不同配伍比例的半枝莲-白花蛇舌草药对对肝癌细胞增殖活性的影响

目的:研究不同配伍比例的半枝莲-白花蛇舌草药对(简称半白药对,SB-OD)对肝癌细胞株(MHCC97H细胞和Huh7细胞)增殖活性的抑制作用。方法:运用CCK-8法观察不同配伍比例的半白药对(半白1∶1,半白2∶1,半白1∶2)干预MHCC97H和Huh7细胞24 h,分别计算其IC_(50)值;并应用细胞平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,分析不同配伍比例的半白药对对MHCC97H和Huh7细胞增殖活性的影响。结果:不同配伍比例的半白药对作用MHCC97H和Huh7细胞后的生存活力明显下降(P<0.01),并呈浓度依赖性,其中半白1∶1组作用于MHCC97H和Huh7细胞的IC_(50)值分别为6.69 mg/mL和7.95 mg/mL;半白2∶1组作用于MHCC97H和Huh7细胞的IC_(50)值分别为2.58 mg/mL和3.43 mg/mL;半白1∶2组作用于MHCC97H和Huh7细胞的IC_(50)值分别为15.04 mg/mL和16.60 mg/mL。不同配伍比例的半白药对干预MHCC97H和Huh7细胞后的克隆形成率明显降低(P<0.01)。结论:不同配伍比例的半白药对均能够抑制肝癌MHCC97H和Huh7细胞的增殖活性,2∶1配伍比例的抑制作用最佳,可作为半白药对抗肿瘤研究的实验基础。

白花蛇舌草-半枝莲药对治疗胃癌的物质基础和作用机制研究进展

胃癌是消化系统的常见恶性肿瘤之一,好发于中老年人群。中医认为胃癌是由津亏热结、癌毒胶结于胃腹而形成的一种瘤瘕,在临床中常用清热解毒类药物进行治疗。白花蛇舌草-半枝莲药对具有清热解毒、活血化瘀、消痈散结、抗炎止痛的作用,可治疗胃癌。现代药理学研究证实,白花蛇舌草-半枝莲药对可通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖、抑制血管生成、改善免疫微环境、下调端粒酶活性等途径起到抗胃癌的作用。本文对白花蛇舌草-半枝莲药对配伍后活性成分抗胃癌的机制进行综述,为白花蛇舌草-半枝莲药对的临床用药和抗胃癌新药研发提供理论依据和参考。

复方白花蛇舌草和半枝莲总黄酮提取工艺的研究

本研究采用正交试验设计法优选复方白花蛇舌草和半枝莲(质量比为1∶1)总黄酮的提取工艺,得到的最佳提取工艺为:用药材30倍量的70%乙醇加热回流提取3次,每次2 h。实验表明本研究所优选的提取工艺方法简便,工艺可行性强。

白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位抗肿瘤作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位的抗肿瘤作用。方法将接种S180肉瘤细胞的小鼠分为阴性组、阳性(环磷酰胺,CTX)组、白:半配对组,白半水提醇溶组以及白半水提醇沉组。给药12 d后,称重,取材,记录瘤重,计算抑瘤率、生长抑制率,记录肝脏、脾脏质量并计算指数。HE染色方法观察肿瘤组织细胞的形态学特征,ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ、TNF-α含量,细胞免疫荧光标记法检测细胞凋亡。结果CTX组、不同给药组抑瘤率分别为83.46%、50.82%、32.79%、36.61%。与阴性对照组相比,CTX组肝指数、脾指数明显降低(P<0.05,P<0.01);给药各组肝指数和脾指数,明显升高(P<0.05,P<0.01)。HE染色显微镜观察,瘤组织出现大面积坏死区,但提取物组细胞坏死较少。用ELISA法测得,各中药给药组能提高机体IL-2、IFN-γ、TNF-α表达水平。体外细胞凋亡实验初步证明白花蛇舌草、半枝莲药对具有细胞毒作用,其提取物细胞毒作用减弱。结论白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位均具有抗肿瘤作用,提取分离后各部分作用均有所减弱,说明中药配伍作用的合理性以及综合性。

