新疆软紫草提取物对HepG2细胞凋亡的影响及其抗小鼠原位肝癌的作用

目的研究新疆软紫草根[Arnebia euchroma(Royle)Johnst,AE]不同提取物诱导人肝癌细胞株(HepG2)的凋亡作用,并通过小鼠原位肝癌模型验证其抗肝癌作用,初步探究AE提取物的抗肝癌作用。方法首先采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染色法检测AE各提取物对HepG2细胞的抗增殖以及促凋亡作用,采用Western blot法检测了细胞中Bcl-2凋亡家族蛋白的表达水平,综合上述实验结果,筛选出促凋亡作用明显的提取物进行抗小鼠原位肝癌的实验,评价了给药前后原位肝癌小鼠的脏器指数、肝功能指标及组织切片。结果随着AE提取物极性的降低,对HepG2细胞抗增殖、促凋亡作用增强,AE石油醚部位(AEP)抗增殖和诱导凋亡的作用最明显;在AEP剂量为1.56μg·L^(-1)时,Bcl-2蛋白水平明显下降(P<0.05),且呈剂量依赖性,Bad蛋白表达水平在AEP剂量为3.125μg·L^(-1)时明显上调(P<0.05)。动物实验验证了AEP可以改善肝功能,减缓肝癌发展进程的作用。结论研究表明AEP对肝细胞癌的发展具有一定的抑制作用,发挥该作用与调节Bcl-2家族蛋白有关。

靶向血管内皮生长因子受体2微泡造影剂评价肿瘤血管生成的实验研究

目的:探讨靶向血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)微泡造影剂用于肿瘤血管生成的超声分子成像。方法:用生物素-亲和素桥接法制备靶向VEGFR2超声微泡,免疫荧光法检测微泡与抗体的结合。建立裸鼠Hep G2肝癌皮下种植瘤模型,随机分成靶向组(n=5)和非靶向组(n=5),经尾静脉团注相同剂量靶向微泡或非靶向微泡,录像并绘制时间-强度曲线(time-intensity curve,TIC);注入造影剂5 min后利用高声压爆破技术清除肿瘤内部微泡,比较爆破前后两组造影图像灰阶强度的下降,估计靶向微泡在体内与靶点的结合能力。结果:靶向造影剂和非靶向造影剂均表现为裸鼠皮下瘤的显著增强,但TIC显示两组间曲线下面积差异有统计学意义[(3 940.4±200.9)dB·s vs.(2 796.8±452.3)dB·s,P=0.001];微泡爆破后靶向组灰阶强度降低显著大于非靶向组[(7.61±2.20)dB vs.(3.74±1.40)dB,P=0.010]。结论:靶向VEGFR2微泡造影剂在体内能显著增强肿瘤血管成像,可作为监测肿瘤血管生成的较可靠分子影像学探针。