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Urine versus brushed samples in human papillomavirus screening: study in both genders 被引量:3
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作者 Kathleen D'Hauwers Christophe Depuydt +4 位作者 John-Paul Bogers Michel Stalpaert Annie Vereecken Jean-Jacques Wyndaele Wiebren Tjalma 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期705-710,共6页
Aim: To investigate whether urine is a good medium for screening and whether there is a correlation between the amount of extracted DNA and human papillomavirus (HPV)-positivity. Methods: In the present study, 30 ... Aim: To investigate whether urine is a good medium for screening and whether there is a correlation between the amount of extracted DNA and human papillomavirus (HPV)-positivity. Methods: In the present study, 30 first-voided urine (FVU) specimens and 20 urethroglandular swabs using cervex-brushes from male partners of HPV-positive patients, and 31 FVU specimens and 100 liquid-based cervix cytology leftovers sampled with cervix-brushes from HPV-positive women were examined for the presence of β-globin. Oncogenic HPV were detected using type-specific PCR. Results: β-globin was found in all the brushed samples, whereas it was found in only 68.9% of the FVU specimens. HPV-PCR was positive in 60.0% of the male brushes, in 29% of the female brushes and in 0% of the male FVU specimens. DNA concentration was, respectively, 0.9998 ng/μL, 37.0598 ng/μL and 0.0207 ng/μL. Conclusion: Urine is not a good tool for HPV detection, probably because the low DNA concentration reflects a low amount of collected cells. β-globin is measurable in FVU by real time quantitative PCR, but the DNA concentration is lower compared to brush sampling for both genders. β-globin-positivity of urethral and cervical swabs is 100%, showing a higher mean concentration of DNA, leading to a higher detection rate of HPV. This is the first article linking DNA- concentration to the presence of HPV. 展开更多
关键词 DNA human papillomavirus MeN polymerase chain reaction screening URINe
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E-cadherin基因启动子区高甲基化与卵巢癌发生发展的相关性研究
2
作者 左卫微 马国明 +1 位作者 王爱芹 薛书霞 《河北医药》 CAS 2023年第11期1668-1671,1675,共5页
目的探讨E-钙粘蛋白(E-cadherin)基因启动子区甲基化状态及其mRNA表达在卵巢癌发生发展中的作用。方法甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测E-cadherin基因启动子区在48例卵巢癌组织及48例正常卵巢组织中的甲基化状态,荧光实时定量PCR(qRT... 目的探讨E-钙粘蛋白(E-cadherin)基因启动子区甲基化状态及其mRNA表达在卵巢癌发生发展中的作用。方法甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测E-cadherin基因启动子区在48例卵巢癌组织及48例正常卵巢组织中的甲基化状态,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测E-cadherin基因mRNA的表达情况。比较卵巢癌组织和正常卵巢组织中E-cadherin基因启动子区甲基化水平及其mRNA表达的差异情况,并分析它们与卵巢癌患者临床病理特征之间的关系。结果卵巢癌组织中E-cadherin基因启动子区甲基化阳性率显著高于正常卵巢组织(P<0.05),E-cadherin基因mRNA表达水平显著低于正常卵巢组织(P<0.05),且E-cadherin基因启动子区甲基化阳性的卵巢癌组织中E-cadherin mRNA表达量显著低于甲基化阴性的卵巢癌组织(P<0.05)。此外,卵巢癌组织中E-cadherin基因启动子区甲基化状态及其mRNA表达水平与卵巢癌患者的FIGO分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论E-cadherin基因启动子区的高甲基化导致其表达下调可能在卵巢癌发生发展中起重要作用,E-cadherin基因甲基化状态有可能成为卵巢癌分子诊断和治疗的重要靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 甲基化 e-钙粘蛋白 甲基化特异性聚合酶链反应
