肿节风注射液抗小鼠肝癌Hep-A-22的作用及毒性

目的 :研究肿节风注射液 (ZJF)抗小鼠肝癌Hep A 2 2的作用及毒性。方法 :建立在体荷瘤小鼠肝癌Hep A 2 2模型 ,测定ZJF的抑瘤率和体重、胸腺指数、脾指数和给药前后外周血白细胞的影响 ,同时研究ZJF对人肝癌Hep A 2 2细胞株生长的抑制作用。结果 :ZJF具有明显的抗肿瘤作用 ,结论 :ZJF体内、外对小鼠肝癌Hep A 2 2均具有抗肿瘤作用 。

热疗与化疗联合作用Hep-A-22荷瘤小鼠的实验观察

目的 观察NRL-001型内生场热疗系统与化疗联合应用对Hep-A-22荷瘤小鼠的治疗效果。方法 用NRL-001热疗系统对实验组动物瘤体加热,肿瘤内部温度控制在43℃～44℃之间、并计算出加热前,处死时肿瘤体积。称肿瘤重量,计算出抑瘤率。结果 热疗两次后肿瘤生长受到明显抑制,热疗组抑瘤率65.6％,热疗加化疗组抑瘤率89.1％,热疗组和热疗加化疗组瘤重与对照组瘤重比较均差异显著(P<0.01)。结论 NRL-001型热疗系统可抑制肿瘤生长,化疗与热疗联合应用产生最佳的治疗效果。

黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制作用

目的:研究黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞增殖及S180和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法:将S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞分别加入终浓度为12.5、25.0、50.0及100.0 mg.L-1的黄芩总黄酮,采用四氮唑盐衍生物(XTT)、MTT法测定细胞增殖抑制率;将S180和Hep-A-22荷瘤小鼠分为空白对照组、环磷酰胺(CTX)阳性药对照组(30 mg.kg-1,隔日给药)、黄芩总黄酮大(200 mg.kg-1.d-1)、中(100 mg.kg-1.d-1)和小剂量组(50 mg.kg-1.d-1),连续给药15 d后剥离肿瘤,称取瘤重,计算其肿瘤生长的抑制率。观察各给药组Hep-A-22荷瘤小鼠连续用药10 d后生命延长率。结果:黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的抑制率随给药浓度的增加而显著升高,其IC50值分别为16.04、17.74和9.05 mg.L-1;与空白对照组比较,黄芩总黄酮大、中、小剂量组S180、Hep-A-22荷瘤小鼠的肿瘤重量均明显低于空白对照组(P<0.05或P<0.01),随给药剂量的增加,其肿瘤抑制率增加(P<0.05或P<0.01)。黄芩总黄酮大、中、小剂量组的Hep-A-22荷瘤小鼠的平均生存天数均显著高于空白对照组(P<0.01),其生命延长率较空白对照组显著增加(P<0.01)。结论:黄芩总黄酮对S180、Hep-A-22和Bcap-37肿瘤细胞的增殖及S180和Hep-A-22荷瘤小鼠肿瘤生长均具有抑制作用。

特异性RNA诱导的CTL对Hep-A-22肿瘤细胞的特异性杀伤作用研究

目的 检测特异性核糖核酸诱导的CTL对肿瘤的特异性杀伤作用。方法 应用Hep—A—22小鼠肝癌细胞提取的核糖核酸对小鼠进行主动特异性免疫治疗,检测机体对肿瘤的免疫及抑制作用。结果 实验动物淋巴细胞对ConA增殖呈明显促进,抑瘤作用较明显。结论 特异性RNA能刺激机体特异性抗体的产生能力,可作为特异性抗原对肿瘤进行特异性免疫治疗。

中药仙龙GS对小鼠Hep-A-22移植性肝癌的抑制作用

目的 中药仙龙GS对Hep—A—22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究。方法 对Hep—A—22荷瘤小鼠进行为期10天的灌胃给药后取瘤称重,通过抑瘤率判断仙龙GS对小鼠移植瘤的抑制作用。结果 当剂量为16.7g/kg和25g/kg时,其抑瘤率分别为55％和41％。结论 中药仙龙GS具有一定的临床应用价值。

抗瘤酮A_(10)对肝腹水Hep-A-22细胞的抑制活性的研究

通过抗瘤酮A10 对肝腹水Hep A 2 2细胞的抑制活性的研究 ,证实了它的抑瘤性并初步证实其作用方式。主要利用噻唑蓝 (MTT法 )测定药物的抗癌作用 ,并观察抗瘤酮A10 对肝腹水型荷瘤小鼠的生命延长作用及对实体瘤生长的抑制作用。并进一步用小鼠碳末廓清免疫指标测试及抗瘤酮A10 与化疗药物 5 Fu相配伍 ,初步证明其作用方式。抗瘤酮A10 体外细胞实验显示其细胞毒性很低 ,对小鼠的生命延长作用和抑瘤作用十分明显 ,对机体的免疫能力有明显提高 ,并初步证实它是以生物反应调节剂形式起作用的。

