Studies of Hepatitis B Virus-Specific Transfer Factor reparation

制备一种乙型肝炎病毒特异性转移因子制剂 (HBV STF) ,为临床应用提供有价值的实验依据。从人HBsAg阳性胎盘中制备了HBV STF ,并对其理化性质、免疫学活性进行了检测和初步的临床试用。每批样品经无菌试验、热原质检查、动物安全性试验等均符合药典要求。本品最大紫外吸收光谱在 2 5 6± 2nm处 ,E2 60nm/E2 80nm比值大于 2 7。其水解氨基酸含 17种。对人T淋巴细胞E受体的激活试验结果显示 ,HBV STF的Ea RFc平均增高率在 83 47%～ 10 3 48%之间 ,抗原特异性皮肤试验表明HBV STF能刺激小鼠体内T淋巴细胞增殖 ,诱导小鼠跖趾部皮肤的迟发性变态反应。对HBV STF的初步临床试用也取得明显效果 ,显示HBV STF是一种可用于治疗乙肝的安全。

用白细胞粘附抑制法鉴定HBV-TF特异免疫活性

选用白细胞粘附抑制试验来鉴定乙肝特异性转移因子(HBV-TF)免疫活性。实验结果表明:经HBV-TF致敏的淋巴细胞与乙肝抗原(HBV-Ag)孵育后,显示出明显的粘附抑制活性,而非特异性转移因子(TFn)致敏淋巴细胞与乙肝抗原孵育、HBV-TF致敏淋巴细胞与甲肝抗原(HAV-Ag)孵育或HBV-TF致敏淋巴细胞与1640液(代替抗原液)孵育时均不能表现出这种抑制作用,说明HBV-TF具有抗原特异性免疫活性。实验证明,本法是体外鉴定HBV-TF免疫活性简便易行的方法。

泰来肽治疗HBV携带者临床疗效观察以及对细胞免疫功能影响

目的观察泰来肽治疗HBV携带者的临床疗效及其可能作用机制。方法选择100例HBV-DNA和HBeAg阳性的HBV携带者,分为治疗组(45例)和对照组(54例)。结果治疗24周时,治疗组HBeAg阴转率、血清转换率和HBV-DNA阴转率分别为11.11%、6.67%和17.78%明显高于对照组(P<0.01);治疗组和对照组ALT异常率分别为4.44%、1.92%,两组间无显著性差异(P>0.05)。随访24周后,治疗组HBeAg阴转率、血清转换率和HBV-DNA阴转率分别为26.67%、17.78%和37.78%明显高于对照组(P<0.01);治疗组和对照组ALT异常率分别为4.44%、5.77%,两组比较无显著性差异(P>0.05)。组织学炎症分期为G1、G2的HBeAg阴转率(36.36%,50%)、血清转换率(22.27%,40%)、HBV-DNA阴转率(44.54%,60%)均明显高于G0-1(P<0.01)。治疗组外周血T细胞(CD3+)、CD4+T细胞(CD3+CD4+)和NK细胞(CD16+CD56+)计数较治疗前明显增高(P<0.05),而CD8+T细胞(CD3+CD8+)计数较治疗前明显降低(P<0.05),外周血B细胞(CD19+)计数无明显变化(P>0.05)。结论泰来肽能使HBV携带者HBeAg和HBV-DNA阴转,以及HBeAg发生血清转换,且与肝组织学炎症分期有关,提高细胞免疫功能是其主要作用机制。

HBsAg转移因子对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖反应的影响

应用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）免疫山羊，取其脾脏及淋巴结经匀浆透析法制备ＨＢｓＡｇ特异性转移因子（ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ）。在体外观察了其对外周血淋巴细胞增殖反应的影响。结果显示：慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖率明显低于正常人。ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ可明显促进患者外周血淋巴细胞的增殖反应，而正常转移因子（ＮＴＦ）对其作用则不明显。提示：慢性乙型肝炎患者的细胞免疫处于抑制状态。特异性转移因子可解除或缓解这种抑制状态。

拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎疗效及对T淋巴细胞的影响

目的探讨拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎疗效及对T淋巴细胞的影响。方法选择2021年1月至2022年1月南阳市中心医院收治的90例慢性乙肝患者,按照随机数字表法分为研究组与对照组各45例,两组患者均给予补充血浆、人血白蛋白,应用护肝、抗感染药物等常规对症治疗。对照组接受拉米夫定治疗,研究组使用拉米夫定及抗乙肝胎盘转移因子联合治疗。两组均持续治疗12周,比较治疗前后两组乙肝病毒标志物的阴转情况及肝功能指标[总胆红素(TBil)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)],观察两组用药前后的免疫功能变化,并统计比较两组不良反应发生率。结果治疗前,两组乙肝病毒标志物各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组HBV-DNA阴转、HBeAg阴转、HBeAg/抗-HBe人数占比明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者肝功能相关指标对比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组TBil、AST、ALT、TBA水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组T淋巴细胞亚群各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CD3^(+)、CD4^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)值高于治疗前,CD8^(+)水平低于治疗前,且研究组的改善幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论拉米夫定联合抗乙肝胎盘转移因子对慢性乙肝的治疗效果显著,有利于改善肝功能指标,调节免疫功能水平,进一步提高患者的临床治疗效果,且具有一定安全性。