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戊肝病毒(HEV)在猪和牛群中的流行病学研究 被引量:35
3
作者 王佑春 张华远 +7 位作者 崔鹏 蓝海云 李少伟 田克恭 王京 葛胜祥 辜文洁 林京香 《中国预防医学杂志》 CAS 2002年第3期199-201,共3页
目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)在猪和牛群中的感染情况。方法 用抗-HEV抗体试剂盒检测猪和牛血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链的方法(RT-PCR)检测HEV RNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序,然后将序列进行分析。结果 281份猪血清中有... 目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)在猪和牛群中的感染情况。方法 用抗-HEV抗体试剂盒检测猪和牛血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链的方法(RT-PCR)检测HEV RNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序,然后将序列进行分析。结果 281份猪血清中有235份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为83.6%;其中56份血清中有3份为HEV RNA阳性,序列分析显示从猪中克隆的3株序列(SB 2、SH1和SJ 14)之间在ORF 2(6007-6354bp)区域的核苷酸序列的同源性为83%~86%,该3株序列在ORF 2区与1,2,3,4型的同源性分别为74%~79%、73%~77%,73%~76%和83%~93%;190份牛血清中有12份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为6.3%。结论 HEV在猪和牛群中均有流行,但在猪群中的流行率明显高于牛群。猪感染的HEV的基因序列与人群中散发性戊型肝炎病毒的4型同源性最高。 展开更多
关键词 流行病学 戊型肝炎病毒 基因型 聚合酶链反应 人兽共患性疾病
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Progress of Microbial Enhanced Oil Recovery in Laboratory Investigation 被引量:3
4
作者 宋绍富 张忠智 李术元 《Petroleum Science》 SCIE CAS CSCD 2004年第4期23-29,61,共8页
This paper describes a simple, easy process for screening microorganisms, and introduces a laboratory simulation device and process of microbial enhanced oil recovery (MEOR) , which is a necessary research step for t... This paper describes a simple, easy process for screening microorganisms, and introduces a laboratory simulation device and process of microbial enhanced oil recovery (MEOR) , which is a necessary research step for trial in oilfields. The MEOR mechanism and the influence of adsorption, diffusion, metabolism, nutrition, porosity, and permeability are analyzed. The research indicates that different microbes have different efficiencies in EOR and that different culture types play different roles in EOR. The effect of syrup is better than that of glucose, and larger porosity is favorable to the reproduction and growth of microbes, thereby improving the oil recovery. Using crude oil as a single carbon source is more appreciable because of the decrease in cost of oil recovery. At the end of this paper, the development of polymerase chain reaction (PCR) for the future is discussed. 展开更多
关键词 Microbial enhanced oil recovery (MeOR) screening process mechanism of enhancing oil recovery simulation device simulation process polymerase chain reaction (PCR)
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乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异与HBeAg含量和肝炎病情的临床研究 被引量:16
