使用CRP小分子抑制剂1,6双磷酸胆碱-己烷稳定mCRP)、手术+hedgehog激动组(结扎左前降支,通过使用hedgehog激动剂purmorphamine激动hedgehog通路),每组为10只,采用ELISA方法检测动物模型术后12 h血液中mCRP的表达情况,Western blot检测各组心肌hedgehog通路表达情况。术后8 w超声心动图检测其心功能,包括左室舒张末期内径(LVIDd)、射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、及心输出量(CO)。ELISA检测氨基末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的含量。结果手术组及手术+hedgehog激动剂干预组的mCRP水平高于对照组及手术+mCRP稳定剂干预组mCRP水平,P<0.01。结扎左前降支并给予1,6双磷酸胆碱-己烷稳定mCRP后,hedgehog通路表达同对照组表达水平相当。结扎左前降支并给予hedgehog通路激动剂purmorphamine后,与其他手术组比较,NT-proBNP含量降低,兔LVIDd减小,EF、FS及CO增加,P<0.05。Pearson相关分析得出心肌梗死后hedgehog通路与mCRP表达水平呈正相关(R^(2)=0.94,P<0.05)。结论急性心肌梗死后,血液中mCRP及心肌组织中hedgehog蛋白表达水平均升高,且该蛋白表达与mCRP的表达呈正相关。这提示,mCRP介导hedgehog通路可能在急性心肌梗死发病过程中起着重要作用,激活hedgehog通路可能对心功能有保护作用。

Hedgehog通路下游转录因子Gli1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨hedgehog信号通路下游转录因子Gli1在肝细胞癌中的表达及临床意义。方法:收集63例肝细胞癌组织及相对应的癌旁组织构建成组织芯片,应用免疫组化、RT-PCR法检测Gli1在肝细胞癌及癌旁组织中的表达情况。结果:Gli1蛋白在肝癌组织与癌旁组织中表达具有显著性差异;Gli1mRNA含量在肝癌组织及癌旁组织中具有显著性差异;肝细胞癌中Gli1蛋白表达和mRNA含量与病理分级、门脉癌栓有无、淋巴结转移与否、原发肿瘤分级、TNM分期密切相关。结论:Gli1的上调参与了肝细胞癌的发生发展,与肿瘤转移侵润有关。Gli1可能成为肝细胞癌重要生物学标志和生物治疗靶点。

Hedgehog通路通过非配体依赖途径调控缺氧诱导的胰腺癌EMT及侵袭过程

目的探讨Hedgehog(Hh)通路调控缺氧诱导的胰腺癌上皮间质转分化(EMT)及侵袭机制。方法PANC-1和BxPC-3细胞培养于30 mL/L氧浓度的缺氧环境,观察缺氧对胰腺癌细胞的EMT及侵袭能力的影响,并检测Hh通路中SHH、PTCH、SMO、GLI1的表达情况;运用HIF-1α小干扰RNA干扰HIF-1α的表达,观察HIF-1α对缺氧诱导的胰腺癌EMT及侵袭的影响;运用cyclopamine和GLI1 siRNA分别抑制Hh通路的SMO或GLI1表达后,观察Hh通路在缺氧诱导胰腺癌EMT中的作用。结果缺氧能够积聚HIF-1α,活化胰腺癌Hh通路,但不影响SHH的表达,并可促进胰腺癌EMT及侵袭过程;HIF-1αsiRNA能够逆转缺氧诱导的上述过程,抑制Hh的活化,但不影响SHH及PTCH的表达。cyclopamine抑制缺氧状态下SMO及GLI1的表达,GLI siRNA可抑制GLI1的表达,但不影响SMO的表达,两者均可逆转缺氧诱导的EMT及侵袭过程。结论缺氧可能是通过非配体依赖途径,上调SMO促进胰腺癌EMT及侵袭。

Hedgehog通路对乳腺癌细胞增殖和凋亡的作用及其对Cx32和Cx43表达的影响

目的:研究Hedgehog通路对乳腺癌细胞增殖、凋亡及间隙连接蛋白32(Cx32)和间隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨其在乳腺癌细胞增殖和转移中的作用机制。方法:取对数生长期乳腺癌MCF-7细胞分为环巴胺组和空白对照组,环巴胺组分别以5、10、20、30和40μmol·L^(-1)环巴胺处理MCF-7细胞24、48和72h,应用MTT法测定各组MCF-7细胞增殖抑制率。以0(阴性对照组)和25μmol·L^(-1)环巴胺处理MCF-7细胞48h后,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率及Cx32、Cx43胞膜阳性表达率。结果:与空白对照组比较,各剂量环巴胺组MCF-7细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05),且随环巴胺剂量增加和作用时间延长其增殖抑制作用增强;与空白对照组比较,25μmol·L^(-1)环巴胺组48h时,MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与阴性对照组比较,25μmol·L^(-1)环巴胺组48h时,MCF-7细胞胞膜Cx32和Cx43阳性表达率明显升高(P<0.05)。结论:Hedgehog通路可抑制乳腺癌细胞凋亡,并调节Cx43和Cx32的胞膜表达。