抗乙肝胎盘转移因子防治肝硬变的探讨

乙型肝炎１００例经抗乙肝胎盘转移因子治疗获得临床治愈后，肝活检复查证明急性乙肝平均３个月后肝组织病理基本正常者仅１５．４％，明显进步６１．５％，提示出院后仍需巩固治疗。慢活肝和慢活肝伴早期肝硬变者经本剂治后，肝活检复查示病理形态明显进步者，观察组显著多于对照组，早期肝硬变的病理改变治后可获消退，代偿期肝硬变的病理形态改变亦可获进步。因此，初步证明肝硬变的病理形态是可逆转的，抗乙肝胎盘转移因子可以提高逆转率。

拉米夫定联合抗乙肝转移因子和强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎的疗效观察

目的观察拉米夫定联合抗乙肝转移因子和强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法将160例慢性乙型肝炎患者随机分为拉米夫定联合抗乙肝转移因子及强肝胶囊治疗组(80例)和单用拉米夫定组(80例)。拉米夫定100mg/d口服,疗程12个月,抗乙肝转移因子4mg/d皮下注射,前1个月每日1次,以后隔日1次,疗程6个月,强肝胶囊2.0,每日2次,每服6日停1日,疗程6个月。结果治疗6个月、12个月及随防6个月时联合治疗组ALT复常率、HBeAg转阴率,HBeAg/抗HBe血清转换率均显著高于拉米夫定组(P<0.01),两组HBVDNA转阴率则无显著性差异(P>0.05);两组治疗12个月及随防6个月联合组HA、LN及IV-C水平显著低于对照组(P<0.05),联合治疗组肝组织学纤维化好转率为86.6%(13/15),与拉米夫定组的60.0%(6/10)有显著性差异(P<0.01)。结论拉米夫定与抗乙肝转移因子及强肝胶囊联合治疗慢性乙型肝炎可提高抗病毒和抗肝纤维化疗效。

抗乙肝胎盘转移因子的特异免疫活性观察

本研究由ＨＢＶＭ－Ａｂ阳性胎盘提取的抗乙肝胎盘转移因子（ＰＳＴＦ）的特异免疫活性证明，经注射，小鼠外周血淋巴细胞明显增多，胸腺重量和指数亦显著增加，酯酶染色证明７５％属Ｔ－样淋巴细胞，２５％属Ｔｈｙ－样淋巴细胞，人白细胞或小鼠白细胞体外转移ＰＳＴＦ特异免疫活性、或豚鼠和小鼠体内转移ＰＳＴＦ特异免疫活性，再取其白细胞作白细胞粘附抑制、白细胞移动抑制、特异淋巴细胞转化、小鼠足掌注射和诱生干扰素试验，均可得到明显稳定阳性结果，说明ＰＳＴＦ对ＨＢＶ具有特异免疫活性，阳性供体可将ＰＳＴＦ的特异免疫活性转移给阴性受体。

胎盘特异转移因子治疗慢性乙型肝炎200例临床探讨

试自乙型肝炎病毒血清标志(HBVM)阳性胎盘提取特异转移因子(PSTF)治疗慢性乙型肝炎(慢性活动型167例、慢性迁延型16例、慢性活动性肝炎有硬变趋势者11例、肝炎肝硬变6例)200例,平均疗程82天,来见毒副反应,临床治愈率83.0％、进步11.0％、无效6.0％;近期HBsAg、HBeAg阴转率为9.9％和32.8％;出院后平均随访5 1/2月,病情波动者13.9％,出院时进步和无效者,复查时转临床治愈分别为40.0％和50.0％。本文认为PSTF对慢乙肝有较好疗效,值得进一步研究提高。

鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子的制备及鉴定

目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子(EYHBV-TF),并检测其免疫活性。方法用乙肝疫苗免疫母鸡,收集鸡蛋,取卵黄进行透析,制备EYHBV-TF,参照药典要求,采用光谱法、高效液相色谱法(HPLC)、Lowry法等检测其理化性质。采用白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏试验(DTH)检测特异免疫活性。结果EYHBV-TF是一种可透析、含有18种氨基酸、相对分子质量小于12000的小分子物质,其多肽含量为1·2mg/ml,核糖含量为152·94μg/ml,pH6·9±0·5,蛋白反应阴性,最大紫外吸收光谱在270nm处。该EYHBV-TF能明显抑制小鼠白细胞粘附(P<0·01),并能诱导小鼠跖趾部皮肤的迟发型超敏反应(P<0·01),与猪脾淋巴细胞制取的乙肝特异性转移因子(PSHBV-TF)检测结果接近(P>0·05)。而正常卵黄提取液组、非特异性转移因子和甲肝抗原(HAAg)对照组均不能表现出这两种效应(P>0·05)。结论EYHBV-TF与PS-TF主要理化性质和作用相类似,均具有乙肝抗原特异性细胞免疫活性。

抗乙肝特异胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎的Ⅱ期临床对比观察

应用抗乙肝特异胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎28例。结果发现抗乙肝特异胎盘转移因子治疗组的HBeAg、HBV－DNA阴转率及抗HBe阳转率在治疗结束时分别为53．6％、50．0％和42.9％，均显著高于正常胎盘转移因子治疗组（9．1％，P＜0．05）和空白对照组（6．3％，P＜0．01）；随访3个月均为46．2％，均显著高于空白对照组（8.7％，P＜0.01）。正常胎盘转移因子治疗组和猪苓多糖加乙肝疫苗治疗组与空白对照组相比均无显著性差异（P＞0．05）。提示抗乙肝特异胎盘转移因子是一种有效、价廉、使用方便的抗乙型肝炎病毒药物。

乙肝特异性转移因子治疗慢性乙肝29例疗效观察

对29例慢性乙肝患著用乙肝特异性转移因子(TF_(HBV))进行治疗。结果表明对照组、非特异性转移因子(TF_n)治疗组以及TF_(HBV)治疗组,肝功能和HBV感染指标均有改善或阴转,其效果依次为TF_(HBV)>TF_n>对照。在感染指标阴转率上经X^2检验,HBsAg3组之间无显著差异,而HBeAg、抗-HBc、pre-S_1以及HBV DNA3组之间却有显著差异。

乙肝特异性转移因子的制备及鉴定

从HBsAg阳性患者血清中提取纯化的HBsAg和Dane颗粒,经灭活后免疫猪,从猪脾脏和白细胞透析物中制备出乙肝特异性转移因子(TF_(HBV))。经一系列理化性状及药典规定项目的检测均符合生物制品标准,用^(51)Cr白细胞粘附抑制实验(^(51)Cr-LAI)证实该TF_(HBV)具有抗原特异性,体外能转移对HBV的免疫性。

抗乙肝胎盘转移因子治疗乙型肝炎肝硬化疗效观察

目的观察抗乙肝胎盘转移因子治疗乙型肝炎肝硬化的疗效。方法选择193例并发症已控制的活动性乙型肝炎肝硬化病人,予以抗乙肝胎盘转移因子治疗。治疗24周前后观察患者症状和体征(乏力、肝区疼痛、肝脾大)、生化指标如肝功能(ALT、AST、血清总蛋白、清蛋白、总胆红素、A/G等)、血常规、肝纤维化指标(HA、LN、PⅢP、PIVP)、蛋白电泳等项目。结果治疗24周后患者症状和体征及肝功能、血常规、肝纤维化指标、蛋白电泳等指标均得到改善,且与治疗前比较有显著性差异,P<0.05。结论抗乙肝胎盘转移因子对乙型肝炎肝硬化患者的症状和生化指标有较好的改善作用。

用^(51)Cr白细胞粘附抑制实验检测乙肝特异性转移因子的抗原特异性

以^(51)Cr白细胞粘附抑制(^(51)Cr-LAI)实验为指标,研究了乙肝特异性转移因子的抗原特异性。结果表明:只有抗原特异性转移因子(TF_(HBV))可以使未经免疫的鼠脾淋巴细胞对HBsAg产生LAI反应,而非特异性转移因子(TF_n)无此作用。证明TF_(HBV)中确含有促进抗原依赖性细胞免疫反应成分,具有抗原特异性。

