不同病情乙型肝炎患者HBV-DNA定量、两对半检测结果差异

目的分析乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)-DNA定量检测与两对半检测结果的相关性,并观察不同病情HBV-DNA阳性率和两对半检测结果差异。方法选取江苏省泰兴市人民医院2021年4月至2023年4月收治的375例乙型肝炎患者病例为研究资料。比较不同乙肝两对半检测[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]结果患者HBV-DNA定量检测结果差异,将患者根据HBV-DNA定量检测结果分为阳性组和阴性组,比较乙肝两对半结果差异,使用Pearson相关性分析;将患者根据疾病类型分为肝炎组、肝硬化组和肝癌组,比较三组患者乙肝两对半和HBV-DNA定量检测结果差异。结果不同乙肝两对半类型患者HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);HBV-DNA阳性组患者HBsAg、HBeAg水平高于HBV-DNA阴性组,HBsAb、HBeAb、HBcAb水平低于HBV-DNA阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);HBsAg、HBeAg水平与HBV-DNA呈正相关(P<0.05),HBsAb、HBeAb、HBcAb水平与HBV-DNA呈负相关(P<0.05);不同疾病类型患者乙肝两对半类型HBV-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同疾病类型患者HBV-DNA定量检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙型肝炎患者HBV-DNA定量检测与两对半检测结果有相关性,不同乙肝两对半类型间及不同疾病类型间HBV-DNA均有差异,HBV-DNA定量检测联合两对半检测可较好地反映病毒复制和疾病进展情况,为临床治疗提供指导。

血清肝纤维化指标、HBV-DNA病毒载量联合检验在乙型肝炎肝纤维化中的评估价值

目的:探究血清肝纤维化指标、HBV-DNA病毒载量联合检验在乙型肝炎肝纤维化中的评估价值。方法:选取2022年1月至2023年5月本院收治的100例乙型肝炎肝纤维化患者作为观察组,并选择同期100例慢性乙型肝炎患者作为对照组。分别采用化学发光法和荧光定量PCR法检测两组患者肝纤维化指标及HBV-DNA水平,并比较分析其与乙型肝炎肝纤维化的关系。结果:观察组透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)水平均显著高于对照组(P<0.05);HBV-DNA水平显著低于对照组(P<0.05)。结论:HBV在慢性乙型肝炎患者具有高度复制性,在肝纤维化阶段复制水平下降。随着乙肝的进一步发展,肝纤维化指标水平逐渐升高。联合检测肝纤维化指标和HBV-DNA病毒载量对临床诊断乙型肝炎肝纤维化有一定的参考价值。

定量检测血清HBV标志物不同阳性组合模式与HBVDNA定量之间的关系

目的 探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与HBVDNA定量之间的关系。方法 采用实时荧光定量PCR仪检测HBVDNA ,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果 3 71例乙型肝炎患者表现12种阳性模式,除常见模式外,发现3种HBVM特殊模式,即抗 HBe与HBeAg共存,即抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存模式。含有HBeAg的各种模式病毒含量高,病毒复制活跃,HBVDNA阳性率多数较高。结论 时间分辨荧光免疫分析法是一种敏感、特异方法,HBVM各项指标中,抗原意义远大于抗体意义,只要有HBeAg存在的模式,就代表病毒复制活跃及传染性强。抗 HBe与HBeAg共存或抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存时,抗 HBs不能清除HBV ,抗 HBs及抗 HBe也不代表病毒复制减少。

TMA技术在献血者HBV-DNA检测中的应用

目的:了解无偿献血人群乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染情况,评估TMA技术应用于献血者HBV-DNA筛查的效果及其必要性。方法:采用平行检测ELISA/NAT模式,对2016年3月-2018年2月169160人(次)献血者及部分归队献血者进行常规血清学和NAT检测,对NAT筛查阳性标本行核酸鉴别试验;对单边试剂HBsAg+、HBV-DNA-献血者进行中和确证试验。结果:169160人(次)献血者中,双边试剂HBsAg检测阳性的为803例,占0.476%,单边试剂检测阳性的为243例,占0.144%。对40名HBV-DNA-、单边试剂检测HBsAg+标本经中和确证试验确证,仅有4名为阳性,确证阳性率为10%。检出1003例HBV-DNA+标本,HBsAg和HBV-DNA均为阳性的739例,2者一致率为73.7%。3种试剂阳性检出率比较有统计学差异(P<0.05);Murex试剂和新创试剂2种试剂检出阳性率有统计学差异(P<0.125)。2016年3月-2017年2月和2017年3月-2018年2月期间HBsAg-/HBV-DNA+检出率比较,没有统计学差异(P>0.05)。60名HBsAg-/HBV-DNA+归队献血者中有1名发生HBsAg阳转,该名献血者为HBV窗口期感染;其余59名献血者HBsAg阴性;HBVDNA检测显示,28名献血者HBV-DNA-,31名献血者HBV-DNA+,1名结果为不确定。结论:结合HBsAg检测,常规应用TMA技术检测HBV-DNA能缩短HBV感染的检测窗口期,检出HBV隐匿性感染,避免HBV漏检,从而有效地降低输血后传播乙型肝炎潜在风险。

