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甘草甜素对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及机制研究
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作者 要兆旭 马海滨 +4 位作者 刘琳 赵倩 巩慧 孙凯丽 秦隆朝 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第5期604-609,共6页
目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)... 目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)mRNA和蛋白表达水平。将喉癌Hep-2细胞分为对照组、Gly低浓度组、Gly中浓度组、Gly高浓度组、Gly高浓度+空载质粒组、Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组。各组给予相应浓度的Gly干预或转染对应质粒培养48 h。Transwell实验和划痕实验分别检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力。RT-qPCR法和蛋白印迹实验检测各组Hep-2细胞miR-205-5p、SIRT3 mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验分析miR-205-5p与SIRT3的靶向关系。结果:与人喉黏膜上皮细胞比较,喉癌Hep-2细胞miR-205-5p水平降低,SIRT3 mRNA和蛋白水平升高(均P<0.05)。与对照组比较,Gly低、中、高浓度组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平依次降低,miR-205-5p水平依次升高(均P<0.05)。与Gly高浓度组和Gly高浓度+空载质粒组比较,Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平升高,miR-205-5p水平降低(均P<0.05)。miR-205-5p可靶向调控SIRT3表达。结论:Gly能够抑制Hep-2细胞侵袭和迁移,其机制可能与上调miR-205-5p表达,进而靶向下调SIRT3表达有关。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 甘草甜素 微小RNA-205-5p 沉默信息调节因子2相关酶3 侵袭 迁移
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黄连素下调NRAV和PI3K/AKT通路减轻RSV感染致HEp-2细胞的损伤
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作者 崔玉娟 赵辉 +2 位作者 苏东霞 张莹 胡丹东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期747-755,共9页
目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-... 目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-8实验检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡率和线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测ATP水平;Western blot检测细胞PI3K、AKT、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、BNIP3、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达;MitoSOX染色检测细胞线粒体ROS(mtROS);ELISA检测细胞IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平。结果过表达NARV细胞凋亡率、RSV活性增加,敲低后结果相反;BE能显著抑制NRAV和PI3K/AKT通路(P<0.05),改善线粒体功能、诱导线粒体自噬,提高细胞的活性、降低凋亡率(P<0.05),并降低NLRP3炎性小体活化水平和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平(P<0.05)。过表达NRAV或740Y-P处理可逆转BE对RSV感染HEp-2细胞的改善作用。结论BE能够减轻RSV感染所致HEp-2细胞损伤,其机制可能与BE下调NRAV和PI3K/AKT通路,诱导线粒体自噬,进而减轻线粒体损伤和炎症反应有关。 展开更多
关键词 黄连素 RSV LncRNA NRAV PI3K/AKT通路 线粒体损伤 hep-2细胞损伤
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不同残差网络模型的HEp-2细胞荧光图像分类比较
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作者 许晗 《襄阳职业技术学院学报》 2023年第6期100-104,共5页
对人的喉癌上皮细胞(HEp-2)进行准确的荧光细胞图像分类,对识别、诊断以及后续治疗起着关键的作用,同时用HEp-2细胞鉴定抗核抗体(ANA)也是判别自身免疫病的常用方法之一。以计算机视觉为基础的HEp-2细胞分类和抗核抗体分析,有助于降低... 对人的喉癌上皮细胞(HEp-2)进行准确的荧光细胞图像分类,对识别、诊断以及后续治疗起着关键的作用,同时用HEp-2细胞鉴定抗核抗体(ANA)也是判别自身免疫病的常用方法之一。以计算机视觉为基础的HEp-2细胞分类和抗核抗体分析,有助于降低专家的工作量,加强疾病检测技术的准确性和快速性。文章提出了基于深层次残差网络的HEp-2细胞分类研究,并利用不同残差模型进行实验和比较。实验表明,该方法可有效地对HEp-2细胞进行分类。 展开更多
关键词 hep-2细胞 深层次残差网络 细胞图像分类
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Effect of DRB on the Biological Characteristics of Human Laryngeal Carcinoma Hep-2 Cell Line
4
作者 王建亭 龚树生 +3 位作者 付勇 薛秋红 陈广理 刘英鹏 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第1期104-106,共3页
