丙型肝炎病毒RNA含量与抗-HCV及ALT的关系探讨

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)与抗丙肝病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。方法83份确诊为丙肝的住院患者样本作观察组,95份健康体检人群样本作对照组,用荧光定量逆转录聚合酶反应(FQ-RT-PCR)检测这两组样本的HCV RNA含量,并同时采用ELISA法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定ALT水平。结果观察组HCV RNA含量高于80 copy／ml者67份,抗-HCV阳性者64份,经进一步相关性分析,两者有很好的相关性(r=0．587,P=0．002);83份病例中有58份ALT异常,其异常率随HCV RNA含量的升高而增加。经统计学分析,ALT异常例数和正常例数差异有显著性(P<0．01);ALT水平和HCV RNA含量无相关性(r=0．175,P=0．095);而ALT异常率与HCV RNA含量呈正相关(r=0．903,P=0．036)。结论HCV RNA含量与抗-HCV同时检测可提高临床对丙型肝炎的诊断。HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT的结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎症状态。FQ-RT-PCR法检测HCV RNA具有非常好的临床应用价值。

丙肝患者血清HCV RNA和ALT的相关性

目的:探讨丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)阳性人群血清肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。方法:取334例抗-HCV阳性患者血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗-HCV,荧光定量PCR法检测HCV RNA,全自动生化检测仪测定ALT水平,观察HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组患者血清ALT水平,同时对HCV RNA低载量组、HCV RNA中载量组及HCV RNA高载量组的ALT水平异常率进行Logistic回归分析。结果:在抗-HCV阳性血清样本(334例)中,HCV RNA载量阳性226例(67.7%),HCV RNA阴性108例(32.3%);HCV RNA阳性组患者ALT水平和异常率均高于HCV RNA阳性组患者(P<0.05);HCV RNA低载量组、HCV RNA中载量组及HCV RNA高载量组的ALT异常率分别为33.3%、69.5%、74.4%,ALT均值分别为100.7、103.0及98.6 U/L;Logistic回归分析结果显示,HCV RNA载量与ALT异常率呈正相关(r=0.874,P<0.05);HCV RNA载量与ALT水平变化无明显相关性(r=0.469,P>0.05)。结论:ALT异常率与HCV RNA载量呈正相关,而ALT水平与HCV RNA载量无相关性。

丙型肝炎病毒RNA含量与抗-HCV及ALT的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。方法144例在本院住院和门诊同时检测HCVRNA、抗-HCV及ALT的患者,用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)法检测标本中的HCVRNA,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定ALT水平。结果144例标本中HCVRNA高于上限值34例(23.6%),抗-HCV阳性44例(30.6%),二者有很好的相关性。有46例(31.8%)存在ALT异常,而ALT异常率与HCVRNA含量有一定的比例关系。结论HCVRNA含量与抗-HCV同时检测可提高临床对丙型肝炎的诊断。HCVRNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎性反应状态。FQ-RT-PCR法检测HCVRNA具有非常好的临床应用价值。

丙型肝炎病毒感染的不同人群HCVRNA定量研究

目的了解丙型肝炎病毒感染的不同人群血清 HCV RNA 水平,比较定性和定量 PCR 结果,探讨 HCV RNA 含量与血清ALT 的相关性.方法采用荧光定量 PCR 和逆转录巢式定性 PCR 同时检测136例丙型肝炎病毒感染者血清 HCV RNA,并测定定量 PCR(+)者血清 ALT.用相关系数分析 HCV RNA 含量与血清ALT 的关系.结果定性 PCR 阳性率为80.88%,定量 PCR 阳性率为77.94%.两者相对符合率为94.12%.定量 PCR(+)血清(106例)HCV RNA 含量在10^(7.04)～10^(10.96) 拷贝·L^(-1).无症状献血员 HCV RNA 含量显著低于慢性丙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌患者(P<0.05),肝细胞癌患者血清 ALT 水平显著低于慢性丙型肝炎(P<0.05).HCV RNA 滴度与血清 ALT 呈正相关(r=0.61,P<0.01).结论定性和定量检测结果有很好的一致性.病毒复制水平上升在肝损伤和肝病进展中可能起重要作用.

