WHS_3菌株产几丁质酶对棉铃虫HaSNPV的增效作用

WHS3 (Serratiamarcescens)菌是一株几丁质酶的高产菌株 ,在诱导培养基中几丁质酶的产量可达84 .4 μg/mL。通过对中国棉铃虫进行的生物测定表明 :WHS3 菌所产的几丁质酶 (A3 )能有效地提高HaSNPV的毒力 2 0 %～ 70 % ,LT50 、LT90 比对照组缩短天数最高可达 1.1d、1.3d。

棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HaSNPV)Hind III-L片段的序列分析

本文报道了棉铃虫单核衣壳核多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasingle nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组的HindIII L片段的全序列。该片段全长 2 6 35bp ,包括 5个有意义的开放阅读框 :HaSNPVORF2 2 7,晚期表达因子 10基因 (lef10 ) ,vp10 5 4基因 ,Ac5 5 (AcMNPVORF5 5的同源基因 ) ,Ac5 6 (AcMNPVORF5 6的同源基因 )。与其它 6种杆状病毒的氨基酸序列比较表明 ,HaSNPV的lef10基因与甜菜夜蛾核型多角体病毒 (SeMNPV)的同源性最高 ,为6 4 % ,与冷杉毒蛾核型多角体病毒 (OpMNPV)的同源性最低 ,为 4 3% ;HaSNPV的vp10 5 4基因与SeMNPV的同源性最高 ,为 6 5 % ,与OpMNPV的同源性最低 ,为 4 9%。序列比较表明 ,HaSNPV的LEF10与VP10 5 4蛋白与其它 6种杆状病毒具有相同的保守区和亮氨酸拉链 (leucinezipper)

中国棉铃虫单粒包埋核多角体病毒(HaSNPV)HindⅢ-Ⅰ片段的序列分析与基因排列研究

对中国棉铃虫单粒包埋核多角体病毒 (HaSNPV)基因组中的HindⅢ Ⅰ片段的序列进行分析 ,该片段全长75 0 1nt,包括 10个开放阅读框 :AcMNPVORF111的同源基因 (Ac111) ,晚期表达因子 2 (lef 2 )基因 ,病毒核壳结构蛋白 p2 4基因、gp16 基因、多角体包膜蛋白 (polyhedronenvelopeprotein ,pep)基因、AcMNPVORF6 3的同源基因(Ac6 3) ,38 7kD基因 ,晚期表达因子 1(lef 1) 基因 ,及两个特有基因HaSNPV orf5 91和HaSNPV orf435。基因组的排列比较分析发现与AcMNPV有较大区别。

SeMNPV抑制HaSNPV诱导的Se-UCR细胞凋亡

在采用共感染和共转染的方法构建扩大杀虫范围的重组病毒的研究过程中发现棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,HaSNPV)能诱导甜菜夜蛾细胞Se-UCR发生典型凋亡,但不能诱导另一株甜菜夜蛾细胞Se-301产生凋亡。以5 MOI的HaSNPV感染Se-UCR,在12h左右可以观测到少量细胞凋亡,24h能观察到明显的凋亡,凋亡细胞数量随时间不断增加,到72h基本上所有的细胞均发生凋亡,成为凋亡小体,基因组DNA片段化。同时发现HaSNPV诱导的甜菜夜蛾Se-UCR细胞凋亡能够被甜菜夜蛾多核衣壳核多角体病毒(Spodoptera exigua multicapsid nucleoplyhedrovirus,SeMNPV)所抑制,进一步点杂交试验发现SeMNPV和HaSNPV共同感染Se-UCR获得了HaSNPV在该细胞中的复制。

棉铃虫单核衣壳核多角体病毒解螺旋酶基因的序列分析

对棉铃虫单核衣壳核多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasingle -nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中EcoRI N片段进行序列分析 ,获得了完整的解螺旋酶基因 (hel) ,其开放阅读框大小为 376 2bp ,编码一个分子量为 14 6kD的蛋白质。在hel起始密码子ATG上游 5 0位有强晚期启动子转录起始信号ATAAG ,在 112位和 189位存在两个TATAbox ,但未发现早期转录信号CAGT。其在终止密码子下游第 12位有一PolyA终止信号AATAAA。在其它真核或原核解螺旋酶中存在的 7个保守基元 (I、Ia、II、III、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ) ,只有 5个 (I、Ia、II、III、Ⅳ)在杆状病毒中保守同源性比较发现 ,HaSNPV解螺旋酶的氨基酸序列与甜菜夜蛾核多角体病毒 (SpodopteraexigueMNPV ,SeMNPV)的解螺旋酶具有最高的同源性 (6 6 % ) ,与Xestiac nigrum颗粒体病毒 (XcGV)解螺旋酶的同源性最低 (43% )。