In order to study the effect of 5, 6-Dichloro-l-13-D-ribofuranosyl-benzimidazole (DRB) on the biological characteristics of human laryngeal carcinoma Hep-2 cell line in vitro, Hep-2 cells cultured in vitro were trea... In order to study the effect of 5, 6-Dichloro-l-13-D-ribofuranosyl-benzimidazole (DRB) on the biological characteristics of human laryngeal carcinoma Hep-2 cell line in vitro, Hep-2 cells cultured in vitro were treated with different concentrations of DRB. Changes in cell proliferation, apoptotic rate and invasiveness were detected by MTT assay, flow cytometry (FCM) and matrigel in vitro invasion assay, respectively. It was found that DRB inhibited the proliferation of Hep-2 cells in a dose- and time-dependent manner. After being treated with 0, 10, 20, 40, 80 μmmol/L DRB for 24 h, the apoptotic rate in Hep-2 cells was (0.68±0.19)%, (1.95±0.12)%, (8.51±0.26)%, (11.26±0.17)% and (14.99±0.32)%, respectively. The matrigel in vitro invasion assay revealed that DRB began to inhibit the invasion of Hep-2 cells at the concentration of 5 μmmol/L, and with the increase of DRB concentration, the inhibitory effect was enhanced. It was suggested that DRB could influence the essential biological characteristics of Hep-2 cells, inhibit Hep-2 cells proliferation, reduce invasive ability and induce apoptosis of Hep-2 cells. 展开更多
关键词 protein-serine-threonine kinases 5 6-Dichloro-1-β-D-ribofuranosyl- benzimidazole laryngeal neoplasms hep-2 cell line
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miR-135a通过下调SOX2抑制喉癌Hep-2细胞的恶性生物学行为和增强对奥沙利铂的敏感性 被引量:8
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作者 刘扬帆 屈中玉 +2 位作者 王文亷 孙星 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期955-961,共7页
目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-... 目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-2细胞中miR-135a的表达水平。miR-135 inhibitor转染喉癌Hep-2细胞后,采用CCK-8检测Hep-2细胞活性,集落形成实验检测Hep-2细胞集落形成能力,Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭及迁移能力,WB实验检测Hep-2细胞中SOX2蛋白的表达水平。0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L的奥沙利铂处理已转染miR-135 inhibitor的Hep-2细胞,CCK-8实验检测Hep-2细胞的增殖活性,Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率。采用miR-135a inhibitor质粒、对照pcDNA空载体(SOX2-Con)质粒、pcDNA-SOX2(SOX2-OE)质粒共转染Hep-2细胞,构建miR-135a inhibitor+SOX2-Con组和miR-135a inhibitor+SOX2-OE组,检测此2组细胞的增殖活性、集落形成能力、侵袭及迁移能力。结果:与癌旁组织比较,喉癌组织中miR-135a表达水平显著升高(P<0.01);与正常NHP细胞比较,miR-135a在Hep-2细胞中表达水平明显上调(P<0.01);转染miR-135a inhibitor导致Hep-2细胞中miR-135a表达水平明显降低(P<0.01)。敲降miR-135a明显降低Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移、侵袭和SOX2表达(均P<0.01);明显增强细胞对奥沙利铂敏感性(P<0.01);与miR-135a inhibitor+SOX2-Con组比较,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移与侵袭能力均明显增加(均P<0.01);同时,用不同浓度的奥沙利铂处理此2组细胞,相对于miR-135a inhibitor+SOX2-Con组,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞存活率显著升高(P<0.01)。结论:敲降miR-135a可能通过下调转录因子SOX2的表达抑制Hep-2细胞的恶性生物学行为,并增强其对奥沙利铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 miR-135a SOX2 奥沙利铂