不同保存条件对血清荧光定量HCV RNA检测的影响

目的了解不同的保存条件对血清标本HCVRNA检测结果的影响。方法实时定量荧光聚合酶链法(FQ-PCR)检测已确诊的HCV患者30例。结果血清标本-20℃存放7d HCV RNA检测结果、加RNA酶抑制剂-20℃保存7d及-20℃反复冻融3次的HCV RNA检测结果差异无统计学意义。结论血清标本-20℃保存7d,加RNA酶抑制剂-20℃保存7d,-20℃反复冻融3次,不影响HCV RNA的检测结果。HCV RNA检测结果重复性不好,应该考虑内、外源性等RNase的降解作用及所用试剂的特异性、敏感性、重复性等因素的影响。

血清HCV RNA不同提取方法的对比研究

目的:探讨不同方法提取丙型肝炎患者血清HCVRNA,比较每种方法提取的RNA用于RT-PCR荧光定量检测的敏感度。方法:分别采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法、固相吸附法、柱式总RNA抽提法提取7例疑似HCV感染者血清标本中的HCVRNA,采用实时荧光定量PCR法进行检测。结果:采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法提取HCVRNA用于核酸检测有漏检现象,而采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法,敏感度均可达到100%。结论采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法提取血清HCVRNA具有较高的敏感度,在实时荧光定量PCR法检测中具有重要的临床价值。

不同基因型丙型肝炎病毒RNA定量分析

目的 根据定量 PCR检测结果 ,了解血清不同基因型 HCV- RNA的含量 .方法 采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 16 6例丙肝患者的血清 HCV- RNA,再进行酶切分型 .计算各型 HCV- RNA平均含量 .结果 定量 PCR阳性血清 (131例 ) HCV- RNA含量在 1× 10 4 .0 4～ 1×10 8.1 1拷贝· m L- 1 .HCV- 型 (10 6例 )、HCV- 型 (18例 )和 / 混合型 (3例 ) RNA平均滴度分别为 1× 10 6 .88± 2 .0 1拷贝· m L- 1 ,1× 10 5.79± 1 .82 拷贝· m L- 1 和 10 5.50± 1 .6 2 拷贝· m L- 1 .结论 定性和定量检测结果有很好的一致性 .HCV- 型病毒含量显著高于 HCV- 型 .

血清中不同基因型丙型肝炎病毒RNA含量的测定

目的了解血清中不同基因型丙型肝炎病毒HCVRNA的含量。方法用实时荧光定量RTPCR和逆转录型特异性引物PCR同时检测21例费城酒精依赖丙肝患者的血清HCVRNA拷贝数并分析HCV基因型。结果21份血清标本中,有17份为HCVRNA阳性。这些阳性血清的HCVRNA含量波动范围在104.60～106.20拷贝/ml。检测到1a和1b两种HCV基因型,其中1a型7例,RNA平均滴度为105.28±0.75拷贝/ml,1b型(9例)RNA平均滴度为105.28±0.28拷贝/ml。结论定性和定量检测结果有极佳的一致性,酒精依赖丙肝基因型1a和1b血清中HCV含量无显著性差异。

检测丙型肝炎患者治疗前后血清HCV RNA含量和ALT水平的应用价值

目的探讨丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平与干扰素治疗效果的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)测定HCV RNA的含量,速率法测定血清ALT水平,测定了16例丙型肝炎患者α-干扰素治疗前和治疗三个月、治疗六个月的HCV RNA含量和ALT水平。结果16例丙型肝炎患者经治疗三个月和六个月HCVRNA含量和ALT水平均显著下降(P<0.05)。经六个月治疗有11例患者(68.8%)HCVRNA含量很低或为零,ALT正常,视为干扰素完全反应者;另外5例为部分及无效反应者。结论FQ—PCR定量准确,用其测定血清HCVRNA含量合并血清ALT水平一起作为丙型肝炎疗效观察指标,对临床制定合理的治疗方案有重要意义。

