红芪HpC4H基因的克隆及其铁盐干预下的表达分析

肉桂酸-4-羟化酶(Cinnamate-4-hydroxylase,C4H)在调节植物生长发育方面具有重要的作用。为探究红芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)黄酮类成分合成的分子调节机制,本研究以红芪幼苗为材料,通过RACE技术,克隆HpC4H基因,并进行生物信息学分析和表达模式分析。结果显示:HpC4H基因全长为1634 bp,编码477个氨基酸,蛋白分子量为54.94 kD,不含有信号肽和跨膜结构区。亚细胞定位预测显示,该蛋白定位于内质网中,具有C4H保守功能区并属于细胞色素P450超基因家族。序列分析发现,HpC4H氨基酸序列与柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii Kom.)的相似性高达92.84%。qRT-PCR结果表明,HpC4H基因在红芪不同组织中的表达模式为:根>茎>叶,同时,该基因的表达量在不同浓度铁盐干预下有上调趋势,推测铁盐可能在调控红芪HpC4H基因表达中发挥一定作用,且低浓度铁盐溶液作用显著。

多序岩黄芪化学成分研究

目的 研究多序岩黄芪的化学成分。方法 用柱色谱分离 ,用理化性质及波谱方法鉴定结构。结果 从多序岩黄芪中分离鉴定了 5个化合物 :红芪木脂素A( 1) ,异甘草素 ( 2 ) ,7 羟基 4′ 甲氧基异黄酮 ( 3) ,毛蕊异黄酮 ( 4 )和芒柄花素 ( 5 )。结论 化合物 1为新化合物 ,命名为红芪木脂素A。

红芪多糖RHG的分离纯化及化学结构

甘肃产的名贵中药材红芪（ＨｅｄｙｓａｒｕｍｐｏｌｙｂｏｔｒｙｓＨａｒｄ．Ｍａｚ）的根经热水提取，醇析、脱除蛋白质、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ２５离子交换色谱及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５柱色谱分离得一水溶性多糖ＲＨＧ。用电泳及凝胶过滤法鉴定为均一组分，系由单一葡萄糖残基构成。平均分子量１４×１０４。经甲基化、高碘酸钠氧化、Ｓｍｉｔｈ降解、ＮＭＲ和ＩＲ分析以及ＫＩＩ２反应证明其化学结构是以αＤ（１→４）葡萄糖为主链。

生长年限及坡向对红芪产量和品质的影响

为比较分析不同生长年限及不同坡向红芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)产量和主要功效成分含量,以甘肃武都产红芪为材料,采用紫外分光光度法测定其黄酮含量,采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。结果表明:生长年限及坡向对红芪产量和品质均有显著影响。半阳坡栽培条件下,1～4年内,不同生长年限红芪产量和品质也不同;其中,2年生根干重、黄酮和多糖含量分别是1年生的4.41倍、1.26倍和1.26倍,3年生根干重、黄酮和多糖含量分别是2年生的1.36倍、1.53倍和1.14倍,4年生根干重、黄酮和多糖含量分别是3年生的1.22倍、0.91倍和1.01倍。2年生栽培条件下,阳坡红芪产量、黄酮和多糖含量分别是半阳坡的1.09倍、1.26倍和1.10倍;4年生野生条件下,阳坡红芪产量、黄酮和多糖含量分别是半阳坡的1.49倍、1.30倍和1.12倍。综合分析红芪栽培的产投效益及功效价值,该地区红芪生长年限应以3年为宜,栽培地以阳坡为宜。另外,红芪产量和品质与其根径、根长具有显著相关性,在生产中,红芪根径和根长可作为其等级分级的感观性依据。

不同提取方法对红芪多糖体外抗氧化活性的影响研究

红芪多糖(HPS)是中药红芪中的主要成分。本文分别采用微波辅助、超声辅助及常规热水浸提从红芪中提取HPS,经脱蛋白、冷冻干燥后得到三种方法提取的红芪多糖HPS-M、HPS-C和HPS-H。红外光谱分析表明,HPS-M、HPS-C、HPS-H具有多糖的特征吸收峰;GPC测定结果显示,HPS-M、HPS-C、HPS-H的重均分子量分别为6.29×105、4.56×105、5.13×105,多分散性分别为3.42、3.22、2.31。HPS-H、HPS-M、HPS-C清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基及还原力测定的体外抗氧化活性实验表明,HPS-M的体外抗氧化活性要显著高于HPS-C、HPS-H,因此,未来可考虑微波辅助法作为红芪多糖提取的首选方法。