5
作者 张汉荣 刘新钰 +5 位作者 孙梅 赵巍 曹利 李敏 王建芳 吴引伟 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期290-291,共2页
研究乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C基因变异对HBeAg表达和病情的影响。通过DNA扩增、基因序列分析检测48例慢性乙肝和12例慢性重型乙肝患者血清的HBV CP和前C基因序列,及通过微粒子发光法定量检测血清中HBeAg的含量。(1)前C终... 研究乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C基因变异对HBeAg表达和病情的影响。通过DNA扩增、基因序列分析检测48例慢性乙肝和12例慢性重型乙肝患者血清的HBV CP和前C基因序列,及通过微粒子发光法定量检测血清中HBeAg的含量。(1)前C终止变异(nt1896G→A)在重型乙型肝炎病例中的发生率显著升高(66.7%);CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在慢性乙型肝炎中度和重度的病例中的发生率显著升高(分别为52.6%和54.5%)。(2)双变异组和终止变异组的HBeAg含量均显著下降,P<0.01。但终止变异组HBeAg含量的下降较双变异组更为明显,P<0.05,且eAb阳性率也显著升高,P<O.05。终止变异联合双变异组的HBeAg含量及eAb阳性率同终止变异组相近。前C终止变异对HBeAg表达的影响较CP双变异更大,对肝炎病情的影响也更明显。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 C基因启动子 前C基因 基因变异 HBeAG
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不同人群载脂蛋白E基因频率分布特征 被引量:11
6
作者 刘毅 朱健华 +1 位作者 潘闽 王惠民 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第9期14-16,共3页
目的 :研究江苏地区汉族人群载脂蛋白E(ApoE)基因型及等位基因频率 ,并与国内外不同人群比较分布特征。方法 :聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)方法检测 16 8例江苏地区无血缘关系汉族人群ApoE基因型。计算各基因型及等... 目的 :研究江苏地区汉族人群载脂蛋白E(ApoE)基因型及等位基因频率 ,并与国内外不同人群比较分布特征。方法 :聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)方法检测 16 8例江苏地区无血缘关系汉族人群ApoE基因型。计算各基因型及等位基因频率。结果 :江苏地区汉族人群载脂蛋白E各基因型频率分别为 :ε2 / 2 =0 .6 0 % ;ε2 / 3 =11.90 % ;ε2 / 4 =1.2 0 % ;ε3 / 4 =10 .70 % ;ε3 / 3 =75 .0 0 % ;ε4 / 4 =0 .6 0 % ;各等位基因频率分别为 :ε2 =7.14% ;ε3 =86 .31% ;ε4 =6 .5 5 %。频率分布在不同年龄、性别无显著差异。与其他地区中国人群频率分布相似。中国人群ε3 等位基因频率明显高于欧美人群 ,而ε4等位基因频率明显低于欧美人群。结论 :江苏地区汉族人群载脂蛋白E等位基因频率分布与其他地区中国人群频率分布相似 ,但与欧美人群有显著差异。 展开更多
关键词 载脂蛋白e 基因频率分布特征 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性
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一种5重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立 被引量:5
7
作者 董立明 杨帆 +4 位作者 邢珍娟 李葱葱 闫伟 龙丽坤 李飞武 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第24期329-334,共6页
以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,rea... 以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。 展开更多
关键词 转基因水稻 筛查元件 单一实时聚合酶链式反应 5重实时聚合酶链式反应 高通量检测方法
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The Effects of Apolipoprotein E Polymorphism on Serum Lipids, Lipoproteins and Apolipoproteins Variation 被引量:3
8
作者 潘闽 朱健华 +2 位作者 袁瑾 王惠民 刘志华 《Journal of Nanjing Medical University》 2003年第4期196-200,共5页
Objective: To study the effects of Apolipoprotein E (ApoE) polymorphism onserum levels of lipids, lipoproteins and apolipoproteins. Methods: Fragments of ApoE gene forthex-on containing codon 112 and 158 polymorphic l... Objective: To study the effects of Apolipoprotein E (ApoE) polymorphism onserum levels of lipids, lipoproteins and apolipoproteins. Methods: Fragments of ApoE gene forthex-on containing codon 112 and 158 polymorphic locus were amplified by PCR, and then digested untilCfo I endonuclease. Genotypes and alleles frequencies of 168 healthy persons