基于NKG2D及其配体探讨清热解毒方改善肝癌小鼠免疫微环境及抗肿瘤作用

目的:探讨清热解毒方对小鼠肝癌模型的抗肿瘤作用和淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞家族2成员D(NKG2D)及其配体MULT1的影响。方法:建立小鼠H22肝癌模型,观察清热解毒方的抗肿瘤效应。采用流式细胞术检测小鼠外周血淋巴细胞亚群和肿瘤组织、瘤旁NKG2D及其配体MULT1表达情况的变化。结果:清热解毒方有一定抗肿瘤作用,且能改善荷瘤小鼠的体重降低;清热解毒方对小鼠外周血淋巴细胞亚群有一定影响,中药组较对照组B细胞、CD8^(+)T细胞比例降低,CD3^(+)T细胞比例、CD4^(+)T/CD8^(+)T增加(P<0.05);小鼠肝癌模型中,癌旁组织中NKG2D和MULT1阳性率均高于肿瘤组织,中药干预后,肿瘤组织和癌旁组织的NKG2D和MULT1阳性率均显著高于对照组(P<0.05)。结论:清热解毒方抗肿瘤机制可能与增强NKG2D及其配体介导的抗肿瘤免疫反应,调节T淋巴细胞亚群平衡,改善免疫微环境有关,而NKG2D及其配体系统可作为肿瘤治疗及预后评估的潜在靶点。

荨麻多糖提取及其对HepG_(2)细胞的降糖作用研究

该文以荨麻为原材料,通过单因素试验和响应面试验优化半仿生提取荨麻多糖工艺。采用α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制实验,测定荨麻多糖的降糖作用。通过构建胰岛素抵抗HepG_(2)细胞(insulin resistant HepG_(2),IR-HepG_(2))模型,测定甘油三酯(triglyceride,TG)、己糖激酶(hexokinase,HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、糖原含量来探讨荨麻多糖的降糖作用。结果表明,当pH_(1)3、pH_(2)8、料液比1∶16(g∶mL)、提取温度65℃、提取时间77 min时,荨麻多糖的得率为7.04%。α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制实验表明,荨麻多糖可通过抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶来表现降糖作用。细胞实验表明,荨麻多糖可通过影响IR-HepG_(2)细胞的葡萄糖消耗来减轻胰岛素抵抗;通过提高HK、PK含量,促进糖原合成,降低TG含量来调节糖脂代谢,从而发挥降糖作用。综上所述,荨麻多糖具有较强降糖活性,为将其应用于糖尿病患者辅助功能食品提供理论依据。

原发性肝癌患者TACE术后Th1/Th2细胞因子、VEGFR水平变化及其临床意义

目的探究原发性肝癌患者经肝动脉插管化疗栓塞术(TACE)治疗后Th1/Th2细胞因子、血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平变化及其临床意义。方法选取接受TACE术治疗的原发性肝癌患者92例,根据治疗效果将完全缓解、部分缓解者纳入有效组(n=50),将疾病进展、疾病稳定者纳入无效组(n=42)。比较2组患者的一般临床资料及术前、术后血清Th1/Th2细胞因子水平[白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-18(IL-18)]、VEGFR水平变化,采用Logistic回归模型进行分析上述指标与疗效的相关性,并通过ROC曲线预测分析上述指标术后水平对疗效的预测效能,比较各指标术后不同水平患者的无进展生存期差异。结果术后2组患者的IL-2、IL-4和VEGFR均较术前下降,且有效组显著低于无效组(P<0.05);术后2组患者的IL-18均较术前显著上升,且有效组显著高于无效组(P<0.05)。IL-2、IL-4、IL-18和VEGFR均与临床疗效具有显著相关性(P<0.05),ROC曲线显示,IL-2、IL-18、VEGFR的AUC值均有评估价值(P<0.05),而IL-4的ROC曲线AUC值评估价值不高(P>0.05)。IL-2、VEGFR高水平患者平均无进展生存期显著短于IL-2、VEGFR低水平患者(P<0.05),IL-18低水平患者无进展生存期显著短于IL-18高水平患者(P<0.05)。结论原发性肝癌患者在TACE术后Th1/Th2细胞因子免疫平衡得以纠正,VEGFR水平表现出下降,其中血清IL-2与VEGFR水平均与疗效及生存期密切相关,可在临床疗效及预后评估中提供参考。