Preparation and Inhibitory Effects of 20(S)-Ginsenoside Rh_2 on Hep-A-22 Cells

A modified method of preparing 20（S）-ginsenoside Rh2（G-Rh2） and the inhibitory effect of 20（S）-ginsenoside Rh2 on Hep-A-22 cells were investigated. The total saponins and strong alkali were dissolved in glycerol at the atmospheric pressure, and the degradation was performed at a high temperature. After G-Rh2 had been isolated and purified, MTT（methyl thiazolyl tetrazolium） assay was applied to evaluating the effect of 20（S）-ginsenoside Rh2 on the cells viability and morphological changes were observed. It was shown that 20（S）-ginsenoside Rh2 can reduce Hep-A-22 cells viability in dose-dependent manner and the cells took on cell shrinkage, membrane blebbing, chromosomal condensations, especially under the higher concentrations of it. In conclusion, 20（S）-ginsenoside Rh2 can be prepared effectively that not only decreases viability but also induces the apoptosis of Hep-A-22 cells.

肿瘤细胞膜多肽诱导的CTL对Hep—A—22细胞特异性杀伤的研究

目的 应用经诱导和提取的小鼠肝癌Hep—A—22细胞株膜外抗原多肽在整体条件下观察对肿瘤的特异性免疫情况。方法 应用液闪仪检测免疫后小鼠胸腺和脾淋巴细胞对ConA的转化率及测量整体条件下肿瘤生长情况。结果 淋巴细胞对ConA发生转化率增高,同时诱导体内淋巴细胞特异性杀伤Hep—A—22细胞的活性明显增强,且几种组分的抗原多肽均能产生不同的诱导杀伤活性。经免疫后的小鼠肿瘤明显受到抑制。结论 提取的Hep—A—22肿瘤细胞膜外抗原多肽可作为肿瘤抗原进行有效的肿瘤特异性免疫,本研究为肿瘤特异性免疫治疗提供了新途径。

不同种类细胞培养和冻存方法的改进

目的 探讨不同细胞冻存与培养条件对保存肿瘤细胞株的影响。方法 快速冻存法、慢速冻存法,结果 (1)10％FCSRPMI1640培养基即可满足小鼠肝癌细胞株Hep—A—22细胞的培养基要求,而人肝癌细胞株QGY—7703细胞对RPMI1640培养基的要求较高,我们摸索需要15％—20％的FCS RPMI1640培养基方能满足其要求。(2)采用快速冻存法有利于肿瘤细胞株的复苏。结论 不同种类肿瘤细胞株由于其增殖能力不同所使用培养基所含成份应有所区别:快速冻存方法对肿瘤的细胞株保存优于传统的慢速冻存法。

灰树花提取物的体内抗肿瘤及免疫活性研究

【目的】研究灰树花不同极性溶剂提取物在小鼠体内的抗肿瘤和机体免疫活性。【方法】按极性从低到高依次采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇加热回流提取灰树花子实体,获得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、丙酮提取物和甲醇提取物。70只SPF级昆明小鼠(雌雄各半)分为7组,每组10只,分别标记为空白组、模型组、CTX阳性组及灰树花子实体石油醚、乙酸乙酯、丙酮及甲醇提取物组,小鼠接瘤后第2天开始给药,空白组不给药及生理盐水,模型组给予生理盐水,CTX阳性组隔天腹腔注射CTX 20mg/kg,石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇提取物组每天灌胃相应的灰树花子实体提取物,抑瘤10d。通过检测肿瘤抑制率,脏器指数,血清中影响因子干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平等指标及肿瘤切片观察,研究灰树花子实体不同极性溶剂提取物对Hep-A-22荷瘤小鼠体内抗肿瘤、免疫活性及抗氧化作用。同时,通过小鼠耳肿胀试验和腹腔巨噬细胞吞噬试验进一步探究灰树花子实体提取物的免疫活性作用。【结果】各给药组均具有抑制肿瘤生长作用,其中灰树花子实体甲醇提取物组抑瘤效果最佳(52.31%),与模型组相比有极显著性差异(P<0.01),该组血清中IL-2、INF-γ和SOD含量极显著增加(P<0.01),CAT含量显著增加(P<0.05),并与抑制肿瘤具有相关性。通过HE染色和荧光染色后的肿瘤细胞观察,发现肿瘤细胞出现大面积坏死、消融等现象;各给药组对小鼠二甲苯耳肿胀均有抑制效果,其中甲醇组和乙酸乙酯组效果较好,与空白组差异性极显著(P<0.01)。【结论】灰树花甲醇提取物和乙酸乙酯提取物具有良好的抑制肿瘤生长效果。甲醇提取物组能够显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性,从而提高机体免疫活性,并与其抗肿瘤作用具有相关性。