不同方法检测血清HBV DNA的比较研究

采用夹心斑点杂交法、PCR—EB定性及Amp -lisensor定量法对HBsAg与抗—HBs 同时阳性、HBsAg阳性、抗—HBs 阳性和HBsAg与抗—HBs 均阴性的乙型肝炎病毒 (HBV)感染者检测血清HBVDNA。结果三种方法的阳性率分别为 2 9 1 %、4 7 7%和 80 2 % ;各组HBVDNA含量分别是 1 0 6.13± 1.86、1 0 6.0 8± 1.82 、1 0 4 .12± 1.4 0 和 1 0 5.0 7± 1.2 1(拷贝 /ml)。结论是Amplisensor法检测HBVDNA具有更高的敏感性 ;抗—HBs 阳性的HBV感染者血清中仍可检出HBVDNA。

化学发光法应用于无偿献血者HBsAg阴性/HBV DNA阳性标本检测及其与核酸检测的关联分析

目的分析化学发光技术(CLIA)检测检测无偿献血者HBsAg-/HBV DNA+标本的感染状态及其与核酸检测技术(NAT)关联性。方法对邯郸市中心血站2018年7—12月采集的49 125(人)份无偿献血者血液标本中,ELISA双试剂检测HBsAg阴性或(和)单试剂检测反应性标本做NAT检测,再对其中HBsAg-/HBV DNA+标本使用CLIA法进一步做乙肝5项血清学检测,据此检测结果分析这些标本的HBV感染状态。结果 HBsAg ELISA双试剂检测阴性或单试剂检测反应性标本的NAT检测HBV DNA阳性检出率0.071%(35/49 125);CLIA检测:隐匿性乙肝(OBI)、HBV窗口期感染和一过性HBV感染的比例分别占74.29%(26/35)、20%(7/35)和5.71%(2/35),其中CT值>39的标本占65.7%(23/35)。在OBI标本中,有65.38%(17/26)标本的抗-HBs滴度<10 IU/mL;抗-HBc滴度(IU/mL):<6.0的标本占15.38%(4/26)、6.0—9.0的标本占50%(13/26)、>9.0的标本占34.62%(9/26)。结论 CLIA法有利于对NAT检出的ELISA HBsAg-/HBV DNA+献血者标本的客观评价;结合CLIA的多种血清学检测指标分析OBI的血清学特征,可为采供血机构血液安全策略提供更充分的科学依据。

基于双纳米金探针杂交法检测HBV DNA

利用双纳米金探针结合基因芯片平台建立了一种检测乙肝病毒基因(HBV DNA)的新方法.根据HBVDNA的保守序列设计捕获探针和信号报告探针,通过一对互补的纳米金检测探针的双杂交法对HBV DNA进行信号放大,最后进行银染,达到对HBV DNA的可视化检测.该方法的灵敏度高,可检测10 fmol/L的HBV DNA,且能在1.5 h内完成检测.其具有的快速、高灵敏度及低成本等优势使其有望发展成为一种检测HBV DNA的新方法.