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藻蓝蛋白诱导喉癌HEP-2细胞凋亡的实验研究 被引量:9
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作者 应俊 潘若望 +5 位作者 王茂峰 陈吉顺 刘倩 张洪勤 包其郁 李佩珍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1189-1196,共8页
目的:探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞,分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响;DCFH-DA标记的流式细胞术检... 目的:探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞,分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响;DCFH-DA标记的流式细胞术检测细胞内的活性氧水平;分光光度法检测细胞内caspase-3、-8、-9的活性;RT-PCR、Western blot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果:MTT结果显示藻蓝蛋白能够抑制喉癌HEP-2的细胞活力,且呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜、电镜、流式细胞术的一系列定性化和定量化实验证实藻蓝蛋白可显著诱导HEP-2细胞的凋亡;藻蓝蛋白处理后细胞内ROS水平升高,caspase-3、-8、-9被激活;RT-PCR结果表明,藻蓝蛋白作用后Bax、Fas、P53、caspase-3和caspase-9表达显著上调(P<0.05),Bcl-2表达显著下调(P<0.05);Western blot结果和RT-PCR结果一致。结论:藻蓝蛋白能够诱导HEP-2细胞的凋亡,其机制可能与细胞内ROS水平升高,上调Bax、Fas和P53 mRNA,下调Bcl-2 mRNA的表达,从而促进凋亡信号的转导最终导致细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 喉癌 hep-2细胞 细胞凋亡
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臭灵丹中黄酮类化合物对人喉癌细胞Hep-2凋亡的影响及机制 被引量:11
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作者 曹长姝 沈伟哉 +1 位作者 李药兰 王辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1362-1365,共4页
目的:探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的机制。方法:MTT法检测分离自臭灵丹的黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTMF)对2种正常细胞的毒性和对3种肿瘤细胞株的增殖抑制作用;采用流式细胞仪... 目的:探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的机制。方法:MTT法检测分离自臭灵丹的黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTMF)对2种正常细胞的毒性和对3种肿瘤细胞株的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测化合物对Hep-2细胞凋亡率的影响;Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的变化。结果:HTMF显著抑制Hep-2细胞的增殖并呈浓度、时间双重依赖性关系,但对正常细胞Vero和EVC304的毒性较小,对A549和HepG2细胞抑制作用小。流式细胞仪检测结果显示HTMF对Hep-2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效、时效关系。Western blotting结果显示HTMF可诱导Hep-2细胞中caspase-3和caspase-9蛋白的活化,并呈时间依赖性关系。结论:HTMF对人喉癌细胞Hep-2的生长有显著的抑制作用,其机制可能通过激活caspase-9进而活化caspase-3诱导Hep-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄酮类化合物 hep-2细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9
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田基黄对人喉癌Hep-2和人宫颈癌Hela细胞株生长的抑制作用 被引量:17
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作者 黎七雄 孙忠义 陈金和 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期93-94,共2页
体外实验研究结果,田基黄对Hep-2和Hela人癌细胞株的生长均有明显抑制作用,使细胞圆缩、不贴壁和死亡。电镜观察,给药组Hep-2、Hela细胞线粒体肿胀、耗损和结构模糊;细胞核膜不完整、界限不清。
关键词 田基黄 hep-2细胞 HELA细胞 抑制
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雷帕霉素与顺铂对Hep-2细胞的联合作用 被引量:4
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作者 雷文斌 贾涛 +2 位作者 苏振忠 文卫平 祝小林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1838-1841,1845,共5页