内皮细胞通过Hedgehog通路促进胶质瘤干细胞自我更新

目的探讨Hedgehog通路在内皮细胞促进胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)自我更新中的可能作用。方法实验以GL261细胞系中分离的GSC和内皮细胞系b.END3为研究材料,采用Transwell双室细胞培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western blot、体内移植瘤实验以及慢病毒载体基因干扰等方法,检测内皮细胞对GSC成球、成瘤能力、干性基因表达以及Hedgehog信号通路相关的部分基因表达的影响。结果与对照组相比:①GSC与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强,表现为形成干细胞球数目明显增多,体积明显增大,尤其在每孔5个(24.3%vs 11.3%)和每孔10个细胞(39.4%vs 25.8%)的极低浓度下更加明显(P<0.05)。②共培养体系中,GSC的干性相关基因Oligo2、Bmi1与Hedgehog信号通路相关基因Gli1的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。③体内移植瘤实验发现,与内皮细胞共同注射的GSC成瘤能力明显增强,所形成的移植瘤体积显著大于对照组(P<0.05),而且出现了部分瘤体破溃、小鼠死亡。④通过慢病毒载体基因干扰Smo基因表达抑制Hedgehog信号通路后,内皮细胞促进GSC自我更新的上述现象消失。结论内皮细胞可能通过激活Hedgehog信号通路促进GSC自我更新。

抗纤软肝颗粒调控Hedgehog通路核转录因子Gli1抑制肝星状细胞活化的研究

目的:探讨抗纤软肝颗粒调控Hedgehog(Hh)信号通路抑制HSC活化的作用机制。方法:引进人肝星状细胞系HSCLX2,常规培养及传代,设立空白对照组、模型组和抗纤软肝颗粒中、低剂量组。药物作用24h后收集细胞,测定各组Hh信号通路相关信号分子Glil、Shh、Ptc、Smo的表达,转化生长因子-β1(TGF-β1)及PDGF-B的水平。结果:模型组HSC细胞Hh信号通路相关信号分子Shh、Ptc、Smo、Glil mRNA表达均增高,与空白对照组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);抗纤软肝颗粒中、低剂量组Shh、Ptc、Smo、Glil mRNA表达较模型组减少,差异具有显著性意义(P<0.05),各剂量组之间比较,差异无显著性意义。HSC诱导活化后,模型组TGF-β1及PDGF-B合成增加,与空白对照组比较差异具有显著性意义(P<0.05);抗纤软肝颗粒中、低剂量组TGF-β1及PDGF-B合成较模型组下降,差异具有显著性意义(P<0.05),各剂量组之间比较,差异无显著性意义。结论:抗纤软肝颗粒能够下调Hh信号通路核转录因子Gl订及相关信号分子Shh、Ptc、Smo的表达,从而抑制HSC活化,减少TGF-β1、PDGF-B的合成。

基于Sonic Hedgehog通路探讨复方胃炎合剂干预慢性萎缩性胃炎癌前病变的机制

目的观察复方胃炎合剂对慢性萎缩性胃炎癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)脾虚痰湿热瘀证大鼠Sonic Hedgehog(Shh)通路相关基因表达的影响,并探讨其抑制PLGC进展的机制。方法SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白组、空白+中药组、模型组、维酶素组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组8只。造模组采用复合造模法构建PLGC脾虚痰湿热瘀证大鼠模型,造模成功后,各组予以相应干预,干预30 d后进行标本采集,采用HE染色检测大鼠胃黏膜病变情况,RT-qPCR检测胃组织Shh通路相关基因SHH、PTCH1、SMO、Gli1、Gli2、Gli3 mRNA的表达。结果HE染色提示空白组和空白+中药组大鼠胃组织病理组织学正常,模型组大鼠胃黏膜萎缩,并可见肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)和上皮内瘤变(intraepithelial neoplasia,IN);维酶素组和中药各剂量组病理组织学可见不同程度改善,以中药中、高剂量组改善最为明显。与空白组比较,模型组大鼠SHH、SMO、PTCH、Gli1 mRNA表达量下降,Gli2、Gli3 mRNA表达量上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠胃组织SHH、SMO、PTCH、Gli1 mRNA表达量均上升,Gli2、Gli3 mRNA表达量均降低,其中空白+中药组、维酶素组、中药中剂量组、中药高剂量组SHH、SMO、PTCH mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组大鼠胃组织Gli1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),空白+中药组、维酶素组、中药中剂量组、中药高剂量组大鼠胃组织Gli2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01),中药各剂量组Gli3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方胃炎合剂可通过激活Shh通路改善胃黏膜病变,从而抑制PLGC的进展。

