温度对管角螺Hemifusus tuba(Gmelin)胚胎发育的影响

在pH8．1～8．3、盐度27．5～29．5的条件下，进行了不同温度对管角螺Hemifusus tuba（Gmelin）胚胎发育影响的试验。结果表明，管角螺的卵子在发育过程中分为正常卵和败育卵；其胚胎发育过程属直接发生型；孵化率达80％以上的海水温度范围为22．1～31．2℃；正常发育的胚胎5～9d能完全消耗卵囊内的败育卵并变为自身发育的营养物质，12～18d形成稚螺雏形，29～38d胚胎完成发育，形成稚螺。

管角螺Hemifusus tuba(Gmelin)稚贝在不同盐度下的生长和存活研究

在水温28.6—29.5℃、pH8.2条件下,研究了管角螺Hemifusus tuba稚贝[(壳高19.5±1.23)mm、体重(661.4±48.6)mg]在不同盐度下的生长和存活,并用二点法计算出最适宜存活和生长的盐度范围。结果表明,管角螺稚贝适宜存活盐度和最适存活盐度分别为17.7‰—40.8‰和25.1‰—35.9‰,适宜生长盐度和最适生长盐度分别为17.5‰—39.9‰和27.8‰—33.2‰。在最适生长盐度范围内,稚贝壳高日平均增长率为0.358—0.397mm.d 1,体重日平均增长率为44.64—49.09mg.d 1。超出上述范围,其存活率下降、生长率降低。稚贝在盐度17.0‰和41.3‰的海水中适应20d后再分别移至盐度14.0‰和45.0‰的海水中,72 h后存活率分别为84.0%和96.0%,而直接把生活在盐度为30.5‰中的稚贝放入到盐度为14.0‰和45.0‰的海水,72h后其存活率为8.0%和0,可见稚贝对盐度的适应能力与原生活海水盐度有关,经过驯化后的稚贝能够扩大对盐度的适应范围,提高对盐度的耐受力。

温度对管角螺Hemifusus tuba(Gelin)耗氧率和排氨率的影响

设置5个温度梯度(14、19、24、29、34℃),海水盐度为32,研究温度和规格对管角螺Hemifusustuba(Gelin)耗氧率和排氨率的影响。结果表明:14～29℃范围内,管角螺耗氧率随温度的升高,29℃时达到最大值;14～34℃范围内,排氨率随温度的升高而增加。在相同温度下,耗氧率和排氨率随单位软体部干重的增加而下降,管角螺软体部干重(W)与单位体重耗氧率(OR)、排氨率(NR)之间的关系分别符合幂函数方程OR=aW-b、NR=cW-d,W与OR、NR呈负相关关系。

盐度及规格对管角螺耗氧率和排氨率的影响

海水温度28℃的条件下,实验室中研究了不同盐度(12,17,22,27,32)对管角螺(Hemifusus tuba Gmelin)耗氧率和排氨率的影响。实验结果表明:盐度、个体大小对管角螺的耗氧率和排氨率均有显著的影响。盐度为12～27时,单位体质量管角螺耗氧率随着盐度的升高而增加,并在27时达到最大值;盐度为27～32时,随着盐度的升高管角螺的耗氧率降低。管角螺的软体部干质量与单位体质量耗氧率之间的关系符合幂函数方程,呈负相关关系;盐度范围在12～27时,单位体质量的管角螺排氨率随着盐度的升高而增加,并在27时达到最大;盐度为27～32时,随着盐度的升高管角螺的排氨率降低。管角螺的软体部干质量与单位体质量排氨率之间的关系也符合幂函数方程,呈负相关关系。不同规格管角螺的耗氧率、排氨率及O:N值随着盐度的升高而逐渐增大,并在27达到最大值,然后随着盐度的升高逐渐减少。