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抑菌活性部位研究

目的通过测定白花蛇舌草-半枝莲药对醋酸乙酯/95%乙醇(1∶1)提取上清液F0、析出浸膏F1、析出浸膏经AB-8大孔树脂富集后组分F2及F2经聚酰胺分离得到的各组分的抑菌活性,寻找药对提取物抑菌活性的活性部位或活性成分。方法采用一剂量法和二倍稀释法测定各提取对5种微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、酵母菌)的抑菌活性。结果与结论 F0抑制金黄色葡萄球菌活性最强;F1没有抑菌活性;F1经过大孔树脂富集后组分F2抑菌活性得到显著增强,其抑制枯草芽孢杆菌活性强于F0,抑菌效价值达8.37μg.ml-1;F2经聚酰胺分离得到的F2-10组分是抑制枯草芽孢杆菌的活性部位;各提取物对霉菌和酵母菌均无抑制活性。

半枝莲、白花蛇舌草抗肿瘤的研究进展

体内外药理实验显示:半枝莲、白花蛇舌草抗肿瘤作用明显,而且二者在抗肿瘤方剂中常以药对形式出现。本文分析二者抗肿瘤的机制,并探讨二者抗肿瘤的协同作用,为组方及临床应用提供理论依据。

半枝莲和白花蛇舌草总多糖对S_(180)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的:探讨半枝莲和白花蛇舌草总多糖对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤及其免疫调节作用。方法:采用MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变;建立S180荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算抑瘤率、胸腺与脾脏指数;观察对荷瘤小鼠体液免疫功能及网状内皮系统吞噬功能的影响。以上动物试验在造模同时灌胃给予不同剂量的半枝莲和白花蛇舌草总多糖和环磷酰胺,模型组和正常组动物给予等容量的生理盐水。结果:浓度为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的半枝莲和白花蛇舌草总多糖均可抑制S180肿瘤细胞株的体外增殖,且抑制作用呈浓度-效应依赖性,100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL使G0/G1期细胞百分数增加,G2/M期细胞百分数下降;200mg/kg对S180荷瘤小鼠瘤重生长具有明显抑制作用,并且增加其胸腺指数和脾脏指数;200mg/kg和100mg/kg明显提高S180荷瘤小鼠的血清半数溶血素值,200mg/kg显著提高荷瘤小鼠的吞噬指数K及吞噬系数α值。结论:半枝莲和白花蛇舌草总多糖对S180荷瘤小鼠具有较强抗肿瘤作用,并可以提高其免疫系统功能。