目的探讨联合应用顺铂和mTOR抑制剂雷帕霉素对喉癌Hep-2细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷帕霉素和顺铂单独或联合应用对喉癌Hep-2细胞的抑制率,计算IC50值,探讨联合用药的效果;采用流式细胞术和Hoechst33258免疫荧光检... 目的探讨联合应用顺铂和mTOR抑制剂雷帕霉素对喉癌Hep-2细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷帕霉素和顺铂单独或联合应用对喉癌Hep-2细胞的抑制率,计算IC50值,探讨联合用药的效果;采用流式细胞术和Hoechst33258免疫荧光检测药物单独或联合使用对喉癌Hep-2细胞凋亡的影响。结果雷帕霉素的IC50值为11.03nmol/L,顺铂的IC50值为8.81μmol/L。雷帕霉素可以拮抗Hep-2细胞增殖,使细胞停滞在G1期。联合使用雷帕霉素和顺铂进行化疗的协同治疗指数q>1.15(金氏公式),显示具有协同治疗作用;流式细胞术和免疫荧光检测显示联合使用雷帕霉素和顺铂可以明显增强对Hep-2细胞的凋亡水平。结论联合应用雷帕霉素和顺铂可以明显提高对喉癌Hep-2细胞的杀伤效果,二者具有明显的协同作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 AKT/MTOR 顺铂 hep-2细胞 细胞凋亡
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下调FoxM1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响 被引量:7
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作者 魏蕾 江黎珠 +2 位作者 于超 文韬宇 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第16期1603-1608,共6页
目的探讨下调Fox M1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法分别选用Fox M1 siRNA以及Fox M1特异性抑制剂(硫链丝菌肽)下调Hep-2细胞Fox M1表达。实时定量PCR、Western blot检测siRNA或硫链丝菌肽处理细胞后Fox M1 m... 目的探讨下调Fox M1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法分别选用Fox M1 siRNA以及Fox M1特异性抑制剂(硫链丝菌肽)下调Hep-2细胞Fox M1表达。实时定量PCR、Western blot检测siRNA或硫链丝菌肽处理细胞后Fox M1 mRNA、蛋白表达量;MTT法检测下调Fox M1表达后Hep-2细胞的顺铂敏感性;流式细胞术检测下调Fox M1表达后顺铂诱导的凋亡率变化;实时定量PCR、Western blot检测顺铂作用于Fox M1下调组及对照组细胞,其Fox M1 mRNA、蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达变化。结果 siRNA及硫链丝菌肽均能下调Fox M1表达(P<0.05);两种方式均能降低顺铂作用下细胞存活率以及IC50[NC组顺铂IC50=(2.609±0.102)μg/m L,干扰组IC50=(0.771±0.058)μg/m L,P<0.05;对照组顺铂IC50=(2.142±0.198)μg/m L,抑制剂组IC50=(0.773±0.063)μg/m L,P<0.05],siRNA法处理后NC组、干扰组、NC+顺铂组、干扰+顺铂组凋亡率依次为(4.197±0.273)%、(12.553±0.183)%、(37.465±4.305)%、(82.373±7.214)%,干扰+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);抑制剂处理后对照组、抑制剂组、顺铂组、抑制剂+顺铂组凋亡率依次为(2.343±0.194)%、(10.127±0.479)%、(35.075±1.995)%、(62.843±1.824)%,抑制剂+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);下调Fox M1表达,凋亡抑制蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论下调Fox M1表达可提高Hep-2细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2下调、Bax上调相关。 展开更多
关键词 FOXM1 硫链丝菌肽 hep-2细胞 顺铂 化疗敏感性 细胞凋亡
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松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因转录的影响 被引量:8
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作者 刘影 丁祥 +3 位作者 刘露 闫香慧 钱叶 侯怡铃 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期174-178,共5页
运用基因芯片技术分析松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因表达的影响及分子机制。结果表明,经松乳菇多糖600μg/m L处理48 h后,在人喉癌Hep-2细胞中发现相关肿瘤差异基因共68个,其中人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因下调倍数大于100... 运用基因芯片技术分析松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因表达的影响及分子机制。结果表明,经松乳菇多糖600μg/m L处理48 h后,在人喉癌Hep-2细胞中发现相关肿瘤差异基因共68个,其中人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因下调倍数大于100倍的基因共8个,下调50~100倍的基因共14个,同时按基因转录水平将这些基因进行了分类。运用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析技术分析相关基因通路,结果显示松乳菇多糖主要抑制人喉癌Hep-2细胞中的MAPK信号转导通路和PI3K-AKT信号转导通路。在松乳菇多糖的刺激作用下,人喉癌Hep-2细胞的凋亡是多种基因共同作用的综合结果。用筛选出的基因进一步研究肿瘤凋亡的分子机制,对寻找潜在的抗肿瘤作用靶点具有重要生物学意义。 展开更多
关键词 松乳菇多糖 人喉癌hep-2细胞 基因芯片 凋亡
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慢病毒介导的siRNA靶向CD47基因对人喉癌细胞Hep-2增殖、凋亡的影响 被引量:4
