Recent advances in the study of hepatitis B virus covalently closed circular DNA

Chronic hepatitis B infection is caused by hepatitis B virus(HBV) and a total cure is yet to be achieved. The viral covalently closed circular DNA(ccc DNA) is the key to establish a persistent infection within hepatocytes. Current antiviral strategies have no effect on the pre-existing ccc DNA reservoir. Therefore, the study of the molecular mechanism of ccc DNA formation is becoming a major focus of HBV research. This review summarizes the current advances in ccc DNA molecular biology and the latest studies on the elimination or inactivation of ccc DNA, including three major areas:(1) epigenetic regulation of ccc DNA by HBV X protein,(2) immune-mediated degradation,and(3) genome-editing nucleases. All these aspects provide clues on how to finally attain a cure for chronic hepatitis B infection.

HBV基因组C基因分子生物学的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)C基因包含前C区基因和C区基因,分别编码乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎核心抗原(HBcAg)。HBeAg参与免疫调节,并且是乙型肝炎传染性的标志之一。HBcAg是核衣壳的组成蛋白,在病毒颗粒的组装、成熟、诱导免疫反应以及致肝病、肝癌的分子机制中起着重要的作用。文章就HBV基因组C基因分子生物学的研究进展作一综述。

乙型肝炎病毒的X蛋白在大肠杆菌中的高效表达

X基因是乙型肝炎病毒(HBV)的四个开读框架之一,编码一个含154个氨基酸的蛋白。将含有编码145个氨基酸的X基因主要部分用Bam HI及Bgl Ⅱ酶切,获得Bam HI-Bgl Ⅱ HBV DNA片段(584bp),将其插入到质粒pEx31的Bam HI切点,构建成一个在λPL启动子控制下表达MS2-X融合蛋白的质粒—pEx31-HBX。含此质粒的大肠杆菌可产生占菌体蛋白总量40％的28千道尔顿融合蛋白。用抗X标准抗血清证实,此融合蛋白具有X的抗原活性,并制备了抗融合蛋白的抗血清。这是在国内首次成功地高效表达乙型肝炎病毒的X蛋白。

体内与转染细胞中乙型肝炎病毒株复制特性的相关性

目的 比较不同乙型肝炎病毒 (HBV)株在体内及转染细胞中复制特性是否相符。方法 以核酸杂交定量和聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验 (PCR ELISA)测定 5例孕妇血清中HBVDNA含量 ,并测定乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)和乙型肝炎e抗原 (HBeAg)含量。分别克隆血清中的HBV基因组转染细胞 ,检测培养上清液中HBsAg和HBeAg表达水平 ,并以Southern印迹及核酸杂交检测转染细胞内、外HBVDNA复制水平。结果 转染细胞内、外HBVDNA复制水平与相应血清HBVDNA量呈正相关趋势。转染细胞表达的病毒抗原水平与相应血清中病毒抗原含量也呈正相关趋势。结论 感染者血清中HBVDNA和病毒抗原的含量与毒株在细胞中复制和抗原表达水平有相符趋势。HBV不同毒株在转染细胞中的复制可基本反映体内毒株的复制特性。