组织特异miRNA在小鼠造血体系细胞终末分化中的表达和意义

目的鉴定小鼠造血体系发育过程中特异性表达的mi RNAs,探讨其调控细胞终末分化的分子机制。方法 PMA诱导HL-60分化为巨噬细胞样细胞,Cayman吞噬作用检测试剂盒结合荧光显微镜显影检测诱导后细胞的吞噬作用,Real-time PCR检测巨噬细胞分化指标CD 11 b、CD 4以及mi R-155的表达。结果成功建立使用PMA诱导人前髓性白血病细胞HL-60分化为巨噬细胞样细胞模型,并发现组织特异性mi R-155随着巨噬细胞分化表达水平逐渐上调。结论造血体系特异mi R-155参与调控巨噬细胞终末分化,揭示组织特异性mi RNAs调控小鼠组织细胞分化和组织发育的普遍意义。

造血系统特异性miR-155通过靶向CUX1参与小鼠巨噬细胞终末分化

目的筛选靶向CUX1的造血系统特异性mi RNAs,探讨其调控巨噬细胞终末分化的分子机制。方法双荧光报告检测筛选靶向CUX1的造血作用相关mi RNAs,Real-time PCR检测巨噬细胞分化过程中mi R-155和CUX1 m RNA表达,免疫印迹检测CUX1蛋白表达水平。结果双荧光报告检测筛选到5个脾脏和胸腺特异或富集mi RNAs在CUX1 3’UTR上有作用位点,进一步在PMA诱导HL-60分化为巨噬细胞样细胞模型中发现,mi R-155随着巨噬细胞分化表达水平逐渐上调,与之相反CUX1蛋白和m RNA表达水平逐渐下调,且mi R-155能直接调控CUX1蛋白水平。结论造血系统特异mi R-155通过转录后调控CUX1蛋白表达参与巨噬细胞终末分化。