多序岩黄芪生长期不同器官中无机元素相应特征分析

目的：以不同生长期多序岩黄芪根、茎、叶、花、果实样品为研究对象,研究生长期多序岩黄芪不同器官中无机元素的变化规律。方法：采用原子吸收分光光度法测定了不同时期多序岩黄芪各器官中13种无机元素含量,并分析各元素含量在不同时期多序岩黄芪器官中的相应变化特征。结果：多序岩黄芪根、茎、叶、花、果实中均含有丰富的无机元素,各器官中无机元素含量的特征变化与季节有关。多序岩黄芪药用部位根与非药用部位茎、叶、花、果实中Fe、Cu、Ca、Mn、Zn、Mg、Cr、Co、Na、Li、Ni、K含量随月份的改变呈现规律性变化,且在不同生长期存在极大值与极小值,Cd元素未检出;6～10月份Cu、Ca含量叶〉根〉茎,而叶中Mn元素含量均高于多序岩黄芪其他器官。结论：研究结果为多序岩黄芪采收时间的选择及非药用部位价值的开发提供参考依据。

当归红芪超滤物对自然衰老大鼠抗氧化作用机制的研究

目的探讨当归红芪超滤物的抗衰老作用及其机制并比较不同分子量超滤物的作用效果。方法将42只Wistar老年雄性大鼠随机分为衰老对照组和当归红芪超滤膜提取物20万、10万、5万分子量组,给药组连续灌胃10周后,按试剂盒说明书测定血清及心肌组织中SOD、GSH-Px的活力及MDA含量水平。结果与衰老对照组相比,当归红芪超滤膜提取物20万、10万、5万分子量组的血清及心肌组织中SOD、GSH-Px活力水平不同程度提高(P<0.05),MDA水平不同程度降低(P<0.05);不同分子量组间比较,10万分子量组的SOD、GSH-Px的活性水平提高最显著(P<0.05),且MDA含量水平降低最显著(P<0.05)。结论当归红芪超滤物抗衰老的作用机制可能与提高心肌组织中的SOD、GSH-Px活力和降低MDA含量从而发挥抗氧化作用相关,其抗氧化的有效成分可能在10万分子量上下。

甘肃不同产地、不同月份红芪中4种异黄酮的含量特征研究

目的:研究甘肃红芪不同产地、不同月份中4种异黄酮成分的含量变化特征。方法:采集不同月份(7、8、9、10月)的红芪样品,采用HPLC测定样品中4种异黄酮成分的含量,并进行了作图、单因素方差及相关性分析。结果:不同月份3个产地红芪样品中4种异黄酮的量存在显著性差异(P<0.01);3个产地的红芪样品中毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷含量在7、8、9、10月份均为陇西样品>宕昌样品>武都样品,3个产地红芪样品中毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷在10月份含量最低,9~10月呈下降趋势;芒柄花素含量9~10月呈上升趋势;武都、宕昌、陇西7、8、9、10月红芪样品的特征性成分为毛蕊异黄酮葡萄糖苷。结论:不同产地红芪中4种异黄酮的含量在不同的月份存在个性差异与相关共同特征。

微波辅助提取红芪多糖

为了获得一种高效的红芪多糖的提取方法,以中药红芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz)为原料,采用微波辅助法提取红芪多糖(HPS),并利用响应面法,优化提取工艺,其最佳提取参数:提取时间45 min,微波作用功率213 W,温度80℃,液料比26∶1,提取次数为1次,在此条件下,HPS的含量可达(10.11±0.52)%;红外光谱分析表明,微波辅助提取的HPS在3 418、2 935、1 618、1 083 cm-1都有吸收峰,此为多糖特征吸收峰,表明HPS为多糖;GPC测定结果显示,HPS重均分子质量为6.29×105;体外抗氧化活性测定实验表明,HPS能够清除羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基,具有很好的抗氧化活性。

多序岩黄芪化学成分研究

目的对豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)的根进行化学成分研究。方法通过反复硅胶柱色谱分离和Sephadex LH-20色谱柱纯化,波谱法鉴定结构。结果分离得到7个已知化合物,分别为4'-甲氧基-7-羟基黄酮(Ⅰ),二十六碳酸(Ⅱ),阿魏酸十六烷醇酯(Ⅲ),羽扇豆醇(Ⅳ),3-羟基-9-甲氧基紫檀烷(Ⅴ),β-谷甾醇(Ⅵ),胡萝卜苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ首次从多序岩黄芪中分离得到。

四种补益中药的急性毒性和致突变性研究

本文对灵芝、冬虫夏草、红芪、锁阳等四种补益中药的急性毒性和致突变性进行了研究。结果表明，这四种补益中药属实际无毒类物质；对小鼠骨髓嗜多染红细胞以及雄性生殖细胞无致突变作用；红芪和锁阳提取液对鼠伤寒沙门氏菌的四个菌株均未显示出致突变性，而灵芝和冬虫夏草提取液对鼠伤寒沙门氏菌ＴＡ１００菌株表现出一定程度的致突变性，对其原因应做进一步的研究。