乙型肝炎患者血清中前S_1蛋白、HBcAg及HBVDNA相关性临床研究

目的探讨乙型肝炎患者血清前S1(Pre-S1)蛋白、HBcAg、HBVDNA及HBV其他标志物的关系及临床意义,为评判HBV复制和病情发展提供新的思路与证据。方法对136例乙型肝炎患者血清中HBVDNA应用微板核酸杂交法;HBcAg采用ELISA间接法,两种抗体包被,反应孔内裂解Dane颗粒的酶标技术直接检测;Pre-S1及HBV其他标志物同时进行ELISA检测。结果血清中Pre-S1、HBcAg、HBVDNA检出率在HBsAg、HBeAg、抗-HBc组合中最高,分别为33.3%、74.6%、85.7%,与HBV-M其它组合比较P<0.01;HBeAg和HBcAg阳性组的HBVDNA、Pre-S1检出率最高(91.7%、39.6%),其次为HBeAb和HBcAg阳性组;HBVDNA阳性组的Pre-S1、HBcAg检出率(27.5%、62.6%)明显高于阴性组(2.2%、8.9%),P<0.001;Pre-S1阳性血清中HBcAg与HBVDNA检出率为96.4%、89.3%,与阴性组比较P<0.001及P<0.05;Pre-S1、HBcAg与HBVDNA检出率在各临床类型患者中,除慢性肝炎HBVDNA检出率高,且统计学意义(P<0.001)外,其它无特异性。结论血清Pre-S1、HBcAg、HBVDNA和HBeAg均是反映乙肝病毒复制的敏感指标,具有较好的相关性。抗HBe的出现并不表示病毒复制停止,应参考其他病毒复制指标情况。乙型肝炎各临床类型HBV复制指标检出率仅HBVDNA具有特异性。

乙肝五项检测与HBV-DNA定量的相关性在乙型肝炎诊断中的应用分析

目的:探究乙肝五项检测与HBV-DNA定量之间的关系,以探究其在乙型肝炎诊断中的应用。方法:将从2016年8月至2017年8月在我院肝病科就诊的164例患者作为研究对象,分别对164例患者进行乙肝五项和HBV-DNA检测,以分析其对乙型肝炎诊断中的应用。结果:在17例HBc Ab阳性患者中,检测出3例患者存在着乙肝前S1抗原阳性。这说明HBeAg阴性患者在HBeAb阴性、阳性条件下均存在着病毒复制风险。在76例HBeAg、HBsAg及抗HBc阳性标本的检测中HBV-DNA和乙肝前S1抗原检出率分别为85.53%和78.95%;在43例HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性标本中HBV-DNA和乙肝前S1抗原检出率分别为51.16%和60.47%。在96例HBeAg阳性中,HBV-DNA阳性检出率为85.42%,乙肝前S1抗原阳性检出率为79.17%。结论:乙肝五项检测与HBV-DNA定量检测对乙型肝炎的临床诊断有着重要的意义。

定量检测乙型肝炎病毒标志物与HBV DNA定量间的关系及临床意义

目的 探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与(HBV DNA)定量之间的关系及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR仪检测HBV DNA,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果 375例乙肝患者在HBV DNA含量分组中,随HBV DNA含量增高,HBs Ag、HBe Ag含量也增高,后两者与前者有良好的一致性,存在一定的相关性(r=0 .5 332 ,r=0 .380 9)。抗HBs,抗HBe及抗HBc与HBV DNA之间,无明显规律。HBs Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性重度、亚重肝、慢性重型肝炎,肝硬化比较差异有非常显著性(P<0 .0 1,0 .0 5或0 .0 0 1) ,HBe Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性中度、慢性重度、亚重肝、慢性重肝,肝硬化比较差异非常显著(P<0 .0 1或0 .0 0 1) ,HBs Ag含量及HBe Ag含量在其他临床分型中比较部分有统计学意义。HBV DNA阳性率及HBV DNA定量在部分临床分型中比较有统计学意义。结论 时间分辨荧光免疫(DEL FIA)是一敏感、特异方法,定量检测HBs Ag、HBe Ag能反映HBV DNA载量及复制情况;部分情况表明肝脏病变越重,其HBs Ag及HBe Ag血清含量越低,HBV DNA阳性率及HBV

HBV-DNA含量与肝功能9项指标间关系的研究

目的 探讨HBV -M阳性患者血清中HBV -DNA含量与血清中TBiL、DBiLABiL、AST、ALT、AST/ALT、ALP、γ -GT、TBA等 9项指标间的相关性。方法 将 10 6份HBV -M阳性标本分为 3组 :Ⅰ组HBV -DNA含量 <10 0 0拷贝 /毫升的小三阳者 ;Ⅱ组为HBV -DNA含量 10 5- 10 6拷贝 /毫升血清的小三阳者 ;Ⅲ组为HBV -DNA含量为 10 7- 10 9拷贝 /毫升血清的大三阳者。HBV -M采用ELISA法 ,HBV -DNA采用美国PE公司生产的PE - 5 70 0型FQ -PCR检测仪测定 ;肝功能 9项指标采用美国贝克曼公司CE -CX5全自动生化分析仪检测。HBV -DNA与肝功能指标测定使用同一份标本。结果 经每组比较分析后 ,大部分肝功能指标均有显著性或非常显著性差别 ,其中以Ⅱ组各项指标差异尤为显著。特别是ALT、AST、TBA等。结论 通过相关性分析HBV -DNA含量与肝功能 9项指标之间没有明显的相关性 (r=± 0 .2以内 P >0 .0 5 ) ,肝功能的损害程度与HBV -DNA含量之间无相关性。定量检测外周血HBV -DNA可以直接反应HBV在血液中的复制情况 ,既而能够较为准确地解释感染HBV后的传染性。