前列腺癌治疗新靶点——hedgehog通路

Hedgehog(Hh)通路是调控动物发育的一系列信号串联。Hh信号在胚胎形成时期最为活跃,然而,在成体组织和器官的细胞中Hh通路的异常激活将会引起各种疾病和肿瘤。近年来研究发现Hh通路在前列腺发育和前列腺癌的发生中具有重要作用;Hh信号对肿瘤细胞的生存、增殖和转移是必须的。从藜芦属植物中分离得到的一种甾体生物碱西洛帕明能特异性抑制Hh通路,具有显著的抗肿瘤活性。目前研究发现西洛帕明可通过阻断Hh通路诱导体外和体内的前列腺癌细胞退化并减少扩散。因此,Hh通路为前列腺癌治疗的药物开发提供了新的靶点。

人参皂苷Rg1联合奈达铂通过Hedgehog通路抑制卵巢癌细胞OVCAR-3的增殖及机制探究

目的:探究人参皂苷Rg1联合奈达铂对卵巢癌细胞OVCAR-3增殖的影响、可能的机制以及二者的协同作用。方法:CCK-8法检测人参皂苷Rg1、奈达铂以及两者联合对OVCAR-3细胞增殖的影响;Western blotting检测3组药物干预后Hedgehog通路关键蛋白PTCH1、SMO、Gli1表达的改变;流式细胞仪检测3组药物干预后OVCAR-3细胞周期的变化。结果:与未进行药物干预的对照组相比,人参皂苷Rg1组、奈达铂组、联合药物组均对OVCAR-3细胞的增殖产生了抑制作用,差异有统计学意义(P <0. 05),人参皂苷Rg1与奈达铂表现出协同增效作用;与对照组相比,奈达铂组、人参皂苷Rg1组、联合药物组降低了PTCH1、SMO、Gli1蛋白的表达,差异有统计学意义(P <0. 05),人参皂苷Rg1与奈达铂表现出协同增效作用;与对照组相比,仅有联合药物组将细胞周期阻滞在G2期(P <0. 05)。结论:人参皂苷Rg1联合奈达铂可能通过调低Hedgehog通路相关蛋白将OVCAR-3细胞的周期阻滞在G2期从而抑制其增殖,人参皂苷Rg1对奈达铂表现出协同增效作用。

Hedgehog通路阻滞剂GANT61对胰腺癌细胞株的抑制作用

目的:探讨Hedgehog信号通路特异性阻滞剂GANT61抑制本通路在胰腺癌细胞株中的表达,观察胰腺癌细胞株增殖、迁移等能力的改变,为胰腺癌的治疗提供基础实验数据。方法:采用多株胰腺癌细胞,半定量RT-PCR法从中检测出Hedgehog通路表达相对活跃的细胞株,采用不同浓度的GANT61处理细胞株后,MTT法检测细胞株增殖活力改变,细胞划痕实验检测细胞迁移能力改变。结果:采用GANT61处理后,随着浓度的增加,胰腺癌细胞株增殖活力下降,迁移能力降低。结论:GANT61可通过抑制Hedgehog信号通路的表达,有效抑制胰腺癌细胞株的增殖、迁移等,为GNAT61药物在临床治疗胰腺癌提供扎实的理论基础。

雷公藤红素调控Hedgehog通路促进人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡

目的探讨雷公藤红素(tripterine)对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响及其通过调控Hedgehog通路影响SKOV-3细胞凋亡的机制。方法将实验分为空白对照组,雷公藤红素低剂量(5nmol/L)组、雷公藤红素中剂量(10nmol/L)组、雷公藤红素高剂量(20 nmol/L)组和环巴胺(cyclopamine)抑制剂(5μmol/L)组5组。MTT检测SKOV-3细胞存活率。流式细胞术检测SKOV-3细胞凋亡,Western blot和Real time PCR检测SKOV-3细胞中SHH、PTCH1、Gli1、Gli3、SMO及下游Bcl-2、Caspase-3的蛋白和mRNA表达水平。结果与空白对照组进行比较,雷公藤红素低、中、高剂量组及环巴胺抑制剂组细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,SHH、PTCH1、Gli1、SMO、Bcl-2蛋白及其mRNA相对表达量降低,Gli3、Caspase-3蛋白及mRNA相对表达量升高。与雷公藤红素低剂量组比较,雷公藤红素中、高剂量组及环巴胺抑制剂组细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,SHH、PTCH1、Gli1、SMO、Bcl-2蛋白及其mRNA相对表达量降低,Gli3、Caspase-3蛋白及m RNA相对表达量升高,雷公藤红素高剂量组上述指标变化程度更明显。结论雷公藤红素通过调控Hedgehog通路及其下游基因的表达促进人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡。