半枝莲和白花蛇舌草总多糖对肝癌脾虚证候动物模型的干预研究

目的 探讨半枝莲和白花蛇舌草总多糖对肝癌（H22）脾虚证候动物模型的影响.方法 选无特定病原体级昆明小鼠36只（体质量18～22 g）,完全随机分为正常对照组（6只）、脾虚模型组（6只）、环磷酰胺组（6只）和总多糖组（18只：高、中、低浓度各6只）.制备质量比为1∶1的半枝莲和白花蛇舌草总多糖,除正常对照组外其余3组均制备为脾虚证候动物模型（大黄＋芒硝）,4组均接种肝癌H22细胞.正常对照组和脾虚模型组给予蒸馏水0.4 ml/（次·只）灌胃,环磷酰胺组和高、中、低浓度总多糖组分别给予环磷酰胺25 mg/kg和总多糖200、100、50 mg/kg,观察荷瘤小鼠体质量、肛温、胸腺与脾脏指数的变化,检测白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋百分比,CD4 ＋/CD8＋比值）水平.结果 造模后及药物干预后,脾虚模型组小鼠体质量和肛温均低于正常对照组,组间差异均有统计学意义[造模后,体质量：（26.2±1.0）g比（32.7±1.0）g,肛温：（36.53±0.27）℃比（37.39±0.35）℃;药物干预后,体质量：（29.5±2.9）g比（36.0 ±2.8）g,肛温：（36.87±0.29）℃比（37.43±0.39）℃;均P＜0.05].药物干预后,环磷酰胺组和总多糖组（高、中浓度）小鼠体质量均高于脾虚模型组,差异有统计学意义[（32.6±2.8）、（33.6±2.6）、（32.2 ±2.6）g比（29.5±2.9）g,P＜0.05].环磷酰胺组和总多糖组（高浓度）小鼠肛温高于脾虚模型组,差异有统计学意义[（37.23 ±0.32）、（37.18 ±0.28）℃比（36.87±0.29）℃,P＜0.05].与脾虚模型组比较,环磷酰胺组和总多糖组（高、中、低浓度）小鼠瘤体重量明显降低,差异有统计学意义[（2.0±0.6）、（4.6±l.4）、（5.0±1.9）、（6.0±2.2）g比（9.8 ±2.4）g,P＜0.01];总多糖组（高、中浓度）、正常对照组小鼠胸腺指数高于脾虚模型组,差异有统计学意义[（2.59±0.41）、（2.41 ±0.57）、（2.85±0.72）比（1.87±0.61）,P＜0.01或P＜0.05];总多糖组（高浓度）、正常对照组小鼠脾脏指数高于脾虚模型组,差异有统计学意义[（7.5±2.0）、（8.7±2.3）比（5.9±1.4）,P＜0.01或P＜0.05].与脾虚模型组比较,总多糖组（高、中浓度）小鼠外周血IL-2和TNF-α含量明显升高[IL-2：（1.79±0.32）、（1.52±0.26）μg/L比（1.07±0.26） μg/L,TNF-α：（0.96±0.18）、（0.86 ±0.20） μg/L比（0.63 ±0.21） μg/L,P＜0.01或P＜0.05].总多糖组（高浓度）小鼠外周血中T淋巴细胞CD3＋、CD4＋总数高于脾虚模型组[CD3＋：（62±16）％比（46±11）％,CD4＋：（30±4）％比（24±6）％,均P＜0.05],总多糖组（高、中浓度）小鼠外周血中T淋巴细胞CD8＋总数低于脾虚模型组[（24±5）％、（24±6）％比（31±8）％,P＜0.05],总多糖组（高、中、低浓度）小鼠外周血中T淋巴细胞CD4 ＋/CD8＋比例均高于脾虚模型组[（1.26±0.35）、（1.18±0.29）、（1.02±0.41）比（0.77±0.49）,P＜0.01或P＜0.05].结论 半枝莲和白花蛇舌草总多糖对肝癌（H22）脾虚证候小鼠模型具有较强抗肿瘤作用,并可以提高其免疫系统功能.

半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分分析及其抗子宫内膜癌细胞活性研究

目的:对半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分进行分析,并研究体外抗子宫内膜癌细胞活性。方法:采用GC-MS结合保留指数(Kovats retention index,KI)对主要成分进行分析和鉴定;甲基偶氮唑盐类(MTT)法研究三者的抗子宫内膜癌细胞活性。结果:通过GC-MS分析鉴定出半枝莲、白花蛇舌草及药对石油醚部位中同时含有不饱和脂肪酸、酯类、甾醇类等成分,白花蛇舌草和药对相区别于半枝莲的石油醚部位又含有较多蒽醌类化合物。半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位抗子宫内膜癌细胞HEC-1A的IC50值分别为275.204μg/m L,105.826μg/m L,148.645μg/m L,抗子宫内膜癌细胞Ishikawa的IC50值分别为189.114μg/m L,77.974μg/m L,137.999μg/m L。结论:半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位对子宫内膜癌细胞HEC-1A和Ishikawa均有抑制作用,其中白花蛇舌草的抗子宫内膜癌细胞活性最强,推测可能与含量较高的蒽醌类化合物有关。

泌感合剂中金钱草、半枝莲和白花蛇舌草的薄层色谱鉴别

为完善泌感合剂的质量标准,建立了泌感合剂中金钱草、半枝莲和白花蛇舌草3种组方药材的薄层色谱鉴别法,并用该方法对泌感合剂中的金钱草、半枝莲和白花蛇舌草进行了定性鉴别.实验结果表明,3种组方药材的薄层色谱图中,对照品、对照药材和供试品在相同位置处有相同颜色斑点,分离较好,阴性无干扰.薄层色谱鉴别法简单易行、重现性好、专属性强,可作为泌感合剂中金钱草、半枝莲和白花蛇舌草的定性鉴别方法.