抗乙肝胎盘特异转移因子的特异免疫活性观察

报告提取自ＨＢＶＭ一Ａｇ阴性、ＨＢＶＭ一Ａｂ阳性胎盘的特异转移因子的免疫活性，证明经本剂注射的小白鼠外周血淋巴细胞明显增多，胸腺重量和胸腺指数亦明显增加．进而脂酶染色证明７５％属Ｔ一样淋巴细胞，２５％属Ｔｈｙ一样淋巴细胞。此外，用正常人外周血白细胞，或小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞体外转移特异胎盘转移因子（ＰＳＴＦ）的特异免疫活性；豚鼠或小鼠注射ＰＳＴＦ体内转移ＰＳＴＦ特异免疫活性，再取其腹腔巨噬细胞和脾细胞，作白细胞粘附抑制试验、白细胞移动抑制试验、特异淋巴细胞转化试验和小鼠足掌注射试验，均可得到明显阳性结果，说明ＰＳＴＦ对ＨＢＶ具有特异免疫活性，阳性供体可将ＰＳＴＦ的特异免疫活性转移给阴性受体。

不同原料制备乙型肝炎病毒特异性转移因子的研究

目的 为临床治疗乙肝提供一种安全、有效的免疫调节剂。方法 用组织匀浆、反复冻融破碎细胞、透析灭活和过滤除菌等技术 ,获得乙型肝炎病毒特异性转移因子 (HBV STF) ;用Lowry法测多肽含量 ;用苔黑酚显色法测定核糖核酸 (RNA)含量 ,用氨基酸分析仪分析测定HBV STF的水解氨基酸总含量。结果 来源于HbsAg阳性胎盘和HbsAg阳性血液的多肽含量分别为 0 4 9± 0 0 14和 0 2 9± 0 0 13(P <0 0 1) ,RNA含量分别为 0 34± 0 0 10和 0 2 2± 0 0 0 8(P <0 0 1)氨基酸总含量为 198 6± 1 5 6 2和 12 3 4± 1 5 2 1(P <0 0 1)。结论 用HbsAg阳性胎盘制备的乙型肝炎病毒特异性转移因子质量优于HbsAg阳性血液。

阿德福韦酯联合抗乙型肝炎转移因子对慢性乙型肝炎的治疗研究

目的观察阿德福韦酯联合抗乙型肝炎转移因子对慢性乙型肝炎(CHB)的疗效及对HBV DNA的影响。方法184例CHB患者随机分为治疗组和对照组,治疗组92例为阿德福韦酯和抗乙型肝炎转移因子;对照组92例为单用阿德福韦酯,疗程均为12个月,每三个月分别检测肝功能、乙型肝炎病毒血清学标志物、HBV DNA。其中40例患者(每组20例)进行治疗前、后两次肝穿活检。结果在治疗12个月时,治疗组和对照组的HBV DNA差异有显著性意义(P<0.05),治疗组的HBV DNA表达量明显低于对照组,大部分患者肝组织病理有改善。结论阿德福韦酯联合抗乙型肝炎转移因子能在一定程度上提高治疗CHB的疗效,而其对HBV DNA的影响有待进一步的研究。

慢性乙型肝炎治疗中可溶性HLA-Ⅰ类分子含量的动态变化

目的测定可溶性 HLA-Ⅰ类分子的含量在慢性乙型肝炎治疗中的动态变化,并分析其意义。方法慢性乙型肝炎患者分为干扰素治疗组和抗乙肝转移因子治疗组;血清可溶性 HLA-Ⅰ类分子的含量用夹心 ELISA 方法测定。结果完全反应组:治疗第8周可溶性 HLA-Ⅰ类分子的含量显著升高(P<0.05);治疗16周,可溶性 HLA-Ⅰ类分子的含量显著下降(P<0.05),并在之后的治疗中持续保持低水平状态。无反应组:可溶性 HLA-Ⅰ类分子的含量在治疗过程中无显著变化。结论可溶性 HLA-Ⅰ类分子含量的变化对慢性乙型肝炎的治疗效果有一定的指示作用。

体外免疫法制备乙肝病毒特异性转移因子的工艺研究

目的:优化体外免疫法制备乙肝病毒特异性转移因子的工艺。方法:采用猪脾细胞与植物血凝素、乙肝疫苗共同培养,收集致敏细胞在组织捣碎机中破碎,用蒸馏水1∶1稀释,-25℃反复冻融6次,自来水融化后装入透析袋中,用1∶4的蒸馏水作透析外液,于4℃透析48 h,透析液即为乙肝病毒特异性转移因子(HBV-STF)。结果:本品为黄色澄明液体,多肽含量0.493 g/L,核糖含量0.372 g/L,蛋白质反应阴性,紫外光谱在253 nm有最大吸收,E260/E280=2.47。最佳PHA剂量为100 m g/L,最佳乙肝疫苗剂量为20μg/L。结论:用体外免疫法制备乙肝病毒特异性转移因子工艺稳定,制备的转移因子符合质量标准,具有对乙肝病毒抗原的特异性。