鼻咽癌中NF-κB对Hedgehog通路基因表达的影响

目的 Hedgehog通路与NF-κB均被发现与多种癌症相关,本研究初步探讨在鼻咽癌中两者之间的相关性,从而为靶点治疗等临床应用提供可靠的实验依据。方法提取12例鼻咽癌、鼻咽炎患者病例样本总RNA反转录得m RNA的c DNA进行荧光定量PCR,通过统计相关系数得出Hedgehog通路与NF-κB相关性;利用不同浓度NF-κB抑制剂PDTC（50~400μmol/L）作用24 h鼻咽癌细胞株CNE1,以CCK8法检测PDTC对CNE1增殖的影响;并对受不同浓度PDTC影响下CNE1的Hedgehog通路与NF-κB基因表达进行荧光定量PCR测定。结果鼻咽癌、鼻咽炎病例样本中Hedgehog通路基因Gli、PTCH、SMO与NF-κB相关系数大于0.8,呈现较强的相关性;PDTC对CNE1有显著的增殖抑制,而且显著抑制NF-κB及Hedgehog通路各基因的表达。结论鼻咽癌中NF-κB与Hedgehog有较强的相关性,NF-κB抑制剂PDTC能显著抑制鼻咽癌细胞株CNE1增殖以及NF-κB、Hedgehog信号通路基因表达。

Sonic hedgehog通路与肝细胞癌的研究进展

SHH通路与肿瘤的发生具有密切的关系,在由内胚层形成的组织器官肿瘤中常过度表达。最新研究表明,SHH通路与肝细胞癌(HCC)也存在密切联系,本文就SHH通路与HCC的研究进展作一综述。

食管鳞状细胞癌成纤维细胞hedgehog通路对SHH蛋白的应答

目的探讨食管鳞状细胞癌成纤维细胞hedgehog通路是否应答SHH蛋白。方法分离、原代培养食管鳞状细胞癌成纤维细胞,用Western blot方法检测培养的细胞是否为成纤维细胞,SHH蛋白与细胞孵育后提取细胞总RNA,荧光定量PCR方法检测细胞中hedgehog通路是否应答。结果 Western blot结果显示培养细胞表达间质细胞标记Vimentin和Fibronectin,不表达上皮细胞标记E-cadherin。三株细胞中有两株应答SHH蛋白,一株不应答。结论食管鳞状细胞癌中,成纤维细胞对SHH配体是否应答存在着不同的情况,因此,检测间质中Hh通路的活性可为临床上选择对Hh抑制剂应答的肿瘤提供重要的生物标记。

Hedgehog通路与胰腺癌相关性研究进展

Hedgehog(Hh)信号转导通路在胚胎发育的过程中发挥重要作用,控制着细胞的增殖和分化,随着近年的深入研究,该信号通路的异常激活对人胰腺癌的发生和恶性生物学特性的维持极为重要。此文就Hh通路与胰腺癌的相关性研究作一综述。

Hedgehog通路介导HL60细胞生物学功能的影响分析

目的探讨Hedgehog通路介导难治性髓系白血病(AML)生物学功能的影响。方法分别用浓度为0、10、50、100μmol/L的GANT-61处理人多药耐药的白血病HL60/ADR细胞株和放射抵抗的HL60/RX细胞株,采用CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成检测细胞存活,Western blot检测细胞表达。结果随着GANT-61浓度的增加与作用时间的延长,HL60/ADR与HL60/RX细胞的凋亡指数与细胞增殖抑制率显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着GANT-61浓度的增加与作用时间的延长,HL60/ADR与HL60/RX细胞的集落生成数目都显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着GANT-61浓度的增加与作用时间的延长,HL60/ADR与HL60/RX细胞的pAKT表达显著下降,NF-κB表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Hedgehog通路可以通过调节PI3K/AKT/NF-κB途径,抑制难治性AML细胞的增殖,促进细胞调查,对临床治疗难治性AML提供一个潜在的有效方法。