妊娠合并乙型肝炎患者乙肝五项定量与HBV-DNA结果相关性分析

目的探讨妊娠合并慢性乙型肝炎患者乙肝五项定量与HBV-DNA的相关性以及对病情判断的临床诊断价值.方法选择2010年1月至2013年1月妇产科收治的妊娠合并慢性乙型肝炎患者382例作为观察组,同期健康的正常妊娠女性80例作为对照组.两组患者均于入选后次日晨检测血清乙肝五项定量及HBV-DNA水平,并对两者的相关性做出评估.结果将2组孕妇乙肝五项检测结果分成8种模式,HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性者及HBsAg、HBeAg阳性患者具有较高的HBV-DNA检出率并且具有较高的HBV-DNA水平,对照组孕妇乙肝五项检测及HBV-DNA水平均未见异常.HBV-DNA阳性组HBsAg、HBeAg、HBcAb较HBV-DNA阴性组存在显著性差异(P<0.05),HBsAb、HBeAb较对照组存在极显著性差异(P<0.01).HBsAb、HBeAb与HBV-DNA定量之间呈显著负相关(P<0.05),HBsAg、HBeAg、HBcAb与HBV-DNA呈显著正相关(P<0.05).结论乙肝五项定量和HBV-DNA检测具有较好的相关性,两者同时检测可较好的反映该类患者HBV病毒复制及病情进展.

肝细胞浆内HBV DNA与HBV感染状态关系的探讨

在原位杂交研究的基础上,本文对慢性乙肝患者胞浆型HBV DNA及肝内其它乙肝指标进行综合分析。发现胞浆型HBV DNA可分3种类型:①肝内同时有核衣壳蛋白(HBcAg)与包膜蛋白(HBsAg)表达,此与HBV复制的产物表达特征一致;②肝内仅有HBsAg表达,此与HBVDNA和宿主基因组整合后的表达特点相似;③肝内HBsAg、HBcAg表达均缺如,可能代表一种HBV非复制状态。由此表明在HBV非复制期,出现胞浆HBV DNA杂交信号可能系DNA RNA杂交体所致。

血清直接斑点杂交试验检测HBV-DNA及其影响因素的探讨

本文介绍了一种只用5—10uL血清样本的直接斑点杂交试验。并探讨了影响该方法效果的各种因素和临床应用意义。该法灵敏度达0.1pg,特异性好。检测322份样本中HBV-DNA(+)116例。HBeAg(+)组HBV-DNA(+)百分率为88.9%,比抗HBe(+)组(17.6%)和HBeAg(-)/抗HBe(-)组(11.0％)高(P<0.005)。本法具有敏感、特异、简便和快速等特点。

HBVDNA与抗HBcIgM在临床检测中的价值

采用地高辛标记探针以分子杂交的方法对８５１例血清进行ＨＢＶＤＮＡ的检测，采用ＥＬＩＳＡ的方法对相同标本检测了抗－ＨＢｃＩｇＭ、ＨＢＶ二对半、抗－ＨＡＶＩｇＭ、抗－ＨＣＶ及抗－ＨＥＶＩｇＭ，发现ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率与ＨＢｅＡｇ出现相关，且ＨＢｅＡｇ阴性的标本中仍有１０．２５％（４９／４７８）ＨＢＶＤＮＡ阳性，说明仅以ＨＢｅＡｇ出现与否判定是否存在ＨＢＶ的复制是不可靠的。同时，还发现ＨＢＶＤＮＡ的出现与肝炎类型无关。抗－ＨＢｃＩｇＭ阳性率则与ＨＢｅＡｇ的出现无关，而与肝炎类型相关。