基于生物信息学方法探讨银屑病关键差异基因的免疫浸润机制及相关中药预测分析

目的探讨银屑病关键差异基因的免疫浸润机制及分析预测相关作用中药。方法利用基因芯片数据库(Gene Expression Omnibus,GEO),对银屑病基因探针芯片数据进行富集分析和免疫浸润分析。运用R语言及相关安装包程序对银屑病差异基因进行基因本体论(GO)及基因通路富集分析(KEGG);通过CIBERSORT反卷法对22类免疫细胞在银屑病的含量及比例进行分析;利用COREMINE数据库对明显富集的免疫相关的生物学过程及核心靶基因进行中药预测。结果银屑病相关的蛋白网络互作关键靶基因涉及KIF2C、BUB1、BUB1B等14个靶基因,涉及中性粒细胞活化、淋巴细胞迁移、白细胞趋化性等多种免疫相关途径,与自身免疫、炎症、心肌代谢通路密切相关。CIBERSORT反卷积法对银屑病的免疫相关性分析中,调节性T细胞、活化的树突状细胞与活化的CD4^(+)记忆性T细胞呈正相关,而活化的树突状细胞与静息肥大细胞、巨噬细胞M2呈负相关。在总体样本中,与正常皮肤组织组相比,银屑病皮损组织中中性粒细胞、活化的树突状细胞、静息的CD4^(+)记忆T细胞明显增高,而静息肥大细胞则明显减少,而在配对样本中记忆B细胞在银屑病组织中呈现上升趋势,而调节性T细胞呈下降趋势。免疫相关性分析中,调节性T细胞、活化的树突状细胞与活化的CD4^(+)记忆性T细胞呈正相关,而活化的树突状细胞与静息肥大细胞、巨噬细胞M2呈负相关。通过COREMINE预测发现,半枝莲、白花蛇舌草、人参、黄芪、防己与银屑病相关免疫浸润的关系最密切,且多归为肺经,功效多与清热补虚相关。结论中性粒细胞、树突状细胞、CD4^(+)记忆T细胞、调节性T细胞与银屑病关系密切,银屑病相关的差异基因涉及多种免疫相关生物学过程及通路,筛选出半枝莲、白花蛇舌草、人参、黄芪、防己等中药可能为其潜在的分子药物来源。

“半枝莲-白花蛇舌草”药对治疗胃癌的网络药理学作用机制分析

目的基于网络药理学,探讨"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌(GC)的有效活性成分及作用机制。方法通过TCMSP数据库选取"半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有的131个化合物,筛选其活性成分及潜在靶点;通过人类孟德尔遗传数据库、GeneCards数据库挖掘GC疾病靶点;结合化合物及疾病靶点,构建化合物-靶点网络图,并进行GO功能富集及KEGG通路富集分析。结果 "半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有34个活性成分,对应GC161个靶点;主要通过调控RNA聚合酶II启动子、胞质、胞外间隙、血管生成、细胞凋亡信号通路等治疗胃癌,主要涉及肿瘤信号通路、蛋白聚糖信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、p53信号通路等。结论 "半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌的作用机制确切,这为临床中医治疗胃癌提供了客观依据,亦可指导"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌作用机制的实验研究。

基于网络药理学的白花蛇舌草-半枝莲药对治疗大肠癌的作用机制研究

[目的]探讨白花蛇舌草-半枝莲药对治疗大肠癌的物质基础和作用机制。[方法]利用中药系统药理学分析平台(TCMSP),通过设置口服利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18为条件并结合文献筛选出候选化合物,并通过该数据库检索与活性成分相关的作用靶点;通过比较毒物基因组学数据库(CTD)检索出大肠癌相关基因;利用Cytoscape 3.6.1构建成分-靶点网络和成分-靶点-信号通路网络;通过DAVID进行通路注释和分析,预测该药治疗大肠癌的作用机制。[结果]与结肠癌相关的白花蛇舌草-半枝莲药对成分-靶点-信号通路网络中包含19种成分、33个靶点及25条信号通路。其度值度值前3的候选化合物分子为槲皮素、黄芩素、黄芩苷,度值前3的靶点为蛋白激酶B1(AKT1)、肿瘤抑制蛋白(TP53)、基质金属蛋白酶2(MMP-2),涉及结肠癌、P53信号通路、凋亡等25条信号通路。[结论]白花蛇舌草-半枝莲中活性成分可作用于AKT1、TP53、MMP-2等靶点,通过调节结肠癌、P53信号通路、凋亡等多条信号通路,协同治疗大肠癌。