不同饵料对管角螺生长、肝脏消化酶活性及软体部营养成分的影响

以缢蛏(Sinonovacula constricta)(A)、菲律宾蛤(Venerupis Philippinaram)仔(B)及自制配合饲料(C)作为饵料,分别研究了上述3种饵料对二龄管角螺(Hemifusus tuba Gmelin)生长、肝脏消化酶活性以及软体部营养成分的影响。结果表明:(1)鲜活饵料的投喂更有利于管角螺的生长和营养物质的累积,配合饲料的摄食效果较差,还需进一步的优化和完善;其特定生长率大小为:缢蛏组>菲律宾蛤仔组>配合饲料组,组间差异显著(P<0.05);(2)不同饵料的投喂对其肝脏消化酶活性的影响差异显著,在整个实验区间的胰蛋白酶活力的大小为:缢蛏组>菲律宾蛤仔组>配合饲料组,组间差异显著(P<0.05);配合饲料组的淀粉酶活力和脂肪酶活力先降后升,鲜活饵料组则较稳定;45 d后配合饲料组的淀粉酶活力和脂肪酶活力皆显著高于鲜活饵料组的(P<0.05);表明管角螺在饥饿时,消化酶可能存在补偿性分泌,优先利用糖原和脂肪作为能源物质;(3)不同饵料对管角螺软体部的灰分和水分没有显著影响(P>0.05),鲜活饵料组的粗蛋白和粗脂肪含量皆显著高于配合饲料组(P<0.05)。

盐度对管角螺胚胎发育的影响

在水温25.5-29.2℃的条件下,设11个盐度梯度对管角螺[Hemifusus tuba（Gmelin）]的胚胎发育进行了观察和研究。结果显示：管角螺胚胎发育的适宜盐度范围为22-35,最适盐度范围为25-31;在适宜的盐度范围内,7-9 d发育的胚胎能完全消耗卵囊内的败育卵变为自身发育的营养物质,13-15 d形成稚螺雏形,31-34 d胚胎完成发育从卵囊内爬出;适宜盐度范围内各盐度对正常卵发育数量、孵化率无显著影响。低于其适宜盐度范围,胚胎发育在初始阶段便受抑制,盐度为16-19只有部分正常卵发育,需34-36 d才完成胚胎发育;高于适宜盐度范围的38、41两组,在6 d内对胚胎发育无影响,但6 d后影响显著。低盐度对胚胎发育影响较高盐度更为明显。

管角螺肌肉中性糖蛋白的化学组成及抗肿瘤活性研究

目的:研究海洋软体动物管角螺Hemifusustuba(Gmelin)肌肉中糖蛋白的化学组成、理化性质及抗肿瘤活性.方法:管角螺肌肉用盐水浸提,水提取液再经DEAE-cellulose、Sephadex G-100柱层析分离,冷冻干燥得到1种中性糖蛋白(Neutral Glycoprotein of H.tuba,NGH)和3种酸性糖蛋白(Acidic Glycoprotein ofH.tuba,AGH);HPLC对NGH进行了纯度检测及相对分子质量测定,改良的苯酚-浓硫酸和Folin酚法测总糖、总蛋白质的含量,气相色谱法测定糖组成,IR和NMR法确定糖苷键类型.结果:NGH为均一性组分,相对分子质量为7.66×105,其总糖含量为89.6%,蛋白质含量为7.2%;糖组成分析表明:糖链部分主要由半乳糖及少量的甘露糖和葡萄糖组成,其物质的量比为23.5:2.6:1.0;IR及1HNMR谱分析表明:其单糖残基为α-吡喃构型.初步药理实验表明:NGH对小鼠S180肿瘤具有显著的抑制作用.