in Jiangsu area werecalculated. The effects of ApoE genotypes and alleles on serum lipids, lipoproteins andapolipoproteins variation were analyzed. Results: The effects of ApoE alleles on total cholesterol(TC), law density lipoprotein-cholesterol (LDL-C), ApoB was: along a decreasing gradientε_4>ε_3>ε_2. The effect of ε_4 allele was to increase serum levels of TC, LDL-C and ApoB, andthe ε_2 allele had an effect opposite to that of ε_4 allele. Conclusion: ApoE polymorphism is anindependent genetic factor on individual serum levels of lipids and apolipoproteins. 展开更多
关键词 Apolipoprotein e POLYMORPHISM polymerase chain reaction restrictionfragment length polymorphism
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载脂蛋白E基因多态性与中国人群冠心病的关联 被引量:11
9
作者 潘闽 朱健华 +1 位作者 王惠民 刘志华 《中国慢性病预防与控制》 CAS 2001年第3期109-110,121,共3页
目的研究载脂蛋白 E(Apo E)基因多态性与中国人群冠心病的关联。方法选择 6 3例冠心病患者及年龄、性别相匹配的 90例正常对照组 ,聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)方法检测 Apo E基因型。比较两组基因型及等位基因频... 目的研究载脂蛋白 E(Apo E)基因多态性与中国人群冠心病的关联。方法选择 6 3例冠心病患者及年龄、性别相匹配的 90例正常对照组 ,聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)方法检测 Apo E基因型。比较两组基因型及等位基因频率分布。结果冠心病组 ε4等位基因频率 (12 .70 % )明显高于对照组 (5 .5 5 % ) (P<0 .0 5 )。结论 展开更多
关键词 载脂蛋白e 基因 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 冠状动脉疾病
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上海部分地区戊型肝炎病毒(HEV)基因型的分析 被引量:11
10
作者 蓝海云 王佑春 +5 位作者 张华远 彭惠利 林京香 辜文洁 吴星 李河民 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期106-109,共4页
为了解戊型肝炎病毒 (HEV)在上海部分地区流行的基因型 ,采用RT nPCR的方法检验 35例急性散发性戊型肝炎患者中HEVRNA ,并对阳性产物进行克隆测序 ,然后对其基因型进行分析。结果显示在 35例急性散发性戊型肝炎患者中PCR阳性为 9例 ,测... 为了解戊型肝炎病毒 (HEV)在上海部分地区流行的基因型 ,采用RT nPCR的方法检验 35例急性散发性戊型肝炎患者中HEVRNA ,并对阳性产物进行克隆测序 ,然后对其基因型进行分析。结果显示在 35例急性散发性戊型肝炎患者中PCR阳性为 9例 ,测序证实 8例为HEV的基因序列 ;其中 1例为HEV 1型 ,7例为HEV 4型。提示在上海部分地区的急性散发性戊型肝炎中以HEV 展开更多
关键词 上海部分地区 戊型肝炎病毒 HeV 基因型
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马立克病病毒囊膜糖蛋白E基因的克隆及序列分析 被引量:3
11
作者 朱素娟 宋晓森 +2 位作者 韩凌霞 刘岳龙 崔治中 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 2002年第1期9-12,共4页
用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从中国广西分离的马立克氏病病毒 (MDV)N株和G2 株基因组DNA中 ,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的 1 5 0 0bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进 pUC1 8质粒载体中 ,以Dig标记的gEPCR产... 用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从中国广西分离的马立克氏病病毒 (MDV)N株和G2 株基因组DNA中 ,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的 1 5 0 0bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进 pUC1 8质粒载体中 ,以Dig标记的gEPCR产物作为探针做斑点杂交及酶切分析筛选到含MDVgE基因的目的重组质粒 pMNE、pMG2 E。通过酶切位点分析显示 ,两毒株的 gE基因内部酶切位点与MDV GA国际标准强毒株的酶切位点基本一致。对重组 pMNE、pMG2 E质粒进行部分序列测定 ,并用DNAStar软件分析 ,结果表明 :插入序列与发表的GA株gE基因序列具有高度同源性 ,gE基因为高度保守基因。 展开更多
关键词 马立克病 囊膜 糖蛋白F基因 克隆 序列分析 马立克病病毒
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HBV DNA不同载量的CHB患者的HBeAg和ALT水平比较 被引量:11
12