基于生信分析探讨KMT2家族调节肝癌微环境免疫细胞浸润特性研究

目的探讨组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2(KMT2)家族在肝癌微环境免疫细胞浸润中的作用。方法利用多种数据库探究KMT2家族在肝癌中的表达水平、预后价值及与微环境免疫细胞浸润的相关性。结果KMT2家族在肝癌组织中的表达水平显著上调,并与患者不良预后相关。KMT2家族与肿瘤微环境(TME)免疫细胞浸润水平及几乎所有免疫检查点(ICP)基因密切相关。结论KMT2家族在肝癌中的表达水平显著上调,且在TME免疫细胞浸润中发挥重要作用,具有成为肝癌免疫治疗候选靶点的潜在价值。

尼美舒利与阿霉素联合应用对肝癌HepG_2细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨尼美舒利(n im esu lide,NIM)联合阿霉素(adriamyc in,ADM)对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法采用MTT比色法检测药物的生长抑制作用,应用金正均法判断两药的相互作用,吖啶橙荧光染色观察细胞的形态学改变,流式细胞仪(flow cytom etry,FCM)检测细胞凋亡率。结果MTT结果显示NIM(25、50、100μmol.L-1)与ADM(0.156,0.313,0.625 mg.L-1)联合应用对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制均有不同程度的协同作用(q>1.15),联合用药组与ADM各单药组相比差异有显著性(P<0.01)。吖啶橙荧光染色可见典型的凋亡形态学特征。FCM检测凋亡显示NIM 100μmol.L-1和ADM2.5 mg.L-1单独及联合应用48 h后DNA直方图上均出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,联合用药组凋亡率(19.6%)明显高于各单独用药组(2.48%和10.6%)。结论NIM与ADM联合应用具有协同抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖与诱导其凋亡作用。

没食子鞣质,1,3,4-三-O-没食子酰基-6-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖,抑制人肝癌HepG_2细胞的增殖和调控miRNA的表达(英文)

目的 miRNA在细胞的增殖,分化和凋亡中起重要作用。1,3,4-三-O-没食子酰基-6-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖(BJA32515)是从日本蛇菰中分离的天然多酚化合物,该化合物对肿瘤细胞的增殖和miRNA的影响未见报道。本文旨在研究BJA32515对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用以及对miRNA表达的影响。方法采用CCK-8的方法检测HepG2细胞的增殖;用流式细胞法检测HepG2细胞的凋亡;采用miRNA芯片分析方法测定HepG2细胞的miRNA表达以及用RT-PCR的方法验证miRNA的表达。结果 BJA32515以时间和剂量依赖的方式抑制HepG2细胞的增殖,并促进细胞的凋亡。miRNA芯片结果显示,BJA32515能诱导HepG2细胞33个miRNA的表达上调以及59个miRNA的下调。RT-PCR结果也证实BJA32515可诱导let-7a和miR-29a的上调以及miR-373和miR-197的下调,与芯片分析的结果一致。结论BJA32515抑制HepG2细胞增殖的作用机制与miRNA的表达调控有关。

红枣多糖对人肝癌HepG_2细胞的抑制作用

目的研究红枣多糖对体外培养肝癌细胞增殖的抑制作用并初步探究其可能的作用机理。方法采用MTT法测定红枣多糖对体外培养的人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用;流式细胞术检测红枣多糖对人肝癌细胞HepG2周期和凋亡的影响;Real time RT-PCR检测红枣多糖对人肝癌细胞HepG2中Bcl-2和caspase3mRNA表达的影响。结果 MTT检测发现随着药物浓度的增高OD值呈现梯度递减,红枣多糖对HepG2的IC50=13mg/mL,最高浓度40mg/mL下所得最大抑制率为68.79%;流式细胞仪检测细胞凋亡结果可见早期凋亡率随药物浓度的增加而变大;流式细胞周期分析结果可见G0-G1期细胞数逐渐增多,S期细胞数有下降趋势,并有剂量依赖性;Real time RT-PCR检测发现Bcl-2凋亡抑制基因mRNA表达随药物浓度增高而降低,而凋亡关键基因caspase-3mRNA的表达随药物浓度增高而升高。结论红枣多糖对体外培养的肝癌细胞增值具有抑制作用,将肝癌细胞HepG2阻滞于G1期,并通过下调Bc 1-2而上调caspase-3mRNA表达诱导HepG2细胞凋亡。

