不同高温对HepA细胞的杀伤作用

目的 :研究不同温度对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 :将肝癌腹水型瘤株HepA细胞分为 37℃、4 0℃、4 5℃和 5 0℃ 4个温度组 ,每组又分为 15min、30min、1h和 2h 4个时间亚组。经相应的温度和时间处理后 ,以MTT比色法检测细胞活性。结果 :不同温度对HepA细胞的杀伤作用有所不同。在一定的温度下 ,伴随作用时间的延长 ,细胞死亡率也随之增加。结论 :随着温度的增高和作用时间的延长 ,其对HepA细胞的杀伤作用逐渐增强。4 0℃作用较长时间后 。

加热诱导肝癌细胞系HepA凋亡的研究

用细胞培养结合流式细胞仪检测 ,观察加热不同温度、不同作用时间对肝癌细胞系 Hep A的细胞凋亡的影响。结果发现 4 4℃时处理 1h和 2 h细胞凋亡最明显 ,经方差分析有显著意义 (P<0 .0 5 ) ,更高的温度和更长的作用时间都不能使凋亡率上升。这一结果说明 ,加热处理能诱导肿瘤细胞凋亡 ,但对于不同的肿瘤细胞而言 ,可能存在不同的热疗最佳条件 。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞p53基因表达的影响

目的 :为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤组织 p5 3基因表达水平的影响。方法 :用酶联免疫反应测定 p5 3多克隆抗体。结果 :荷瘤对照组 p5 3基因表达较空白对照组增加非常显著 (p <0 .0 1 ) ,而树舌多糖GF组较荷瘤对照组 p5 3基因表达减少非常显著 (p <0 .0 1 ) ,较正常组织有显著差异 (p <0 .0 5 ) ,其 p5 3平均表达量较空白对照组低 ;猪苓多糖对照组较荷瘤对照组 p5 3基因表达水平减少非常显著 (p <0 .0 1 ) ,接近空白对照组 (p >0 .0 5 )。结论 :初步认为树舌多糖GF可能直接作用 (或通过癌基因 )影响HepAcellsp5 3基因的表达频率。

树舌多糖对小鼠HepA癌细胞3H-TdR和(6-3H)一Glucose掺入的影响

就树舌多糖ＧＦ抗小鼠ＨｅｐＡ癌细胞作用机制方面做７初步研究，结果发现树舌多糖６Ｆ可抑制Ｈｅｐ。Ａ细胞掺入３Ｈ－ＴｄＲ（Ｐ＜０．０１）和抑制其对［６－３Ｈ］－Ｇｌｕｓｃｏｓ掺入（Ｐ＜０．０１），从而影响ＨｅｐＡ细胞的ＤＮＡ合成和糖代谢。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因表达的影响

目的为探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、C-myc基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因表达的影响

目的探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-rasmRNA量及N-Ras蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论初步认为树舌多糖GF可通过降低N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

SDS-PAGE法分析树舌多糖GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响。方法:昆明种小鼠随机分为三组:正常组、肿瘤组和树舌多糖组。肿瘤组和树舌多糖组接种后,各组肌肉注射给药,正常组和肿瘤组给予生理盐水,树舌多糖组给予树舌多糖GF。应用SDS-PAGE技术检测各组小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白的表达。结果:正常组共获得清晰可辨的蛋白带16条,肿瘤组24条条带,树舌多糖组18条。与正常组相比,肿瘤组三条蛋白带表达下调,11条蛋白带表达上调;树舌多糖GF可以使肿瘤细胞三条表达下调的蛋白带和8条表达上调的蛋白带恢复正常;并使在正常组和肿瘤组都存在的15号蛋白带缺失。结论:树舌多糖GF可以影响小鼠HepA瘤细胞多种可溶性蛋白的表达,这种影响很可能与树舌多糖GF的抗肿瘤机制有关。

小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响

目的:探明小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响。方法:昆明种小鼠随机分为三组:肿瘤组、树舌多糖组和阴性对照组。肿瘤组、树舌多糖组接种后各组肌肉注射给药,正常组和肿瘤组给与生理盐水,树舌多糖组给与树舌多糖GF;采用超速离心技术制备、SDS-PAGE分离细胞可溶性蛋白;Western blot和Dot blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果:树舌多糖组检测PTEN结果为阳性,肿瘤组检测PTEN结果为阴性。结论:树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc蛋白表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、c-myc蛋白表达的影响。方法:运用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc蛋白的表达量。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc蛋白的表达,抑制He-pA瘤细胞的增殖。

原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因mRNA表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras mRNA水平的影响。方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras mRNA丰度的作用。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P(0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对HepA癌细胞c-MycmRNA丰度的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对HepA瘤细胞c-MycmRNA丰度的影响。方法:接种HepA瘤后的小鼠随机分为3组:模型组、树舌多糖组和猪苓多糖组,树舌多糖组和猪苓多糖组小鼠分别注射树舌多糖GF和猪苓多糖。应用原位杂交技术检测各组小鼠HepA癌细胞中c-MycmRNA的丰度。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中c-Myc表达量均显著低于模型组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组间无显著性差异。结论:树舌多糖GF抑制c-Myc基因的转录可能是其抗肿瘤的作用机制之一。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞C-myc基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织C-myc基因表达的影响。方法:应用免疫组化和原位杂交方法检测小鼠HepA瘤细胞中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达情况。结果:与荷瘤组比较,树舌多糖组、猪苓多糖组中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达量均明显降低(P﹤0.01),其中树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低C-myc mRNA量及C-myc蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

