脊髓半切伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

目的 :研究脊髓半切伤 (hSCI)后脊髓远端组织星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)表达的意义 ,并探讨反应性胶质化在脊髓半切伤中的作用。方法 :SD大鼠 2 5只 ,随机分为 5组 (n =5 )正常对照组、伤后 1、4、7、14d组 ,用免疫组化及图像分析方法观察星形胶质细胞中GFAP的表达 ;用大鼠综合性为评分 (CBS)方法对各组评分。结果 :hSCI后远端星形胶质细胞GFAP表达比对照组明显增高 (P <0 .0 1) ;1～ 14d呈进行性增高 ,损伤各组CBS1～ 14d呈降低趋势 ,两指标有显著相关性 (r =-0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :hSCI后星形胶质细胞通过其反应形胶质化对脊髓再生和修复其重要作用。

脊髓半切伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

目的:研究脊髓半切伤(hSCI)后脊髓远端组织星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的意义,并探讨反应性胶质化在脊髓半切伤中的作用。方法:SD大鼠25只,随机分为5组(n=5),正常对照组、脊髓半切伤后1d、4d、7d和14d组。用免疫组化及图像分析方法观察星形胶质细胞中GFAP的表达;用大鼠综合行为评分(CBS)对各组评分。结果:hSCI后远端星形胶质细胞GFAP表达比对照组明显增高(P<0.01);1～14d呈进行性增高,损伤各组CBS1～14d呈降低趋势,两指标有显著性相关性(r=-0.05,P<0.01)。结论:hSCI后星形胶质细胞通过其反应性胶质化对脊髓再生和修复起重要作用。

小鼠脊髓损伤半切模型的建立及评价

目的建立一种稳定可靠、重复性强的脊髓损伤半切动物模型,模拟人类脊髓半切伤,为后期脊髓损伤的治疗研究提供可靠的动物模型。方法 60只健康昆明小鼠随机分为手术组和假手术组。实验小鼠麻醉后俯卧位固定,以T10胸椎棘突为中心,暴露T9~11棘突和椎板;在体式显微镜下,咬除T10棘突及椎板,暴露该阶段脊髓;用虹膜剪尖端将脊髓半切至脊髓后正中静脉右缘。于造模后1d、3d、5d、1w、2w、3w,采用双盲BMS评分法,评价各组小鼠后肢运动功能。并取损伤局部脊髓组织进行结晶紫染色、Caspase3免疫组织化学染色及超微结构检测,以观察脊髓损伤后的组织学变化。结果手术组实验动物均表现出损伤侧后肢瘫痪,BMS评分低于7分;脊髓损伤局部形态学观察显示该方法能很好地实现脊髓半横切。结论小鼠T10脊髓损伤半切模型建立成功,死亡率低,可重复性强。

“两步法”体外培养山羊卵母细胞的超微结构观察

有假说认为,卵母细胞在体外培养过程中,如果延长GV期,可促进卵母细胞进一步成熟,因而提高发育潜能。采用山羊半卵泡和卵母细胞共培养,抑制卵母细胞GVBD发生,从而延长GV期。比较了共培养前后和恢复成熟培养后卵母细胞的超微结构变化,其目的从亚细胞水平寻找卵母细胞进一步成熟的证据。研究发现,常规成熟培养:有卵周隙存在,但不贯通,局部区域卵膜与透明带结合紧密;部分皮质区尚有细胞器存在;微绒毛大部分从透明带中撤出,倒伏于质膜表面,数量较多,形态较为粗大;皮层颗粒质膜下部分单层分布,部分散布于皮质区;线粒体均匀散布于卵质中央区。共培养前:卵母细胞的卵周隙尚未形成,微绒毛没有从透明带中撤出;线粒体等细胞器分布于皮质区,皮层颗粒成簇状分布,皮质区富含细胞器。共培养后:局部形成卵周隙,微绒毛已自透明带中撤出,数量较多,垂直或倒伏于卵膜表面;线粒体以簇状分批开始内移,皮层颗粒已部分单层分布于质膜下,部分皮质区缺乏细胞器。恢复成熟培养后:卵周隙进一步扩大并且贯通,微绒毛数量减少并且绝大多数垂直于卵膜;线粒体在卵质中央区均匀分布,皮层颗粒卵膜下单层分布,大部分皮质区无细胞器存在。利用“两步法”培养得到的卵母细胞与体外常规成熟培养的卵母细胞相比,更有利于皮层颗粒的质膜下单层分布,卵母细胞卵周隙的形成与贯通,微绒毛数量减少和垂直于卵膜表面,无细胞器皮层区的进一步形成。因此,更有利于卵母细胞胞质的进一步成熟。