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作者 高树峰 张少容 +6 位作者 徐莲 李黎 万俊 杨春平 刘建国 汪美群 刘月辉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期634-638,共5页
目的探究慢病毒载体介导siRNA抑制CD47基因表达后对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖凋亡的影响。方法构建慢病毒载体,将靶向CD47基因的siRNA慢病毒转染至Hep-2细胞;用荧光显微镜行细胞形态学变化观察;RT-PCR检测细胞CD47 mRNA表达的变化;West... 目的探究慢病毒载体介导siRNA抑制CD47基因表达后对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖凋亡的影响。方法构建慢病毒载体,将靶向CD47基因的siRNA慢病毒转染至Hep-2细胞;用荧光显微镜行细胞形态学变化观察;RT-PCR检测细胞CD47 mRNA表达的变化;Western blotting检测CD47蛋白表达的变化情况;MTT法检测细胞的增殖凋亡情况。结果 CD47-siRNA慢病毒转染Hep-2细胞后,形态学观察显示CD47-siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖,细胞变形明显,体积变小,可见细胞坏死及凋亡。RT-PCR和Western blotting检测显示,CD47的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P〈0.05),使CD47 mRNA表达减少76%~82%,CD47蛋白表达减少77%;慢病毒转染细胞在48h后MTT检测细胞凋亡率明显提高(P〈0.01)。结论慢病毒介导的siRNA干扰CD47基因表达后,明显抑制了喉癌Hep-2细胞CD47的表达并且诱导了Hep-2凋亡。 展开更多
关键词 CD47 慢病毒载体 RNA干扰 hep-2细胞 基因沉默
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苦参碱对喉鳞癌细胞株Hep-2侵袭转移的影响 被引量:11
13
作者 李圆 周雪华 +1 位作者 刘亭彦 崔彩霞 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2012年第3期261-264,共4页
目的:研究不同浓度苦参碱对喉鳞癌细胞株Hep-2侵袭和转移的影响及其作用机制。方法:Hep-2细胞体外培养,经0g/L、0.1g/L、0.2g/L和0.3g/L苦参碱分别处理1h、8h及48h,细胞黏附实验检测细胞黏附力,细胞迁移实验检测细胞运动力,细胞侵袭实... 目的:研究不同浓度苦参碱对喉鳞癌细胞株Hep-2侵袭和转移的影响及其作用机制。方法:Hep-2细胞体外培养,经0g/L、0.1g/L、0.2g/L和0.3g/L苦参碱分别处理1h、8h及48h,细胞黏附实验检测细胞黏附力,细胞迁移实验检测细胞运动力,细胞侵袭实验检测细胞侵袭力,RT-PCR法检测Hep-2细胞MMP-2和MMP-9mRNA的表达。结果:不同浓度苦参碱与对照组比较,苦参碱能有效抑制Hep-2细胞的黏附力、运动力和侵袭力(P<0.01),且能下调Hep-2细胞MMP-2和MMP-9mRNA的表达(P<0.01)。结论:苦参碱能抑制Hep-2细胞的浸润转移能力,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9mRNA的表达使Hep-2细胞的黏附力、运动力和侵袭力下降有关。 展开更多
关键词 苦参碱 hep-2细胞 侵袭 转移 基质金属蛋白酶
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siRNA抑制cortactin基因表达对Hep-2细胞增殖和侵袭的影响 被引量:4
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作者 谭桂煌 曾龙武 +2 位作者 侯素平 张庆丽 谢海龙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期332-337,共6页
背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关。因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制co... 背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关。因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭的影响。方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、pSilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力。结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortactin含量为11.22%(P<0.01),增殖被抑制,克隆形成率降低为21.47%(P<0.01),迁移、侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:cortactin表达下调能抑制喉癌Hep-2细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 hep-2细胞 SIRNA CORTACTIN 增殖 侵袭
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氯丙嗪协同紫杉醇对Hep-2细胞的增殖抑制作用 被引量:3
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作者 冯青杰 徐艳萍 +1 位作者 辛丁 傅仲鹰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期124-126,共3页