桦菌芝多糖对HepA小鼠抑瘤率、HepA瘤细胞N-ras蛋白表达、SDS-PAGE血清蛋白组分的影响

目的:观察桦菌芝多糖对移植型腹水型肝癌(HepA)小鼠抑瘤率、HepA瘤细胞N-ras蛋白表达、SDS-PAGE血清蛋白组分的影响,为桦菌芝多糖抑瘤作用机制的揭示及临床应用提供实验依据。方法:将完整的肿瘤组织称重,计算抑瘤率;用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中Ras蛋白的表达;通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,观察桦菌芝多糖对HepA瘤血清蛋白组分的影响。结果:桦菌芝多糖对HepA小鼠抑瘤率为39.75%;桦菌芝多糖组、猪苓多糖组Ras蛋白的表达量均明显低于阴性对照组(P<0.05);桦菌芝多糖对HepA小鼠血清蛋白组分有影响,在加样量相等的情况下,可使荷瘤阴性对照组与正常组比较在分子量140000处的特异深染组分变浅,并与正常组相近,说明桦菌芝多糖对此改变有恢复作用。结论:桦菌芝多糖对小鼠HepA瘤有明显的抑瘤效应,可降低Ras蛋白的表达,抑制HepA瘤细胞的增殖,使HepA小鼠血清异常蛋白组分(Mr140000)减少并趋于正常。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞p16基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞 p16基因表达的影响。本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定细胞中p16蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果表明 :树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,p16表达增加均非常显著 (P <0 .0 1) ,树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1)。因此可初步认为使抑癌基因p16表达增强 ,是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。树舌多糖GF作用后小鼠HepA瘤细胞中 p16、Rb基因表达增强 ,共同作用可启动细胞周期的负反馈调节 ,细胞周期的负调节增强 ,从而阻止无限制从G1期进入S期 ,抑制细胞增殖失控 ,起到抗肿瘤作用。

Hepa1-6细胞的最佳培养条件研究

[目的]探索Hepa1-6细胞的最佳培养条件。[方法]以小鼠Hepa1-6肝癌细胞为材料,采用正交试验设计研究RPMI1640和DMEM2种不同培养基及细胞接种密度、血清浓度、双抗浓度、D-Hanks漂洗次数、胰蛋白酶浓度和消化时间6个不同因素对Hepa1-6传代培养的影响;根据细胞在6个时间点的生长状况评分,筛选出Hepa1-6细胞的最佳培养条件。[结果]Hepa1-6细胞在含有20%血清的RPMI-1640培养基,接种密度为4×104个/cm2,100U/ml的双抗浓度,贴壁率在90%以上时,D-Hanks漂洗1次,0.5%胰蛋白酶消化2min,传代效果最好。[结论]通过正交设计筛选,为Hepa1-6细胞体外培养探索出最佳培养条件。

原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因mRNA表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras、C-myc mRNA水平的影响。方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras、C-myc mRNA丰度的影响。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P(0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras、C-myc基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Ras蛋白表达的影响

研究应用免疫组化技术对HepA瘤细胞中Ras蛋白表达量进行分析 ,以进一步探讨树舌多糖抗肿瘤的机制。目的 :为探明树舌多糖GF对HepA瘤组织Ras蛋白表达的影响。方法 :用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中Ras蛋白的表达。结果 :树舌多糖组、猪苓多糖组中Ras蛋白的表达量均显著低于模型组 (P <0 .0 1) ,树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论 :初步认为树舌多糖GF可通过降低Ras蛋白的表达 ,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

双向电泳法分析树舌多糖GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响。方法:昆明种小鼠随机分为2组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10天,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。应用2-DE技术检测各组小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白的表达。应用PDQuest软件分析电泳结果,找出差异表达的蛋白质点。根据近似等电点和分子量的数值进行数据库和文献综合检索,推测差异点的蛋白质身份。结果:肿瘤组共获得蛋白质点101个,树舌多糖组85个;其中54个蛋白点为肿瘤组特异表达,38个蛋白点为树舌多糖组特异表达;肿瘤组与树舌多糖组共表达的蛋白质点中,有14个点表达量相差两倍以上。第1098号斑点认为可能是抑癌基因PTEN的产物。结论:树舌多糖GF可以影响小鼠HepA瘤细胞多种可溶性蛋白的表达,这种影响很可能与树舌多糖GF的抗肿瘤机制有关;其抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Rb基因表达的影响

目的 探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达的影响。方法 本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定细胞中Rb蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果 树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,差异均非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF、猪苓多糖能促使HepA瘤细胞中Rb基因表达明显增强 ;树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF更能明显增强Rb基因表达 ,优于猪苓多糖。结论 树舌多糖GF抗瘤作用机理之一是作用于抑癌基因Rb并使之表达增强。