华南沿海5种养殖贝类营养成分的比较分析

对华南沿海养殖的方斑东风螺、近江牡蛎、波纹巴非蛤、管角螺和九孔鲍软体部的常规营养成分、氨基酸、脂肪酸和矿物元素含量进行了比较研究。结果表明:小规格东风螺[平均体重(6.62±0.23)g]的粗蛋白质含量高于大规格东风螺[平均体重(29.74±3.26)g]和其他几种贝类;波纹巴非蛤软体部所含氨基酸总量和人体必需氨基酸的总量(未包括色氨酸)最高;呈味氨基酸含量以管角螺最高;方斑东风螺支/芳比和多不饱和脂肪酸含量最高。5种贝类软体部常量元素含量差异不大,微量元素含量差异较大。

中国沿海管角螺4个自然群体形态差异的比较

运用多变量形态度量学方法,采用7个形态性状对中国北海、温州、湛江、连云港4个管角螺自然群体的形态变异进行分析研究。聚类分析和主成分分析结果表明,北海群体与湛江群体形态最为接近,而温州群体与连云港群体形态差异较大。主成分分析构建了4个主成分,其贡献率：主成分1为42.74%,主成分2为18.23%,主成分3为15.83%,主成分4为11.83%,累计贡献率为88.63%。建立了4个管角螺群体的判别函数,其判别准确率P1为81.3%-95.6%,判别准确率P2为75.0%-93.3%,综合判别率为87.3%。3种多元分析结果均认为,4个群体在形态上有一定程度的差异,与地理分布、环境、气候、生物饵料等因子有关,但差异尚未达到亚种水平。

管角螺的繁殖生物学

研究了管角螺（Hemifusus tuba Gmelin）繁殖方式、繁殖季节、繁殖力、孵化及稚、幼螺发育过程。研究结果表明，管角螺在广西沿海每年只有一个繁殖期（4—5月，水温24～28℃）。管角螺的整个胚胎发育阶段都在卵囊内进行，属直接发生型，出膜后即为稚螺，其繁育过程没有自由生活的浮游幼虫阶段。繁殖期内亲螺有多次交尾现象，平均每个雌螺产卵2．1次，产卵囊20．4个，每个卵囊平均含有卵子2115粒，个体繁殖力4．3万粒。水温24～29℃时稚螺孵出时间为29～30d，孵化率98％。90d后发育为5．0cm的幼螺。

管角螺窒息点及昼夜代谢规律

在水温(22±0.5)℃下,按管角螺壳高设置S[(6.48±0.46)cm]、M[(7.59±0.41)cm]和L[(9.08±0.37)cm]3组,研究了管角螺的窒息点及其昼夜代谢规律.结果表明:1)当水中的溶解氧(DO)含量大于临界值4.37mg·mL-1时,管角螺的耗氧率为1.81mg·g-1.h-1,并处于相对稳定状态;DO低于此值,耗氧率随DO的下降而降低,0.43mg·mL-1的DO为管角螺的窒息点(耗氧率为0);2)管角螺的标准代谢(SM)和常规代谢(RM)随体质量的增加而降低,不同壳高处理组昼夜变化规律相同,即夜间代谢强于白天,但不同处理组SM(F=36.263,P<0.01)和RM(F=6.788,P<0.01)差异均极显著;S、M和L组特殊动力代谢的峰值分别为2.11、1.62和1.42mg·g-1.h-1,分别为其SM的2.09、1.75和1.71倍,持续时间均为15h;S、M和L组分别在食后24、24和27h达到排氨率的高峰,峰值分别为3.94、2.64和1.71μmol.g-1.h-1,分别为其饥饿状态下排氨率的1.87、1.73和1.31倍.