榄香烯或热休克对人肝癌细胞HepG_2 HSP70膜表达及多种HSP基因表达的影响

目的 :研究榄香烯或热休克对人肝癌细胞HepG2 HSP70膜表达及多种HSP基因表达的影响。方法 :免疫荧光和FCM观察榄香烯 (5 0 μg ml,1h)或热休克 (42℃ ,1h)处理后肿瘤细胞HSP70的膜表达 ,放线菌素D阻断基因转录。应用人类基因表达谱芯片分析经榄香烯或热休克处理的人肝癌细胞HepG2 多种热休克蛋白基因及与热休克蛋白调控相关基因表达谱的改变。结果 :榄香烯或热休克处理 1h后 ,肿瘤细胞膜表面HSP70的表达均有增高 ,而以榄香烯处理为明显 ,放线菌素D的加入在两种处理中均增高了HSP70膜表达的阳性率。两种处理均使细胞的HSP70HP(EnhancerProtein)基因表达增高 ,而以热休克处理为更明显 ,HSPA2的表达均有所下降 ,也以热休克处理更明显 ,HSF1基因在热休克处理为上调 ,而在榄香烯处理则为下调 ,与肿瘤免疫密切相关的HSP70、HSP72、HSP75及HSP90、gp96基因的表达则没有变化。结论 :榄香烯较热休克处理早期能更多地促进HepG2 细胞HSP70的膜表达 ,其机制可能是与其改变胞内已存在的HSP70的分布 ,和 或促进HSP70mRNA的翻译有关。两种处理均能改变与HSPs调控相关基因的表达 ,并可引起HSPA2基因表达下调。

基于PI3K/AKT信号通路探讨牛磺酸棉酚诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制

目的基于磷脂酰肌醇⁃3⁃激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路探讨牛磺酸棉酚诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制。方法(1)以不同浓度(0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL、125μg/mL、150μg/mL)牛磺酸棉酚干预肝癌HepG2细胞24 h后,采用CCK⁃8法检测细胞存活率,并计算牛磺酸棉酚对肝癌HepG2细胞的半数抑制浓度,筛选牛磺酸棉酚的干预浓度。(2)采用0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL牛磺酸棉酚(分别设为0μg/mL牛磺酸棉酚组、25μg/mL牛磺酸棉酚组、50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组)干预肝癌HepG2细胞24 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,采用实时荧光定量PCR检测B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl⁃2)、Caspase⁃3、PI3K、AKT的mRNA表达水平,采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl⁃2、Caspase⁃3和PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、磷酸化PI3K(p⁃PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p⁃AKT)的蛋白表达水平。结果(1)与0μg/mL牛磺酸棉酚相比,经25μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL、125μg/mL、150μg/mL牛磺酸棉酚干预后,肝癌HepG2细胞存活率降低(P<0.05),牛磺酸棉酚干预肝癌HepG2细胞24 h的半数抑制浓度为108μg/mL,因此后续实验选择25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL作为牛磺酸棉酚的干预浓度。(2)与0μg/mL牛磺酸棉酚组相比,25μg/mL牛磺酸棉酚组、50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组肝癌HepG2细胞早期凋亡率及总凋亡率升高,G0/G1期细胞比例上调(P<0.05);与0μg/mL牛磺酸棉酚组相比,50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组肝癌HepG2细胞晚期凋亡率升高,G2/M期细胞比例下降(P<0.05)。与0μg/mL牛磺酸棉酚组相比,50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组肝癌HepG2细胞Bax、Caspase⁃3 mRNA和蛋白的表达水平上调,Bcl⁃2 mRNA和蛋白的表达水平下调(P<0.05);与0μg/mL牛磺酸棉酚组相比,25μg/mL牛磺酸棉酚组、50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组肝癌HepG2细胞PI3K、AKT mRNA的表达水平下调,50μg/mL牛磺酸棉酚组、100μg/mL牛磺酸棉酚组肝癌HepG2细胞p⁃PI3K、AKT、p⁃AKT蛋白的表达水平下调(P<0.05)。结论牛磺酸棉酚可以通过抑制PI3K/AKT信号通路的活化,上调Bax、Caspase⁃3的表达,下调Bcl⁃2的表达,从而抑制肝癌HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。

