全基因表达谱分析维甲酸对大鼠肝纤维化的影响

目的探讨维甲酸对胆管结扎肝纤维化模型大鼠肝脏组织全基因表达谱的影响。方法应用维甲酸给予胆管结扎大鼠模型,用大鼠全基因芯片分析肝组织基因表达谱,并进行通路分析,实时定量PCR和Western blot分析与验证肝纤维化相关基因的表达变化。结果全基因组芯片分析表明:共有491个基因同时在模型组和维甲酸组中发生变化,该变化与细胞黏附、整合素等信号通路有关,并影响药物代谢,视黄醇代谢,淀粉、蔗糖和半乳糖代谢,脂代谢的相关信号通路。实时定量PCR检测结果显示,与模型组相比,维甲酸能抑制肝脏组织中肝纤维化相关基因(Col1a1和TGF-β)的mRNA水平,降低肝纤维化相关蛋白(TGF-β、α-SMA)的表达。结论维甲酸可以有效改善胆管结扎大鼠模型的肝纤维化的程度,逆转胆管结扎造成的基因表达变化,其中包括下调多种肝纤维化基因,从而发挥抗纤维化的作用。

Hem-o-lok结扎夹在Ⅱ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌手术中的应用

目的比较使用Hem-o-lok结扎夹与传统结扎技术在Ⅱ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌手术中的效果,分析结扎夹的优越性。方法随机将20例Ⅱ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌需行近端胃切除术的患者分成两组,第一组术中使用Hem-o-lok结扎夹闭胃周血管,第二组使用传统结扎技术,比较两组间离断胃周血管时间及术中出血量。结果两组手术均成功,第一组离断胃周血管时间及术中出血量分别为(15.20±1.22)min和(0.50±0.85)ml,均小于第二组的(24.60±1.50)min和(2.20±1.48)ml(P<0.05)。结论Ⅱ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌行近端胃切除术时,使用Hem-o-lok结扎夹在离断胃周血管时间及术中出血量方面优于传统结扎技术。

乌司他丁对脓毒症大鼠心组织基因表达的影响

目的：基因水平上研究乌司他丁（Ulinastatin，UTI）的预防性应用对脓毒症晚期（24h）大鼠心脏组织基因表达的调控。方法：采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation puncture，CLP）制备脓毒症模型。Wistar大鼠30只．随机分为UTI组和对照组，每组15只，透射电镜观察术后24h心脏组织病理学改变，采用含有22523个大鼠基因cDNA克隆的表达谱基因芯片进行检测并分析术前1h预防性应用乌司他丁的脓毒症晚期大鼠心脏组织的基因表达，并以计算机软件筛选出差异表达的基因。结果：UTI组心脏组织病理学改变有所减轻。在22523条基因中，有差异表达的基因202条，下调基因主要涉及细胞信号转导、物质能量代谢、免疫反应、胰岛素样生长因子、细胞骨架蛋白、离子通道等，上调基因主要涉及细胞信号转导、物质能量代谢、应激反应、免疫反应、趋化因子、离子通道、癌基因等。结论：UTI减轻脓毒症晚期大鼠心脏的组织损害，具有一定的心脏保护效应．其机制可能涉及细胞信号转导、物质能量代谢、趋化因子、胰岛素样生长因子，凋亡等多方面。

脓毒症大鼠肝脏组织中免疫相关基因表达的改变

目的观察脓毒症大鼠肝脏组织中免疫相关基因表达的改变。方法将120只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组30只、模型组90只,模型组根据选模后不同时间点(24、48、72 h)随机分为3个亚组各30只。通过盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症大鼠模型,应用含有28 000个大鼠基因cDNA克隆的基因芯片,检测脓毒症大鼠肝组织在CLP后各个时点的免疫相关基因表达变化并筛选出差异基因。结果造模24 h,筛选出差异基因671条,免疫相关基因97条(表达上调48条、下调49条);造模48 h,筛选出差异基因133条,免疫相关基因36条(表达上调13条、下调23条);造模72 h,筛选出差异基因204条,免疫相关基因33条(表达上调18条、下调15条)。3个时间点重复基因共58条,免疫相关基因15条(表达上调4条、下调10条、先上调后下调1条)。结论脓毒症大鼠肝组织中,一系列与细胞防御及免疫功能相关的基因表达出现显著改变,它们可能在不同程度上参与了脓毒症大鼠肝损伤的病理生理过程。

多重连接探针扩增技术及其应用

多重连接探针扩增是一种建立在PCR技术上的新型相对定量检测技术，该技术具有高效率、高分辨率、操作简便、设备要求低等诸多优势，目前已被广泛应用于基因片段缺失与重复、点突变及甲基化检测等相关疾病的分子生物学研究。其与基因芯片结合而建立的多重连接探针扩增微阵列芯片技术不但真正具备了高通量的检测能力，还使该技术的可靠性获得了很大的提高。本文就多重连接探针扩增的技术方法、应用进展及目前还存在的局限性作一综述。

表没食子儿茶素没食子酸酯对胆汁淤积性大鼠全基因表达谱的影响

目的:利用大鼠全基因组芯片检测表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对胆管结扎肝纤维化大鼠基因表达的影响并进行评价和研究。方法:使用胆管结扎的方法造胆汁淤积型的肝纤维化大鼠模型,并提取假手术组、模型组和给药组大鼠肝脏的总RNA,用大鼠全基因组芯片法分析其基因组表达谱的变化。结果:基因芯片结果显示,有626个基因同时在EGCG给药组与模型组发生变化,其中327个基因下调,299个基因上调。EGCG逆转了很多基因的表达变化,其中包括胆汁代谢通路、脂代谢、糖代谢等多种代谢相关通路、免疫相关通路等。此外,EGCG还影响多条肝纤维化相关的信号通路中相关基因的变化。结论:EGCG对胆汁淤积型肝纤维化大鼠模型的肝纤维化有抑制作用,该作用可能是通过调节多个肝纤维化相关的信号通路来发挥的。