管角螺对几种环境因子的耐受性试验

试验结果表明,管角螺幼螺生存温度为6－32℃,适宜温度20－30℃。管角螺对低盐具有较强的耐受力,适应盐度为13.0－39.0;生存pH为6.2－10.4,并具有较强的耐干露能力。气温28－30℃,壳高10.0 mm的幼螺干露12 h无死亡,干露24 h和36 h的死亡率分别为75%和100%。幼螺营底栖生活,底质条件对管角螺的个体成活率无明显影响。饵料以双壳贝类为主,对贝肉、鱼虾肉糜具明显的趋食性。

不同温度、底质和饵料对管角螺孵化和稚、幼螺生长的影响

通过单因子试验,研究了不同温度、底质和饵料对管角螺Hemifusus tuba孵化和稚、幼螺生长的影响。温度试验结果表明,29℃组卵囊平均出稚螺数为15.07ind.卵囊-1,显著高于23℃组(13.3ind.卵囊-1)和26℃组(12.87ind.卵囊-1);29℃组孵化时间为30d,26℃组为40d,23℃组为35d;23℃组最后存活率达到66.7%,29℃组只有36.37%;26℃组初孵稚螺的壳高为6.33±0.34mm,显著高于23℃和29℃组,但经培养后,23℃和26℃组的幼螺壳高无显著差异,分别为17.59±2.22和16.66±1.80mm,综合考虑23℃为较适孵化温度。底质试验结果表明,初孵稚螺无底质培养比泥底质培养佳,幼螺沙底质培养比无底质培养佳;饵料试验结果表明,投喂鲜活饵料优于配合饲料。

管角螺、细角螺的核型研究

以管角螺、细角螺鳃组织为材料,经过秋水仙素处理,空气干燥法制片,Giemsa染色,观察分析获得染色体核型。结果表明,管角螺核型公式为2n=60=44m+10sm+6t,染色体总臂数NF=114。细角螺核型公式为2n=42m+10sm+2st+6t,总臂数NF=112。两种螺的全套染色体中未发现次缢痕、随体,也无性染色体。

我国角螺属不同群体齿舌形态的比较

采集我国沿海不同地区的管角螺Hemifusus tuba(Gmelin)、大角螺Hemifusus colosseus(Lamarck)和棘角螺Hemifusus kawamurai Habe样本,从这3种角螺10个群体中每个群体随机选取10―20个体,进行齿舌结构的比较。结果表明,角螺属齿舌上有齿3列,每一横列齿舌均为3枚,对称排列,其齿式为1.1.1。角螺属这3种齿舌的种间差别主要体现在中央齿的中间突起,而侧齿区别不大;种内不同群体间无明显差别,种间的差异略大于种内,其中管角螺与大角螺和棘角螺差异显著(P<0.05)。大角螺与棘角螺的差异不明显,只是在北部湾大角螺和阳江棘角螺的侧齿第一突起/中央齿宽的比值差异极显著(P<0.01)。角螺属各群体间齿舌差别不大,与其生活习性较为一致有关。齿舌参数不适合作为管角螺不同地理群体的分类依据。

管角螺生殖系统解剖学及组织学观察

解剖并观察了管角螺的生殖系统,采用组织切片技术,对其生殖腺发育及生殖细胞发生过程进行了研究。结果表明,管角螺为雌雄异体,雄性生殖系统主要由精巢、贮精囊、前列腺、输精管和阴茎构成,其中,精巢由生精小管和输精小管组成;根据生精小管内生殖细胞分布和间质细胞数量,精巢发育分为增殖期、生长期(精母细胞分裂期)、成熟与排放期、退化期等4个时期,根据细胞大小、形态及分布特征,精细胞的发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子4个阶段。卵巢结构为滤泡型,由滤泡壁和滤泡腔组成,内含嗜酸性颗粒。从卵巢内滤泡的大小、结构及滤泡内嗜酸性颗粒的数量,卵巢发育分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期;根据卵细胞的大小、形态及卵黄颗粒的含量,卵细胞发生过程分为增殖期、生长期和成熟期。管角螺生殖腺及生殖细胞的发育均不同步,为多次成熟、多次排放方式。

管角螺的生物学特性及养殖

试验结果表明，在水温24—30℃的室内人工饲养条件下，管角螺受精卵经30d发育变态为稚螺，孵化率98％。幼螺适宜温度为23—35℃、盐度为13．0～39．0。饵料以双壳贝类为主。经过50d培育，共育出壳高8—32mm的幼螺11．81万个，成活率92％。幼螺经12个月培养，壳高约10cm。