牙半切术治疗重度根分叉病变的临床跟踪研究

目的 :探讨牙半切术在治疗下颌磨牙重度根分叉病变前后各项客观指标的变化 ,为该治疗方法的进一步应用提供依据。方法 :将 2 8个根分叉病变较为严重的下颌磨牙作为样本 ,进行牙半切术 ,保留相对较好的牙根。分别于术后 6、12、2 4个月对保留的牙根及其牙周指标 (PD、GI、SBI、PLI、PAL)进行测评。结果 :术后 2 8例患牙健侧根牙龈指数 (GI)和牙龈出血指数 (SBI) ,术后 6个月与术前相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,术后 6月与术后 12、2 4个月比较 ,牙周袋深度 (PD)有高度显著性差异 (P <0 .0 1) ,其余指标均无显著性差异 ,所保留的半切牙与对照组单根牙相比 ,PD、X线附着丧失有高度显著性差异 (P <0 .0 1)。结论

简易切割法制作健康SD成年大鼠hSCI和tSCI模型

用简易切割法制作hSCI和tSCI模型 .4 5只SD大鼠随机分为 3组 :ISC组 6只 ,hSCI组 18只 ,tSCI组 2 1只 .用显微剪在T13～L1间横向完全剪断脊髓或其一侧 1/2 ,制成tSCI和hSCI模型 .术后动态行为观察和神经功能综合评分 (CBS) ,并分别于术后 2 4h ,7d和 2 1d取T11～L3节段脊髓作冰冻切片苏木精染色观察 .结果显示 ,3组间CBS两两比较经q检验均有显著性差异 (P <0 0 1) .病理改变 ,hSCI组主要是伤侧灰质缩小 ,空泡大量出现而神经元减少且明显皱缩 ,腹角为甚 ,对侧也有类似表现且下节段较上节段严重 ;tSCI组与hSCI组伤侧相似 ,但Waller’s溃变上节段较下节段严重 .上述结果与人类SCI相似 .提示本法可作为hSCI和tSCI模型 ,具有可靠性和简便实用性 .

骨髓单个核细胞移植对脊髓半横断大鼠损伤组织中髓鞘碱性蛋白表达的影响

目的:研究骨髓单个细胞移植脊髓半横断大鼠脊髓损伤区域后髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达的影响。方法:取Wistar大鼠胫骨及股骨提取骨髓单个核细胞,采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,制成细胞悬液。建立大鼠脊髓右半横断模型,造模后分为假手术组、模型组、骨髓单个核细胞移植组。于模型建立成功后7d,14d,21d,28d手术的大鼠进行BBB评分从而评估损伤脊髓神经功能恢复情况,利用RT-PCR观察MBP mRNA的表达变化。结果:术后各时间点假手术组BBB评分均明显高于骨髓单个核细胞移植组、模型组(P<0.05);术后随时间延长骨髓单个核细胞移植组、模型组BBB评分逐渐增加,14、21、28d时骨髓单个核细胞移植组BBB评分明显优于模型组(P<0.05)。PT-PCR测试各时间点骨髓单个核细胞移植组和模型组大鼠脊髓中MBP mRNA的表达量高于假手术组,且骨髓单个核细胞移植组高于模型组(P<0.05)。结论:骨髓单个细胞移植可提高脊髓组织中MBP的表达,有助于大鼠半横断脊髓损伤神经功能的恢复。