作者 沈云岳 宁小晓 王蕾 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第12期823-825,共3页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA不同载量的慢性乙型肝炎(CHB)患者乙肝病毒e抗原(HBeAg)与丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系,为临床治疗提供依据。方法分别比较214例ALT正常的CHB患者中HBeAg(+)、HBeAg(-)患者与200名HBsAg(-)、ALT正常的健康... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA不同载量的慢性乙型肝炎(CHB)患者乙肝病毒e抗原(HBeAg)与丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系,为临床治疗提供依据。方法分别比较214例ALT正常的CHB患者中HBeAg(+)、HBeAg(-)患者与200名HBsAg(-)、ALT正常的健康对照者ALT水平的差异。将ALT水平正常的214例CHB患者HBV DNA载量按HBV DNA载量分为3组(Ⅰ组:HBV DNA<103 IU/mL;Ⅱ组:103 IU/mL≤HBV DNA<104 IU/mL;Ⅲ组:HBV DNA≥104 IU/mL)。比较各组间ALT水平和HBeAg阳性率。结果 214例ALT正常的CHB患者中HBeAg(+)组及HBeAg(-)组ALT水平均高于正常对照组(P<0.01),且HBeAg(+)组ALT水平明显高于HBeAg(-)组(P<0.05);Ⅰ组CHB患者HBeAg阳性率明显低于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05),Ⅲ组CHB患者的ALT水平明显高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。结论 HBV DNA≥104 IU/mL且ALT水平正常的CHB患者其ALT水平处于正常范围的上限,HBeAg阳性率较高,提示临床应予以更多的关注。 展开更多
关键词 丙氨酸氨基转移酶 乙肝e抗原 慢性乙型肝炎 聚合酶链反应
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115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者HEV RNA检测与基因分型研究 被引量:3
13
作者 谈春荣 胡梅 +4 位作者 张京 孙焕英 朱旭 夏宁邵 张曼 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第6期625-629,共5页
目的对戊型肝炎暴发人群中115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者进行病毒RNA检测和基因分型研究,探讨其临床意义。方法对收集的暴发人群中115例抗.HEV E2-IgM、IgG均阳性人员血清和23例戊型肝炎患者粪便标本,采用通用引物进行逆转录-... 目的对戊型肝炎暴发人群中115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者进行病毒RNA检测和基因分型研究,探讨其临床意义。方法对收集的暴发人群中115例抗.HEV E2-IgM、IgG均阳性人员血清和23例戊型肝炎患者粪便标本,采用通用引物进行逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)扩增戊型肝炎病毒Ⅰ、Ⅳ型基因片段,并进行测序和同源进化分析。结果从被检血清中扩增出8例戊型肝炎病毒阳性RNA基因片段,阳性毒株之间核苷酸同源性在97.3%~100%之间,进化树分析提示阳性毒株与戊型肝炎病毒基因Ⅳ型距离最近,与日本株和中国原型株的同源性分别为93.3%~95.3%和86.7%~87.3%;粪便标本中未能检测到戊型肝炎病毒RNA。结论本次急性戊型肝炎暴发流行由戊型肝炎病毒基因型Ⅳ型导致,暴发毒株与日本株有更近的亲缘关系;高灵敏度引物和取样时机是提高戊型肝炎病毒RNA检出率的前提。 展开更多
关键词 肝炎病毒 戊型 基因Ⅳ型 聚合酶链反应
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中国人Ⅱb型高脂蛋白血症apoE基因多态性的研究 被引量:3
14
作者 张雪梅 白怀 +5 位作者 刘秉文 范萍 张荣爵 徐燕华 姚佳 朱红 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期179-182,共4页
目的 探讨中国人 b型高脂蛋白血症患者载脂蛋白 E(apo E)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性法 (PCR- RFL P) ,分别对 74例 b型高脂血症患者及 2 30例血脂正常者的 apo E... 目的 探讨中国人 b型高脂蛋白血症患者载脂蛋白 E(apo E)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性法 (PCR- RFL P) ,分别对 74例 b型高脂血症患者及 2 30例血脂正常者的 apo E基因型、空腹血脂及载脂蛋白 A 、A 、B10 0、C 、C 、E进行了全面分析。结果  b型高脂血症患者的体重指数 (BMI) ,血清甘油三酯 (TG) ,总胆固醇 (TC) ,低密度脂蛋白胆固醇(L DL C) ,非高密度脂蛋白胆固醇 (n HDL C) ,载脂蛋白 A 、B10 0、C 、C 、E水平及 TG/ HDL C比值均较对照组显著升高 (P<0 .0 0 1) ;血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)水平及 apo E/ apo C 比值显著降低 (P<0 .0 5 )。 b型高脂血症组与对照组 apo E基因型及等位基因频率分布均以 E3/ 3和 ε3最高 , b型高脂血症组的 ε2 等位基因有增高的趋势 ,而 ε4等位基因有降低的趋势 (P>0 .0 5 )。携带 ε2 等位基因组血清 TG、apo C 、apo E水平及 apo E/ apo C 比值较 E3/ 3基因型组显著升高 ,而携带 ε4等位基因组血清 TC、n HDL C及 apo E水平较 E3/ 3基因型组显著升高(P<0 .0 0 1) )。结论  ε2 及 ε4等位基因与 b型高脂蛋白血症患者的血清 TG、TC、n HDL C、apo C 及 apo E水平升高有关。 展开更多
关键词 Ⅱb型高脂血症 载脂蛋白e 等位基因 基因型 PCR-RFLP 基因多态性