白花蛇舌草半枝莲对药治疗常见肿瘤的思路探析

肿瘤是当今社会中患病率、复发率及病死率很高的一种疾病。对中药是指将2种中药联合起来使用以产生协同作用或增效减毒作用的药对,其中白花蛇舌草配伍半枝莲是最常见的一组抗肿瘤药对,可以通过控制各种肿瘤细胞的生长增殖、诱发肿瘤细胞的适度凋亡,并提高人体免疫力等途径对肿瘤发挥治疗作用。文章从白花蛇舌草、半枝莲对药治疗肿瘤尤其是常见的肝癌和乳腺癌的作用、意义及临床疗效的各项研究出发,探讨该配伍对肿瘤的相关研究进展及发展前景。

基于网络药理学探讨白花蛇舌草-半枝莲抗肝细胞癌的作用机制

[目的]基于网络药理学探讨白花蛇舌草-半枝莲药对治疗肝细胞癌的潜在靶点及作用机制。[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)检索白花蛇舌草和半枝莲活性成分,导入Drugbank数据库进行蛋白靶点匹配,使用GeneCards数据库、人类在线孟德尔遗传(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)数据库、治疗目标数据库(Therapeutic Target Database,TTD)、Drugbank、肝细胞癌肿瘤数据库(Oncogenomic Database of Hepatocellular Carcinoma,OncoDB.HCC)和Liverome数据库等获取肝细胞癌相关靶点,运用Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点”网络,String数据库构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并通过网络拓扑分析筛选关键成分及核心靶点,最后利用R语言及Cluego对预测得到的核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。[结果]白花蛇舌草-半枝莲药治疗肝细胞癌的潜在靶点89个,通过网络拓扑分析筛选得到6个核心靶点、5种关键成分。GO功能富集分析显示,白花蛇舌草-半枝莲药对主要参与细胞增殖、细胞凋亡、炎症反应和血管生成等生物学途径。KEGG通路富集分析显示,p53抑癌基因通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)通路、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路等是其关键信号通路。[结论]白花蛇舌草-半枝莲药对中有效成分主要是槲皮素、木犀草素、β-谷甾醇等,通过调节p53、PI3K-Akt、HIF-1、NF-κB和VEGF等信号通路抑制肝癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,减少炎症反应,抑制血管生成,从而实现对肝细胞癌的治疗作用。

超常规剂量半枝莲和白花蛇舌草治疗恶性肿瘤安全性的回顾性队列研究

目的 评价超常规剂量半枝莲和白花蛇舌草治疗恶性肿瘤的安全性。方法 采用回顾性队列研究方法,连续纳入535例恶性肿瘤患者,超常规剂量半枝莲和白花蛇舌草暴露组365例,非暴露组170例,详细记录研究时间窗内所有用药及不良反应事件情况。比较暴露组和非暴露组之间不良事件OR值。将服药剂量及服药时间进行加权计算累计暴露值,比较暴露组内不同累计暴露值之间不良事件发生率。结果 由于2组之间存在混杂因素,为使组间基线资料相对均衡,进一步采用倾向评分匹配法进行2∶1匹配,匹配后暴露组和非暴露组之间不良事件差异无统计学意义(OR=1.25,95%CI0.63~2.47,P>0.05);暴露组内,随着累计暴露值增大,不良事件发生率呈增加趋势(χ^(2)=18.544,P<0.001),高累计暴露值组不良事件发生率高于低累计暴露值组。结论 本研究数据暂不支持超常规剂量半枝莲/白花蛇舌草治疗恶性肿瘤可以诱发更多不良事件,但是超大剂量、长时间使用潜在诱发肝功能异常及胃肠道不适的风险趋势。

Box-Behnken效应面法优化半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮的提取工艺

目的优选半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮的提取工艺。方法以配比、乙醇体积分数、料液比、提取时间为考察因素,采用Box-Behnken效应面法,以总黄酮提取率为考察指标,优化其提取的工艺条件,并以芦丁为对照品,三氯化铝为显色剂,采用紫外分光光度法测定药对中黄酮的含量。结果确定最佳的提取工艺条件为半枝莲和白花蛇舌草配比为2.85∶1,乙醇体积分数为65.15%,料液比为1∶28.09,回流提取2次,提取时间为2.49h。结论 Box-Behnken效应面法优选的提取工艺简便可行,预测效果好,可以得到较高含量的黄酮,有一定的应用前景。