目的:观察盐酸氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)的增殖抑制作用及其对细胞周期各时相的影响。方法:对数生长期Hep-2细胞分为单纯紫杉醇组(3.0、6.0和12.0mg·L-1)、氯丙嗪4.0mg·L-1)加紫杉醇(12.0mg·L-1... 目的:观察盐酸氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)的增殖抑制作用及其对细胞周期各时相的影响。方法:对数生长期Hep-2细胞分为单纯紫杉醇组(3.0、6.0和12.0mg·L-1)、氯丙嗪4.0mg·L-1)加紫杉醇(12.0mg·L-1)联合组和空白对照组(100mL培养液),应用MTT比色法和流式细胞术检测各组Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析单独及联合用药后Hep-2细胞的周期进程及凋亡率。结果:3.0、6.0和12.0mg·L-1单纯紫杉醇组Hep-2细胞增殖抑制率分别为14.0%、23.9%和36.7%,随紫杉醇浓度增加细胞增殖抑制率升高,三组间及组间两两比较差异均具有显著性(P<0.05);联合组Hep-2细胞增殖抑制率为46.3%,明显高于相同剂量单纯紫杉醇组(P<0.05);单纯紫杉醇组随其用药浓度的增加G1期细胞减少,S期和G2期细胞增多,与空白对照组比较凋亡率升高(P<0.05)。结论:在一定浓度下,盐酸氯丙嗪能够增强紫杉醇诱导Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期进程各时相变化和凋亡率,氯丙嗪与紫杉醇联合应用具有明显的协同效应。 展开更多
关键词 氯丙嗪 紫杉醇 hep-2细胞 细胞周期 细胞凋亡
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苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡研究 被引量:4
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作者 李莎 张思楠 +1 位作者 杨军 伍春莲 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1384-1389,1383,共7页
苦马豆素具有广泛的抗肿瘤作用和免疫调节作用。本研究对苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的作用及其机制进行研究。通过不同浓度的苦马豆素处理Hep-2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性;荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标... 苦马豆素具有广泛的抗肿瘤作用和免疫调节作用。本研究对苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的作用及其机制进行研究。通过不同浓度的苦马豆素处理Hep-2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性;荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标记检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测Bax和XIAP基因mRNA和蛋白质表达水平。在一定浓度范围内,苦马豆素抑制Hep-2细胞增殖,且呈剂量依赖性;荧光显微镜下细胞发生形态改变,并呈现典型的凋亡细胞特征;磷脂酰丝氨酸外翻加剧;线粒体膜电位逐渐下降;Bax的mRNA和蛋白质表达水平上升,XIAP的mRNA和蛋白质表达水平下降。苦马豆素通过调节细胞内Bax和XIAP的表达,并经线粒体信号途径诱导Hep-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 苦马豆素 hep-2细胞 细胞凋亡 线粒体途径
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内皮素拮抗剂抑制人源性喉癌Hep-2细胞VEGF-C体外表达的定量分析 被引量:3
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作者 林雁 尹芳 +5 位作者 袁莹 邹剑 刘锋 周鹏 刘世喜 张京晶 《昆明理工大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期71-74,共4页
通过影响人源性喉癌Hep-2细胞中血管内皮生长因子C(VEGF—C)表达,探讨内皮素拮抗剂(BQ-123)与喉癌淋巴转移的机制,为临床及基础研究提供相应的实验依据.体外培养人源性喉癌Hep-2细胞,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液... 通过影响人源性喉癌Hep-2细胞中血管内皮生长因子C(VEGF—C)表达,探讨内皮素拮抗剂(BQ-123)与喉癌淋巴转移的机制,为临床及基础研究提供相应的实验依据.体外培养人源性喉癌Hep-2细胞,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液中VEGF—C的含量;利用M1-r比色法,测定不同浓度的内皮素拮抗剂对人源性喉癌Hep-2细胞增殖的影响.实验中发现当浓度分别为20.0~150.0μg/mLBQ-123作用48h,对人源性喉癌Hep-2细胞增殖有显著抑制作用(P〈0.05);浓度分别为50.O~150.0μg/mLBQ-123对人源性喉癌Hep-2细胞VEGF—c蛋白分泌量有明显抑制活性作用(P〈0.05).BQ-123可以有效抑制人源性喉癌Hep-2细胞中VEGF—C体内的表达. 展开更多
关键词 内皮素拮抗剂 人源性喉癌hep-2细胞 VEGF-C 酶联免疫吸附测定法 MTT比色法
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粉防己碱对喉癌耐药细胞株Hep-2/ADM多药耐药逆转作用研究 被引量:6
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作者 叶琳 王驰 +1 位作者 谢明均 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1205-1208,共4页