一种新的多酚化合物BJA32531抑制人肝癌HepG_2细胞的增殖和调控miRNA的表达

目的:研究从日本蛇菰中分离的天然多酚化合物1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖(BJA32531)对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用以及对miRNA表达的影响。方法:采用CCK-8的方法检测HepG2细胞的增殖;用流式细胞法检测HepG2细胞的凋亡;采用miRNA芯片分析方法测定HepG2细胞的miRNA表达以及用RT-PCR的方法验证miRNA的表达。结果:BJA32531以时间和剂量依赖的方式抑制HepG2细胞的增殖;流式细胞结果表明:该化合物能引起HepG2细胞的凋亡。miRNA芯片结果显示,BJA32531能诱导HepG2细胞19个miRNA的表达上调以及85个miRNA的表达下调。RT-PCR验证了化合物诱导的let-7a和miR-10b的上调以及miR-132和miR-125b的下调与芯片的结果一致。结论:BJA32531抗HepG2细胞增殖作用的机理可能与调控miRNA的表达有关。

复方肝癌宁含药血清诱导肝癌HepG_2细胞凋亡的实验研究

目的:观察复方肝癌宁含药血清对肝癌HepG2 细胞凋亡的诱导作用．方法:运用中药血清药理学方法,选择不同浓度的含药血清与人肝癌HepG2细胞共同孵育观察,并与阳性血清组、无药血清组作对照．结果:复方肝癌宁含药血清可显著抑制HepG2 细胞的增长;TUNEL法检测HepG2细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变,可见“凋亡小体”,高、中、低剂量含药血清组凋亡率分别为:14．50％,13．61％和10．19％,与无药血清组比较P<0．01;流式细胞仪检测可见亚G1峰, 凋亡呈含药血清浓度依赖性特点,高、中、低剂量含药血清组凋亡率分别为15．1％,12．0％, 5．5％．与无药血清组比较P<0．01或P<0．05 结论:复方肝癌宁可通过诱导肿瘤细胞凋亡, 发挥临床抗肝肿瘤、抗转移的作用．

川芎嗪含药血清对人肝癌细胞HepG_2增殖的抑制作用

目的观察川芎嗪(TMP)含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法选用SD雄性大鼠30只,随机分成3组,分别ipTMP143.0、71.5mg/kg、生理盐水0.8mL,制备TMP大、小剂量组及生理盐水组含药血清,采用RP-HPLC法测定含药血清中TMP的质量浓度。将各组含药血清作用于人肝癌细胞HepG248h,MTT法测定不同质量浓度TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。结果TMP大剂量组血清(20%、10%、5%),TMP小剂量组血清(20%、10%)对人肝癌细胞HepG2增殖较生理盐水组有显著抑制作用(P<0.05),最高抑制率可达46.1%。结论TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖有一定的抑制作用。

汉黄芩素对人肝癌HepG_2细胞凋亡的影响

目的：研究汉黄芩素对人肝癌HepG：细胞增殖的影响并探讨其可能的作用机制。方法：以人肝癌细胞株HepG：为研究对象，应用CCK-8法检测汉黄芩素对其增殖的影响；流式细胞术检测细胞凋亡率；Westernblot检测细胞中凋亡相关蛋白的表达。结果：与对照组比较，20—320μg/mL的汉黄芩素对HepG：细胞的增殖有显著抑制作用，并呈剂量依赖性。不同浓度的汉黄芩素均可诱导HepG：细胞发生凋亡。Westernblot结果表明，汉黄芩素能促进促凋亡蛋白BAX的表达，抑制抑凋亡蛋白BCL-2的表达。结论：汉黄芩素能体外抑制人肝癌HepG，增殖，其作用机制可能与上调BAX蛋白表达水平、下调BCL-2蛋白表达水平诱导细胞发生凋亡有关。