基于网络药理学的白花蛇舌草—半枝莲抗肿瘤作用机制研究

目的应用网络药理学研究方法挖掘白花蛇舌草-半枝莲抗肿瘤的物质基础及其作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库检索白花蛇舌草、半枝莲两味中药的主要活性成分,并进行靶点预测。通过TTD、Drug Bank和Gene Cards数据库对其作用靶点进行筛选得到与肿瘤相关的作用靶点。应用STRING平台构建蛋白-蛋白(PPI)互作网络模型,并使用Cytoscape软件对该网络进行拓扑学分析得到核心靶点。通过Metascape软件并对核心靶点进行GO-BP生物功能富集分析以及KEGG通路分析。结果经数据库分析白花蛇舌草中含有活性化合物7个、作用靶点282个;半枝莲中含有活性化合物29个、作用靶点428个,两味药中与肿瘤相关的作用靶点421个。GO-BP生物功能富集以及KEGG通路分析发现,两味中药主要通过激酶活性的调控、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、肽基丝氨酸磷酸化、细胞对氮化合物、有机环状化合物以及无机物的反应、阳离子稳态、磷脂酰肌醇介导的信号传导等生物学过程发挥其抗肿瘤作用,涉及到的肿瘤有前列腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌、胶质瘤、慢性粒细胞白血病、小细胞肺癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、急性粒细胞白血病、肾细胞癌、大肠癌和甲状腺癌等。结论该研究从多角度探讨了白花蛇舌草—半枝莲两味中药抗肿瘤的物质基础及其作用机制,为其临床和基础研究提供新的科学依据。

白花蛇舌草和半枝莲总黄酮提取工艺优化及抗氧化性研究

探讨白花蛇舌草和半枝莲中黄酮类物质提取的优化工艺,以及最佳提取工艺条件下的黄酮类物质提取液的抗氧化性。在单因素试验基础上进行响应面试验,制定黄酮类物质提取工艺的三因素三水平响应面法试验设计方案。结果表明,获得较高总黄酮得率的最佳试验因素参数组合为:乙醇浓度74%、液固比70∶1(mL/g)、浸提时间5h。在此条件下,总黄酮得率为7.26%。该工艺所得黄酮类物质提取液对羟基自由基以及超氧离子自由基均具有较强的清除能力:当黄酮类物质提取液浓度为0.4 mg/mL时,黄酮类物质对羟基自由基的清除率达到最高,为57.16%;当黄酮类物质提取液浓度为0.3 mg/mL时,黄酮类物质对超氧阴离子自由基的清除率达到最高,为63.89%。

白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分对破骨细胞分化的抑制作用

目的研究白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分(YDW11)对破骨细胞分化的抑制作用。方法 UPLC-MS法鉴定YDW11中化学成分后,MTT法分析其对RAW264. 7细胞活力的影响。100 ng/mL核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264. 7细胞7 d以建立破骨细胞模型后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色考察TRAP阳性多核细胞数,相应试剂盒测定TRAP酶活性。QRT-PCR检测TRAP、树突状细胞-特异性跨膜蛋白(DC-STAMP)、活化T细胞核因子cl (NFATc1)基因表达,Western blotting检测核因子κB受体活化因子(RANK)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)、NFATc1、组织蛋白酶K蛋白表达,Taqman MicroRNA RT-PCR检测miR-155表达。结果 YDW11中有16种成分,鉴定出对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素、芹菜素。与模型组比较,YDW11组(25、50μg/mL)阳性多核细胞数显著减少(P<0. 01),并对细胞活力无明显影响(P> 0. 05);呈剂量依赖性地显著抑制酶活性,TRAP、DC-STAMP、NFATc1基因表达,RANK、TRAF6、NFATc1、组织蛋白酶K蛋白表达(P <0. 05),并显著提高miR-155表达(P<0. 05)。结论 YDW11可通过上调miR-155表达、下调相关基因和蛋白表达抑制RANKL诱导的破骨细胞分化。