孕妇血清中HBV－DNA与乙型肝炎疫苗阻断母婴传播HBV的效果

血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性母亲的新生儿分别于出生时、１月龄、６月龄各接种１剂２０μｇ乙型肝炎（乙肝）疫苗后随访２ａ。随机抽取母婴乙肝病毒（ＨＢＶ）传播阻断成功的６４例、失败的２９例。用斑点杂交测定孕妇临产时血清ＨＢＶ－ＤＮＡ水平。结果表明疫苗阻断母婴传播成功组孕妇血清ＨＢＶ－ＤＮＡ水平明显低于失败组提示孕妇血清ＨＢＶ－ＤＮＡ水平高可能是疫苗阻断母婴传播失败原因之一。

乙肝五项、前S1抗原与HBV-DNA联合检测的临床应用

目的:探讨乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA在肝炎诊断的价值;方法:收集上海市松江区中心医院2022年7月1日-8月31日检测乙肝五项的标本3364例,分析其乙肝五项、前S1抗原的检出率、HBV-DNA的载量,另外收集上海市松江区中心医院2022年3月1日-2022年8月31日HBV-DNA高载量标本46例,中载量标本54例,低载量标本76例,对照组标本52例,统计并分析其ALT、AST、GGT含量;结果:3364例标本中HBSAg阳性率为9.3%,检出率较高的模式分别为全阴、25(+)、2(+)、245(+)、145(+)、5(+);在主要的乙肝五项型别中,只有145(+)和135(+)型别检测到HBV-DNA,135(+)检出率高于145(+);前S1抗原与HBeAg检出率不同;不同DNA载量的四个组别ALT、AST、GGT差别均有统计学意义,四个组别ALT、AST、GGT不完全相同;结论:乙肝五项、前S1抗原和HBV-DNA联合检测对乙肝的诊断有重要的意义。

HBV-DNA检测在乙肝疗效观察中的意义

用斑点杂交（ＤｏｔＢｌｏｔ）方法，检测ＨＢｓＡｇ携带者在接受治疗过程中血清ＨＢＶ－ＤＮＡ存在状况。结果显示，治疗后ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率有明显下降趋势，不同疗程间有明显差异（Ｐ＜０．０１）；随着疗程的延伸，其阳性百分比从高浓度（＞５０ｐｇ）向低浓度（＜５０ｐｇ）移动，直至逐步消失。通过ＨＢＶ－ＤＮＡＤｏｔＢｌｏｔ与ＨＢＶ·Ｍ五项指标（ＥＬＩＳＡ）比较证实，在判断ＨＢＶ是否在体内复制，ＨＢＶ－ＤＮＡＨＢｅＡｇ和Ａｎｔｉ－ＨＢｃ具有高度的一致性。表明ＨＢＶ－ＤＮＡＤｏｔＢｌｏｔ在乙肝治疗效果观察中的应用价值应得到充分的肯定。

慢性乙型肝炎患者血清HBV—DNA定量与定性检测的比较

同时应用定量PCR法和斑点杂交法对155例HBsAg阳性的慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA进行检测.以探讨两者的相互关系.结果显示斑点杂交法检出66例阳性(47.6%),定量PCR法检出110例(71.0%).HBV-DNA于2.54拷贝出现斑点杂交法阳性,随着HBV—DNA拷贝数的增加,斑点杂交法阳性增强,表明两种方法的阳性呈正相关关系.定量PCR法比斑点杂交法灵敏且可定量,但试剂昂贵;而斑点杂交法简便易行,适合基层单位应用.故建议临床宜先用斑点杂交法检测HBV—DNA,再配合定量PCR法以提高检出率并进行HBV-DNA定量.

生物素标记HBVDNA探针原位杂交碱性磷酸酶过氧化物酶显色检测肝内HBVDNA

本研究应用国产生物素标记HBVDNA探针,于福尔马林固定,石蜡包埋肝组织切片上,建立了碱性磷酸酶过氧化物酶显色的原位杂交技术,在此过程中发现,蛋白酶的消化是杂交能否成功的关键因素,酸、三乙醇酐、洋地黄的预处理,能促进探针参入,降低非特异背景,减低蛋白酶作用浓度或作用时间,因而提高实验稳定性、特异性。并用这一技术检测了34例肝活检和4例尸检肝组织,结果:尸肝组织均检出了HBV—DNA,其中2例核型见于肝硬化,肝癌旁组织,而2例浆型HBV—DNA见于慢活肝,亚重肝。34例肝活检组织中,只检出12例浆型HBV—DNA,其中CAH—CPH无症状携带者中检出率分别为42.9％,38.8％,33.3％,均明显高于肝硬化组织(16.7％)(P<0.05)。由此可见浆型HBV—DNA分布同病变轻重程度的关系可能并不密切,不同分布型的HBV—DNA可能只反映HBV的复制状态。