斑蝥酸钠对肝癌细胞HepG_2增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥酸钠(cantharidin,CTD)对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用和机制。方法采用免疫组化染色法(I mmunohistochemistry,I H)和33528染色法观察斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,并观察肝癌细胞凋亡的形态学变化及不同剂量斑蝥酸钠对HepG2细胞凋亡率的影响。结果 1.0 mg/L以上斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用(P<0.01),最高凋亡率(47.24%)出现于高剂量组(5.0 mg/L)。结论斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用,是治疗肝癌较理想的药物之一。

石蒜碱诱导人肝癌HepG_2细胞自噬的体外实验研究

目的:探讨石蒜碱诱导人肝癌HepG_2细胞自噬的作用,为石蒜碱抗肿瘤研究提供实验依据。方法:体外培养人肝癌HepG_2细胞,采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率。倒置显微镜观察细胞形态,荧光显微镜观察细胞自噬小体。流式细胞术测定细胞自噬率及加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用后的细胞自噬率变化。Western blot法检测与自噬相关的蛋白LC3-Ⅱ与Beclin-1的表达。结果:石蒜碱对HepG_2细胞增殖抑制作用随浓度的升高而增强,其作用72 h的IC_(50)为6.27μmol/L。倒置显微镜观察阴性对照组细胞形状完好且紧密排列。石蒜碱各组随给药浓度的升高,细胞变圆、漂浮、排列稀疏生长缓慢的状态越加明显;荧光显微镜可观察到细胞自噬小体的数量随石蒜碱浓度升高而升高。流式细胞仪检测石蒜碱组细胞自噬率与给药浓度呈正相关,加入抑制剂(3-MA)后细胞自噬受到抑制。Western blot法检测结果显示随石蒜碱浓度的升高LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达上调,均显著高于对照组(P<0.01);3-MA抑制剂能显著拮抗其作用。结论:石蒜碱能诱导肝癌HepG_2细胞自噬,其机制可能是上调肝癌HepG_2细胞中LC3-Ⅱ与Beclin-1蛋白的表达,促使自噬小体形成与成熟,导致细胞过度自噬,最终使细胞凋亡。

丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B对肝癌HepG_2细胞株的作用及其机制探讨

目的:研究丹参酮ⅡA和丹酚酸B对肝癌HepG2细胞株的作用,并探讨可能的分子机制。方法:采用MTT法观察丹参酮ⅡA和丹酚酸B对HepG2细胞的影响;采用Western blot分析可能的分子机制。结果:丹参酮ⅡA对肝癌HepG2细胞有一定的抑制作用,100μg/mL的丹参酮ⅡA对HepG2细胞抑制率可达到80.2%;与对照组比较,丹参酮ⅡA组BAX、Caspase-3和Caspase-9的蛋白表达显著增加,而BCL-2的蛋白表达显著减少(P<0.05)。丹酚酸B对肝癌HepG2细胞有一定潜在促增殖作用。结论:丹参酮ⅡA对肝癌HepG2细胞有明显的抑制作用,机制可能是通过诱导抑癌基因的表达而促进肿瘤细胞的凋亡。

绞股蓝总皂甙诱导人肝癌HepG_2-A_(16)细胞程序性死亡

目的 :探讨绞股蓝总皂甙 (Gypenosides ,GPS)对人肝癌细胞程序性死亡的影响及机制。方法 :采用MTT法和微量琼脂糖培养克隆形成法检测GPS对体外培养人肝癌细胞株 (HepG2 -A16)细胞生长增殖和克隆形成能力的抑制作用。应用DNA断片法和TUNEL法观测GPS对HepG2-A16细胞程序性死亡的影响 ;同时使用S -P免疫组化法观察GPS对HepG2 -A16细胞Bcl- 2蛋白表达的影响。结果 :1.GPS( 5 0 - 2 5 0mg/L)对HepG2 -A16细胞增殖和克隆形成能力有明显抑制作用(P <0 .0 5 - 0 .0 0 1) ,呈剂量相关性 (P <0 0千 )。 2 .GPS( 5 0 - 2 5 0mg/L)处理HepG2 -A16细胞 2 4小时后 ,DNA琼脂糖电泳表现出细胞程序性死亡特征性的梯形条带图谱 ;TUNEL法染色细胞呈现典型凋亡特征性蓝紫色颗粒。 3.S -P免疫组化法检测HepG2 -A16细胞Bcl - 2蛋白呈阳性染色 ;GPS( 5 0mg/L)孵育 2 4小时后Bcl- 2蛋白呈阴性染色。结论 :GPS具有促进人肝癌细胞程序性死亡作用 ;GPS诱导人肝癌细胞Bcl- 2基因表达下调可能是其促进细胞程序行死亡的主要机制之一。