脊髓半切伤神经细胞凋亡的实验研究

目的 探讨细胞凋亡在脊髓半切损伤发病机理中的作用。方法 采用原位末端标记法 ,对大鼠半切伤的不同时间的凋亡细胞数目和部位进行观察分析 ,并作正常对照。结果 半切后的灰质和白质均有细胞凋亡 ,神经元凋亡后形成空泡 ,胶原细胞凋亡多见。细胞凋亡发生在损伤后12 h,7d达高峰 ,至 5周趋于正常。结论 大鼠脊髓半切伤后神经元和胶质细胞均发生凋亡 ,而胶质细胞凋亡常见。

大鼠脊髓不同平面双侧半横切损伤模型的建立及评价

目的建立一种新型大鼠脊髓切割损伤模型,为临床脊髓不同平面损伤研究提供适宜的动物模型。方法45只SD大鼠随机分为脊髓不同平面双侧半横切组（A组,n=15）、脊髓全横切组（B组,n=15）和假手术组（C组,n=15）。术后观察、记录各组大鼠活动、进食水、排尿排便、切口感染等并发症和死亡情况,采用BBB运动功能评分和斜板试验评价大鼠行为学功能。结果术后A组大鼠活动、进食水量减少,53.33%大鼠出现尿潴留,40.00%大鼠于术后1～4周死亡;B组大鼠活动、进食水量明显减少,66.67%大鼠出现尿潴留,60.00%大鼠于术后1～4周死亡;C组大鼠活动、进食水量无明显变化,无并发症及死亡发生。BBB运动功能评分及斜板维持最大角度值检测显示,A、B组均低于C组（P〈0.05）,而这些评价指标在A组和B组之间无显著差异。结论脊髓不同平面双侧半横切损伤模型大鼠尿潴留及死亡率低,行为学评价与脊髓全横切损伤模型类似,适于脊髓不同平面双侧损伤修复的研究。

分段潜行移植胸锁乳突肌双头单蒂肌瓣修复半侧颜面萎缩临床疗效分析

目的探讨分段潜行移植胸锁乳突肌胸骨头及锁骨头双头单蒂肌瓣对半侧颜面萎缩的修复效果。方法我科采用分段潜行移植胸锁乳突肌双头带蒂肌瓣修复5例半侧颜面萎缩患者,观察术后伤口愈合及颈部功能情况,术后随访半年以上。结果 5例移植肌瓣存活良好,颜面部萎缩畸形均得到良好矫正,颈部功能活动无异常。结论通过分段潜行胸锁乳突肌胸骨头及锁骨头双头带蒂肌瓣移位术,既达到了半侧颜面萎缩凹陷畸形的有效整复,又不会影响颈部外观及功能,明显改善患者生存质量,符合功能外科修复的发展要求,是一种临床应用效果比较理想的方法,值得推广。

半牙切除结合单冠修复保存下颌第一磨牙的临床疗效观察

目的观察病变下颌第一磨牙行半牙切除术后结合单冠修复的疗效。方法选择下颌第一磨牙部分牙根有严重的牙周或根尖周病变,或牙冠龋坏达龈下难以进行根管治疗,或牙根根折的患牙,应用半牙切除术后对保留下来的牙根进行根管治疗并做单冠修复。结果 1年后复查,成功率92%。结论半牙切除术结合单冠修复保留了健康的牙根,避免或减少了对正常牙体组织的切磨,既有效地恢复了牙列的完整,又恢复了患者的咀嚼功能,是保存病变下颌第一磨牙的一种有效方法。

下颌第二磨牙半切术后固定修复的三维有限元分析

目的探讨下颌第二磨牙半切术后不同修复方式对基牙受力的影响,为临床修复设计提供依据。方法用三维有限元分析方法,分别模拟7近中根拔除、远中根保留和远中根拔除、近中根保留后固定桥修复,同时建立76联冠修复和7缺失单基牙固定桥修复作为对照,比较载荷状态下基牙的受力状况。结果保留7远中根、固定修复6与正常情况下受力趋势相似,应力值较大;保留7近中根、单端固定桥修复6应力明显增大且峰值出现部位由颈部转移到根尖,但较7缺失、以6为基牙的单端固定桥受力合理。结论保留下颌第二磨牙远中根较保留近中根与第一磨牙联合修复后基牙受力合理;只要选择好适应症,保留近中根也是避免下颌第二磨牙缺失的一种方法。