目的探讨天然有效成分粉防己碱(tetrandrine,TET)对喉癌耐药细胞株Hep-2/ADM的多药耐药逆转作用及其可能机制。方法采用MTT法检测不同浓度粉防己碱对Hep-2/ADM细胞的增殖抑制效应,选取其无毒剂量;MTT法检测长春新碱(vincristine,VCR)对H... 目的探讨天然有效成分粉防己碱(tetrandrine,TET)对喉癌耐药细胞株Hep-2/ADM的多药耐药逆转作用及其可能机制。方法采用MTT法检测不同浓度粉防己碱对Hep-2/ADM细胞的增殖抑制效应,选取其无毒剂量;MTT法检测长春新碱(vincristine,VCR)对HEP-2和Hep-2/ADM细胞增殖的抑制作用及加用粉防己碱后的变化;采用流式细胞仪检测细胞内药物蓄积和外排程度以及细胞凋亡。结果1.5μg/ml及更低浓度的粉防己碱对Hep-2/ADM细胞无明显细胞毒性作用。加入1.0μg/ml和1.5μg/ml粉防己碱后,Hep-2/ADM对VCR的耐药逆转倍数分别为1.72和2倍。1.5μg/ml浓度的粉防己碱可提高VCR在Hep-2/ADM细胞内药物的蓄积,增强VCR诱导的Hep-2/ADM细胞凋亡。结论粉防己碱可以部分逆转Hep-2/ADM细胞的多药耐药,随药物浓度增加,逆转效果有可能增强,其逆转机制可能与抑制P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)外排功能和增强化疗药物诱导的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 粉防己碱 喉癌 hep-2/ADM细胞系 多药耐药
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lncRNA HOTAIR靶向miR-126激活RhoA/ROCK通路促进喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭与EMT 被引量:5
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作者 李登辉 蔡润茁 +1 位作者 朱丽明 陈冬 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第3期365-370,共6页
目的:探讨长链非编码RNA-Hox转录反义RNA(long non-coding RNA Hox antisense intergenic RNA,lncRNA HOTAIR)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:利用实时荧光定量P... 目的:探讨长链非编码RNA-Hox转录反义RNA(long non-coding RNA Hox antisense intergenic RNA,lncRNA HOTAIR)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测喉癌组织、癌旁组织和Hep-2细胞中lncRNA HOTAIR、微小RNA-126(microRNA-126,miR-126)的表达量;下调lncRNA HOTAIR表达,分别通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞侵袭实验和蛋白质印迹法(Western blot)检测Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT能力。利用miRcode分析HOTAIR的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA HOTAIR和miR-126之间的关系。同时上调lncRNA HOTAIR和miR-126的表达,检测lncRNA HOTAIR通过miR-126对Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT的影响。下调miR-126表达后,Western blot检测RhoA、ROCK蛋白的表达量。Y-27632作用细胞后,检测下调miR-126对Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果:在Hep-2细胞和喉癌组织中lncRNA HOTAIR的表达明显上调(P<0.01),miR-126表达明显下调(P<0.01)。下调lncRNA HOTAIR表达后,抑制了Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT;lncRNA HOTAIR与miR-126具有靶向和负调控关系;下调miR-126表达后,激活了Hep-2细胞内RhoA/ROCK通路,并且促进了Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT。结论:上调lncRNA HOTAIR通过靶向miR-126激活RhoA/ROCK通路促进喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭与EMT。 展开更多
关键词 lncRNA HOTAIR MIR-126 RhoA/ROCK通路 hep-2细胞 增殖 侵袭 EMT
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OPN在喉癌组织中的表达变化及LV-shOPN对喉癌Hep-2细胞侵袭转移的影响 被引量:2
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作者 陈剑秋 朱敏辉 +4 位作者 邱晓霞 夏思文 刘达 陈世彩 郑宏良 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第42期8-10,共3页
目的观察人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中骨桥蛋白(OPN)的表达变化及慢病毒shOPN对喉癌Hep-2细胞侵袭转移的影响。方法采用免疫组化SP法,检测44例LSCC及癌旁正常组织中的OPN。干扰OPN慢病毒载体(LV-shOPN)转染Hep-2细胞,Western blot检测该... 目的观察人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中骨桥蛋白(OPN)的表达变化及慢病毒shOPN对喉癌Hep-2细胞侵袭转移的影响。方法采用免疫组化SP法,检测44例LSCC及癌旁正常组织中的OPN。干扰OPN慢病毒载体(LV-shOPN)转染Hep-2细胞,Western blot检测该细胞其中的OPN,MTT法检测Hep-2细胞增殖活性,Transwell小室实验检测Hep-2细胞的侵袭力。结果 LSCC组织和癌旁正常组织中OPN阳性表达率分别为75.0%(33/44)、13.6%(6/44),两者相比,P<0.01;OPN的表达与LSCC颈部淋巴结转移、临床分期、病理组织学分级有关(P均<0.01)。LV-shOPN转染后Hep-2细胞中OPN蛋白表达下降、细胞增殖活性及侵袭力降低(P均<0.05)。结论 OPN在喉癌组织中的表达高于癌旁正常组织,可能参与了喉癌的发生、发展和转移;LV-shOPN能够有效抑制Hep-2细胞的生长和侵袭转移。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 喉肿瘤 hep-2细胞 RNA干扰 肿瘤转移
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