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基于微流控芯片技术的创伤弧菌特异性引物的筛选及验证
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作者 张小红 禹乐 +1 位作者 朱启淦 孟加榕 《检验医学与临床》 CAS 2024年第11期1579-1585,1594,共8页
目的探讨适用于创伤弧菌的特异性引物,通过微流控芯片技术进行一站式检测,为快速检测出病原体奠定基础。方法通过NCBI网站获取靶基因序列,采用MEGA7.0软件对齐后设计出19对引物,BLAST确定引物的特异度,再通过引物性能、灵敏度、快速变... 目的探讨适用于创伤弧菌的特异性引物,通过微流控芯片技术进行一站式检测,为快速检测出病原体奠定基础。方法通过NCBI网站获取靶基因序列,采用MEGA7.0软件对齐后设计出19对引物,BLAST确定引物的特异度,再通过引物性能、灵敏度、快速变温实验筛选适用于微流控的引物,最后对引物的特异度与灵敏度进行评价。结果成功筛选出1对适用于微流控的引物vvhA10,微流控检测结果发现其特异度与灵敏度较高。结论筛选出适用于微流控芯片的引物,用于全自动微流控检测可以满足应急检测或现场快速检测等方面的使用需求。 展开更多
关键词 微流控芯片 创伤弧菌 引物筛选 荧光定量聚合酶链反应 即时检测
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2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究 被引量:4
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作者 张雪梅 刘秉文 +8 位作者 白怀 田浩明 吴兆丰 张蓉 方定志 张荣爵 徐燕华 姚佳 任艳 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期75-77,共3页
目的 探讨中国人 2型糖尿病患者载脂蛋白 E(apo E)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性法 ,分别对 74例 2型糖尿病患者及 191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的 apo E基因型... 目的 探讨中国人 2型糖尿病患者载脂蛋白 E(apo E)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性法 ,分别对 74例 2型糖尿病患者及 191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的 apo E基因型、空腹血脂及载脂蛋白 A 、A 、B10 0、C 、C 及 E进行全面分析。结果  2型糖尿病患者的血清甘油三酯 (TG) ,总胆固醇 (TC) ,低密度脂蛋白胆固醇 (L DL C) ,非高密度脂蛋白胆固醇(n HDL C) ,载脂蛋白 B10 0、C 、C 、E水平及 TG/ HDL C比值较对照组显著升高 (P<0 .0 1) ;血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) ,apo E/ apo C 比值显著降低 (P<0 .0 5 )。2型糖尿病组与对照组 apo E基因频率分布无显著性差异(P>0 .0 5 )。携带 ε2 等位基因组血清 TG/ HDL C比值较 E3/ 3基因型显著降低 ;而携带 ε4 等位基因组血清 apo A 水平较 E3/ 3基因型及携带ε2 等位基因组显著升高 (P<0 .0 0 1) )。结论  2型糖尿病患者 apo E基因多态性与血TG/ HDL C及 apo A 展开更多
关键词 2型糖尿病 载脂蛋白e 等位基因 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性基因型
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EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段调节人肝癌细胞中E-cadherin mRNA表达的研究 被引量:4
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作者 高艳景 袁孟彪 +2 位作者 辛华 王茜 邵洪莲 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期255-257,共3页
目的:研究表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor, EGFR)反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞 E-cadherin基因表达调节。方法:应用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法。以 HPRT(hypoxanthine phosphoribosyltr... 目的:研究表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor, EGFR)反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞 E-cadherin基因表达调节。方法:应用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法。以 HPRT(hypoxanthine phosphoribosyltransferase)为内标,分析 3.2μ mol/L浓度的 EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段在作用 84 h时对人肝癌细胞基因 E-cadherin mRNA表达水平的影响。结果: EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段有明显的刺激人肝癌细胞表达 E-cadherin的作用,与正常对照组相比,其 E-cadherin mRNA表达水平增高约 66.36%( P< 0.05)。结论: EGFR反义寡脱氧核苷酸硫代修饰片段是人肝癌细胞表达 E-cadherin基因的调节剂,能刺激人肝癌细胞 E-cadherin基因的表达 ;本研究为预防和治疗肝癌的侵袭转移提供了新的途径和方法。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 硫代磷酸酯寡脱氧核苷酸 钙粘蛋白 肝癌细胞 逆转录聚合酶链反应 MRNA e-CADHeRIN