广西北部湾管角螺性腺发育与繁殖规律研究

本文对广西北部湾海域管角螺(Hemifusus tuba)的生殖系统进行了解剖和观察,采用组织切片技术对其生殖腺发育和生殖细胞的发生过程进行研究。结果表明:广西北部湾管角螺为雌雄异体,雌雄比例接近1∶1。雄性生殖系统主要由精巢、贮精囊、前列腺、输精管和阴茎(阴茎囊和交接器)构成,精巢发育分为增殖期、生长期、成熟与排放期、退化期4个时期。雌性生殖系统由卵巢、输卵管、囊腺体(蛋白腺和缠卵腺)、生殖孔和腹足口组成,卵巢的发育分为增殖期、生长期、成熟与排放期、休止期4个时期。精细胞发生经过精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞期和成熟精子期5个阶段。卵细胞发生经过卵原细胞、初级卵母细胞、次级卵母细胞、成熟卵子4个阶段。管角螺生殖腺在1周年内具有2个繁殖周期,且卵巢与精巢的周年变化规律相吻合。此外,观测的全部雌性个体除了雌性生殖系统外,还具有雄性生殖器官输精管和阴茎。广西北部湾管角螺雌性个体均存在性畸变现象,性畸变率为100%。

管角螺遗传多样性的AFLP分析

近年来,由于对管角螺的捕捞强度加大,其自然资源大大减少。为进一步了解管角螺的遗传变异和群体结构状况,本文首次利用AFLP(Amplified fragment length polymorphism,扩增片段长度多态性)分子标记技术对我国南方沿海管角螺5个地理群体(连云港、温州、台山、湛江、防城港)进行遗传多样性分析。采用2对AFLP引物组合对管角螺5个群体的150个个体进行扩增,共扩增出310个位点,多态位点277个,多态位点比例为89.35%,基因多态性分别为0.382 4、0.476 6、0.393 8、0.437 4和0.392 8,说明5个群体的遗传多样性存在一定的差异。群体间及群体内遗传分化指数表明,管角螺5个地理群体的遗传变异主要来自于群体内个体间,而群体间无明显的遗传分化。UPGMA(非加权组对平均法)系统树分析表明,湛江和防城港群体间的亲缘关系较近,而台山和温州群体间的亲缘关系较远。

管角螺稚贝对亚硝酸盐耐受力研究

水温29℃时研究了管角螺(Hem ifusus tuba)稚贝[壳高(1.22±0.14)mm]在不同盐度和pH下对亚硝酸盐毒性的耐受力。试验结果表明,pH和盐度越低,亚硝酸盐对稚贝的毒害作用越大。水体pH为6.7、7.3、8.0和8.8时,亚硝酸盐对管角螺稚贝的96 h半数致死质量浓度(LC50)(95%可信区间)分别为188 mg.L-1(167～213 m.gL-1)、213 m.gL-1(195～231 m.gL-1)、254 m.gL-1(231～271 m.gL-1)和304 m.gL-1(284～321 m.gL-1),相对应的安全质量浓度(SC)为18.8 mg.L-1、21.3 m.gL-1、25.4 mg.L-1和30.4 m.gL-1,pH8.8时亚硝酸盐对稚贝的SC是pH 6.7时的1.6倍;盐度在16、19、23和28时,亚硝酸盐对管角螺稚贝的96 hLC50(95%可信区间)分别为151 m.gL-1(138～178 m.gL-1)、171 mg.L-1(159～192 mg.L-1)、265 mg.L-1(246～282 m.gL-1)和296 m.gL-1(278～323 m.gL-1),相对应的SC分别为15.1 m.gL-1、17.1 m.gL-1、26.5mg.L-1和29.6 m.gL-1,盐度28时亚硝酸盐对稚贝的SC是盐度16时的近2倍。