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法 用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果 128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。

丙型肝炎病毒RNA室内质控品的制备及其临床应用评估

目的探讨自制丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)RNA定量检测室内质控品的可行性,并评估其临床应用价值。方法收集已发过HCV-RNA临床报告的血浆样本,分别将HCV-RNA阴性血浆(<50 IU/mL)、弱阳性血浆(102~103 IU/mL)和强阳性血浆(105~106 IU/mL)混合、离心后,获得阴性质控品(HCV-RNA-N)、弱阳性质控品(HCV-RNA-L)和强阳性质控品(HCV-RNA-H),小量分装后于-80℃冻存。确定靶值后,评价其均一性、重复性、准确性和稳定性。结果自制HCV RNA室内质控品具有良好的均一性、重复性和准确性,可在-80℃保持稳定至少12个月。结论HCV RNA室内质控品制备过程简单,样品均一,重复性好,准确性高,稳定性良好,可用于临床检测HCV-RNA。

3种国产丙型肝炎病毒核酸定量与罗氏试剂检测性能的初步评价

目的评价3种国产丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)定量试剂检测性能。方法应用已批准上市占国内市场50%以上的3种国产HCV RNA定量检测试剂,瑞士Roche公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV Test定量试剂,分别检测经Ortho和DiaSorin公司抗-HCV EIA试剂,CHIRON公司RIBA HCV 3.0SIA及MP Biomedicals Asia Pacific Pte公司确证试剂检测判定的139份抗-HCV阳性及165份抗-HCV阴性血浆样本。采用SPSS 16.0统计学软件,用χ2检验对4种HCV RNA定量试剂阳性检出率进行分析。结果 304份临床样本检测中,3种(A、B、C)国产HCV RNA定量试剂的阳性检出率显著低于瑞士Roche公司的HCV RNA定量试剂阳性检出率(11.51%、12.83%、14.80%vs 26.97%,χ2值分别为23.38、19.08、13.63,P<0.01),国产A、B、C试剂的阳性检出率较为一致(χ2值为1.47,P>0.05)。国产HCV RNA定量试剂漏检样本的HCV RNA载量小于50IU/ml。以罗氏试剂检测HCV RNA水平为依据,国产试剂检测抗-HCV阴性样本的检出与HCV RNA水平不相关(即高值和低值均有检出)。结论应提高国产HCV RNA定量试剂的灵敏度和线性检测范围。

2019-2020年西宁地区丙型肝炎病毒感染者基因序列分析

目的了解2019—2020年西宁地区丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染者HCV感染株基因型。方法采集2019—2020年青海省疾病预防控制中心门诊HCV感染者抗体阳性血清108份,采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)进行HCV-RNA阳性筛查,对HCV-RNA阳性标本进行RT-PCR特异性引物扩增后用直接测序法进行HCV基因片段的测序。结果108份HCV抗体阳性血清标本中共检测到77份阳性血清,经过RT-PCR扩增,共检出54份阳性标本,测序后得到25份核苷酸片段,再经序列测序进化分析得到2a型17份,占总数的68%;1b型8份,占总数的32%。2a型分布于两个不同的分支上,其中一个分支与ZX 2005-197株(KP 721897.1)在同一分支上,此柱为有明显输血史感染柱,另一分支与广州GZ 0160(206047)和KM 26(KF 586099)WL 14(KF 586224.1)的自愿献血者感染株为同一分支;8份1b型分布于3个不同的分支,其中一组与上海的标准株PR 50(HQ 912957.1)在同一分支上,另一组与美国的毒株KY 565218.1亲源关系较近,其余的序列单独形成一个分支。结论西宁地区HCV感染基因型以2a型为主,其次为1b型,此次检测结果与西宁地区其他关于HCV感染主要基因型研究报道有所不同。