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荧光定量RT-PCR检测OATP-E基因表达 被引量:4
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作者 蔡莉 孔庆暖 郭成浩 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第1期27-30,共4页
目的:建立荧光定量RT-PCR检测肿瘤细胞有机阴离子转运多肽E(organic anion transportingpolypeptide-E,OATP-E)mRNA的方法,了解乳腺癌细胞株MCF-7和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中OATP-E mRNA的表达水平。方法:构建重组质粒,绘... 目的:建立荧光定量RT-PCR检测肿瘤细胞有机阴离子转运多肽E(organic anion transportingpolypeptide-E,OATP-E)mRNA的方法,了解乳腺癌细胞株MCF-7和对阿霉素耐药的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中OATP-E mRNA的表达水平。方法:构建重组质粒,绘制荧光定量RT-PCR检测OATP-E mRNA的标准曲线,并运用此方法检测MCF-7/ADR和MCF-7细胞株中OATP-E mRNA的表达。结果:荧光定量RT-PCR检测MCF-7和MCF-7/ADR细胞OATP-E的基因表达,重复10次实验所得结果平均分别为5.47×105拷贝数/μgRNA和2.82×104拷贝数/μg RNA,两者相差约19.4倍,P<0.05。结论:成功建立了荧光定量RT-PCR检测OATP-E基因表达的方法,检测结果用绝对拷贝数表示,定量准确可靠,并有利于标准的统一。初步应用发现乳腺癌耐药株MCF-7/ADR中OATP-E mRNA的表达量比不耐药株MCF-7减少。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 荧光定量 OATP-e 基因表达
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中国人Ⅱa型高脂蛋白血症载脂蛋白E基因多态性的研究 被引量:5
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作者 张雪梅 刘秉文 +3 位作者 白怀 方定志 吴兆丰 张蓉 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2001年第1期45-48,共4页
为探讨中国人Ⅱa型高脂蛋白血症患者载脂蛋白E基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系 ,采用聚合酶链反应—限制片长多态性法 ,分别对 87例Ⅱa型高脂蛋白血症患者及 2 30例血脂正常者的载脂蛋白E基因型、空腹血脂及载脂蛋白AⅠ、AⅡ... 为探讨中国人Ⅱa型高脂蛋白血症患者载脂蛋白E基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系 ,采用聚合酶链反应—限制片长多态性法 ,分别对 87例Ⅱa型高脂蛋白血症患者及 2 30例血脂正常者的载脂蛋白E基因型、空腹血脂及载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B10 0、CⅡ、CⅢ和E进行了全面分析。结果发现 ,Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇 ,以及载脂蛋白B10 0、CⅡ、CⅢ和E水平较对照组显著升高 (P <0 .0 1) ;血清载脂蛋白E/CⅢ比值显著降低 (P <0 .0 5 )。Ⅱa型高脂蛋白血症组与对照组载脂蛋白E基因型及等位基因频率分布均以E3/ 3和ε3最高 ,Ⅱa型高脂蛋白血症组的ε4等位基因有增高的趋势 ,而ε2等位基因有降低的趋势 (P >0 .0 5 )。携带ε2等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3/ 3基因型组显著升高 ,而携带ε4等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3/ 3基因型及携带ε2等位基因组显著降低 (P <0 .0 0 1)。此结果提示 ,ε2及ε4等位基因与Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清载脂蛋白E水平有关。 展开更多
关键词 Ⅱa型高脂蛋白血症 载脂蛋白e 等位基因 基因型 流行病学 中国人
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浙南地区人群ApoB、ApoE等位基因频率的初步研究 被引量:3
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作者 谭应霞 俞康 +2 位作者 沈志坚 胡晓霞 王小同 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1999年第2期78-80,共3页
为了研究ApoB、ApoE等位基因在浙南地区人群中的频率分布,我们应用PCRRFLPs 检测了浙南地区60 例无脂代谢紊乱的健康人ApoB的多态性位点XbaⅠ、EcoRⅠ,ApoE的HhaⅠ位点的多态性分布。结果发现... 为了研究ApoB、ApoE等位基因在浙南地区人群中的频率分布,我们应用PCRRFLPs 检测了浙南地区60 例无脂代谢紊乱的健康人ApoB的多态性位点XbaⅠ、EcoRⅠ,ApoE的HhaⅠ位点的多态性分布。结果发现ApoB的XbaⅠ、EcoRⅠ酶切位点以X- 和E+ 等位基因占优势,频率分别为0 .983 和0 .967 ,X+ 和E- 等位基因很少见。ApoE 等位基因频率分布为:E2 =0.02,E3= 0 .86 ,E4 =0 .12 。 展开更多
关键词 载脂蛋白e 载脂蛋白B 等位基因频率 PCR
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