中药复方搏癌丸对人肝癌HepG_2细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究中药复方搏癌丸对人肝癌HepG_2细胞增殖及凋亡的诱导作用。方法:采用细胞药理学和血清药理学方法,对比观察(阴性无药血清对照、阳性药5-氟尿嘧啶血清对照)搏癌丸诱导HepG_2细胞的增殖及凋亡。(1)MTT法观察4个搏癌丸药物血清浓度对HepG_2细胞增殖的抑制作用,从中筛选出搏癌丸的有效药物浓度。(2)电镜及流式细胞仪观察HepG_2细胞凋亡。结果:(1)10%、5%、2.5％搏癌丸药物血清3个有效浓度均对HepG_2细胞增殖有显著抑制作用(P<0.01),增殖抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,3个有效浓度组间差异均有显著性(P<0.01)。(2)10％搏癌丸药物血清作用HepG_2细胞48小时后,HepG_2细胞核明显缩小,浆比减少,核仁减少、浓缩甚至消失,核内异染色质明显增多,核膜完整,可见早、中、晚期细胞凋亡,出现凋亡小体。(3)10％搏癌丸药物血清作用HepG_2细胞48小时后,流式细胞仪检测的细胞凋亡率为25.34％,均显著高于相应无药血清对照组的3.54％(P<0.05)。结论:搏癌丸能在一定程度上抑制HepG_2细胞的增殖和诱导HepG_2细胞凋亡。

全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞-HepG_2增生和凋亡的影响

目的:探讨全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞HepG2增生和凋亡的作用.方法:将不同剂量的全反式维甲酸和奥曲肽(1mg/L)直接作用于体外培养的人肝母细胞瘤株HepG2,用MTT比色法分析两种药物联合作用对肝癌细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测抑癌基因P21WAF1的表达,台盼兰染色观察药物对细胞毒性作用.结果:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)和奥曲肽(1mg/L)连用后,对细胞具有增生抑制作用,与无增生抑制的奥曲肽作用组和对照组相比有显著性差异(P=0.0087P<0.01).细胞免疫化学:全反式维甲酸和奥曲肽药物联合作用48h后,细胞中目的基因P21WAF1/CIP1由胞膜,胞质微弱表达转为核强烈表达.于作用48h后药物合用组对细胞各周期均有影响,奥曲肽作用组可使肝癌细胞HepG2阻滞于S期,且药物合用组于作用72h后,凋亡率为17%,明显高于奥曲肽作用组与对照组.台盼兰染色未发现大片死亡细胞.结论:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)联合生长抑素类似物奥曲肽(1mg/L)对肝癌细胞HepG2具有增生抑制和诱导凋亡作用.抑癌基因表达增强说明二者的诱导凋亡和增生抑制作用可能是通过增强抑癌基因P21WAF1/CIP1的表达实现的.从而为在临床上治疗肝癌提供了新的思路.

叶下珠复方对人肝癌HePG_2细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用

目的观察叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞体外增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和生长曲线测定法,比较不同浓度的叶下珠复方在不同作用时间对体外培养的HePG2细胞增殖的影响;同时应用流式细胞术、荧光显微镜和电镜对HePG2细胞的凋亡率及形态学进行观察。结果叶下珠复方对HePG2细胞增殖有抑制作用,在一定范围内,叶下珠复方的浓度越大、作用时间越长,对HePG2的抑制作用越强,叶下珠复方浓度为500μg/mL作用72h时,其抑制率达93.58%,IC50为240μg/mL。不同浓度的叶下珠复方均具有一定程度诱导HePG2细胞凋亡的作用。结论叶下珠复方在体外能一定程度抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与诱导肝癌HePG2细胞凋亡有关。