多序岩黄芪多酚的提取工艺研究

目的利用响应面法优化多序岩黄芪多酚的提取工艺。方法以多序岩黄芪药材粉末为原料,在单因素实验基础上,利用超声波辅助提取,考察乙醇浓度、料液比、提取功率和提取时间对多序岩黄芪中多酚提取率的影响,根据Box-Behnken实验结果,采用响应面法对多序岩黄芪多酚类工艺进行优化。结果确定最佳提取工艺参数:提取溶剂为60%乙醇、料液比为1:29(g:mL)、提取温度为55℃、超声功率为120 W和超声时间为40min。此提取条件下多序岩黄芪多酚的含量达5.127mg/g。结论该工艺具有简单可行,重复性好的优点,适用于多序岩黄芪多酚的提取。

红芪提取物对柯萨奇病毒抑制作用的研究

目的探讨红芪提取物对柯萨奇病毒(CB4V)的抑制作用。方法采用组织细胞培养法,观察人宫颈癌传代细胞(HeLa细胞)的细胞病变效应及通过抑制病毒复制指数测定反应抗病毒效果。结果红芪提取物具有抑制HeLa细胞病变的作用;抑制病毒复制指数为2.06。结论红芪提取物在细胞水平具有明显的抑制CB4V作用。

留茎高度对红芪产量和品质的影响

[目的]研究青藏高原东缘的红芪留茎高度对红芪产量和品质的影响。[方法]采用田间试验单因素随机区组法,在甘肃民族师范学院藏药材引种驯化试验基地研究了红芪留茎高度对其产量、品质的影响。[结果]红芪在7月上旬现蕾前进行剪茎,且留茎50 cm的红芪的主根根长、根径、单株根鲜重等经济性状和产量最高,且产量比CK提高了30.86%;多糖和总黄酮含量最高,药材品质最优。[结论]红芪留茎高度在50 cm左右时较为理想,能达到增产和改善药材品质的效果。

留茎高度对红芪生长和产量的影响

采用单因素随机区组法,在甘南高原地区研究了红芪剪茎高度对其生长和产量的影响。结果表明:红芪剪茎比不剪茎能极显著地提高产量,且红芪在7月下旬现蕾前进行剪茎,留茎高度50 cm的主根长、根径、单株根干物质积累、折干率、一等率等经济性状和产量最高,且比CK增产14.07%(p<0.01)。

留茎高度对红芪产量和土壤水分的影响

[目的]研究留茎高度对红芪产量和土壤水分的影响。[方法]采用单因素随机区组法,在甘南高原地区研究了红芪留茎高度对其产量和土壤水分的影响。[结果]在7月上旬现蕾前进行剪茎,且留茎50 cm的红芪的水分利用效率最高,主根长、根径、单株根鲜重等经济性状和产量最高,且产量比CK明显提高了30.86%。[结论]红芪留茎高度在50 cm左右时较为理想,既可以节水又能达到增产的效果。

留茎高度对红芪经济性状、品质和耗水规律的影响

采用单因素随机区组法,在甘南高原地区研究红芪留茎高度对其产量、品质和土壤水分的影响。结果表明,红芪在7月上旬现蕾前剪茎,且留茎50 cm水分利用效率最高,主根长、根径、单株根鲜重等经济性状和产量最高,且产量比CK提高了30.86%,差异极显著,多糖含量、总黄酮含量也最高,药材品质最优。红芪留茎高度约50 cm较为理想,既可以节水,又能达到增产和改善药材品质的效果。

留茎高度对红芪经济性状、品质和耗水规律的影响

采用单因素随机区组法,在甘南高原地区研究了红芪留茎高度对其产量、品质和土壤水分的影响。结果表明:红芪在7月上旬现蕾前进行剪茎、且留茎50 cm的水分利用效率最高,主根长、根径、单株根鲜重等经济性状和产量最高,且产量比对照极显著提高了30.86%,多糖含量、总黄酮含量最高,药材品质最优。因此红芪留茎高度在50 cm左右时较为理想,既可以节水又能达到增产和改善药材品质的效果。

多序岩黄芪化学成分研究(Ⅳ)

目的研究多序岩黄芪(Hedysarum polybotrysHand.-M azz.)的化学成分。方法用柱色谱分离,用理化性质及波谱方法鉴定结构。结果从多序岩黄芪中分离鉴定了3个化合物:(1)白桦脂酸,(2)二十六碳酸,(3)蔗糖。结论化合物1和2为首次从该植物中分离得到。

红芪愈伤组织中黄酮代谢途径的探讨

在红氏供试材料中苯丙氨酸转氨酶活性在分化愈伤组织中最高，但游离苯氨丙酸含量在分化愈伤组织中并无明显降低，说明游离氨基酸的积累主要来自蛋白质的分解。黄酮含量的变化以褐化愈伤组织中含量最高，因此我们推测：黄酮合成的最后几步，可能发生在褐化愈伤组织中，从可溶性蛋白质的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ平板电泳结果表明，分化愈伤组织与褐化愈伤组织相比蛋白质谱带发生了明显的变化，这可能与控制黄酮合成的有关酶的活性变化有关。