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The Effect of Connective Tissue Growth Factor on Human Renal Tubular Epithelial Cell Transdifferentiation 被引量:2
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作者 张春 朱忠华 邓安国 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2004年第4期350-353,共4页
To investigate the role of connective tissue growth factor (CTGF) in transdifferentiation of human renal tubular epithelial cell (HKC), in vitro cultured HKC cells were divided into 3 groups: negtive control, low dose... To investigate the role of connective tissue growth factor (CTGF) in transdifferentiation of human renal tubular epithelial cell (HKC), in vitro cultured HKC cells were divided into 3 groups: negtive control, low dose CTGF-treated group (rh CTGF, 2.5 ng/ml) and high dose CTGF-treated (rhCTGF, 5.0 ng/ml). Then the expression of α-smooth muscle actin (α-SMA) were assessed by indirect immuno-fluorescence, and the percentage of α-SMA positive cells were assessed by flow cytometry. RT-PCR were also performed to examine the mRNA level of α-SMA. Upon the stimulation of different concentrations of rhCTGF, the expression of α-SMA were markedly stronger than that in negative controls. The percentages of α-SMA positive cells were significantly higher in the stimulated groups than that of negative controls (38.9 %, 65.5 % vs 2.4 %, P<0.01) .α-SMA mRNA levels were also up-regulated by the stimulation of rhCTGF (P<0.01). These results suggest that CTGF can promote the transdifferentiation of human renal tubular epithelial cells towards myofibroblast (Myo-F). 展开更多
关键词 connective tissue growth factor human renal tubular epithelial cell transdifferentiation
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结缔组织生长因子反义寡核苷酸抑制TGFβ_1诱导人肾小管上皮细胞转分化 被引量:9
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作者 张璟 卓文磊 +3 位作者 王彦 杨惠标 敖绪军 黄云剑 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1316-1320,共5页
目的探讨转化生长因子β-1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中结缔组织生长因子(CTGF)的表达和作用。方法在用MTT比色、荧光分析证明阳离子脂质体(DOTAP)介导CTGF反义寡核苷酸(AS)转染HKC可行的基础上,将培养的HK... 目的探讨转化生长因子β-1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中结缔组织生长因子(CTGF)的表达和作用。方法在用MTT比色、荧光分析证明阳离子脂质体(DOTAP)介导CTGF反义寡核苷酸(AS)转染HKC可行的基础上,将培养的HKC分为4组:正常对照组(C组);TGFβ1组(T组);TGFβ1加AS组(T+AS组);4、TGFβ1加CTGF错义寡核苷酸组(T+SC组)。分组处理96h后,分别采用免疫组化、Westernblot和RT-PCR技术检测各组CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,并分析CTGF和α-SMA表达量的相关性。结果C组:CTGF和α-SMA表达阴性;T组:CTGF和α-SMA表达阳性;T+AS组:CTGF和α-SMA表达阳性,但皆显著低于T组(P<0.01);T+SC组:CTGF和α-SMA表达皆和T组无显著差异(P>0.05)。相关分析:CTGF和α-SMA在表达量上皆呈较强的线性相关性。结论CTGF的AS能有效地抑制TGFβ1所诱导的TEMT,提示CTGF是TGFβ1诱导TEMT所必需的成份。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 肾小管上皮细胞 肌成纤维细胞 反义寡核苷酸
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高锶矿泉水的细胞毒性研究 被引量:6
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作者 蔺艳 张莹茜 +4 位作者 盘强文 冯志强 李著华 赵成涛 冉兵 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期2125-2128,共4页
目的比较不同浓度的高锶矿泉水对人肝细胞(LO2)、肾小管细胞(HK-2)和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,以了解高锶矿泉水的细胞毒性,探索对人体有益的锶矿泉水浓度及作用。方法将LO2、HK-2、HUVEC分为2、4、6、8 mg/L锶矿泉水组... 目的比较不同浓度的高锶矿泉水对人肝细胞(LO2)、肾小管细胞(HK-2)和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,以了解高锶矿泉水的细胞毒性,探索对人体有益的锶矿泉水浓度及作用。方法将LO2、HK-2、HUVEC分为2、4、6、8 mg/L锶矿泉水组和对照组,先以4×104.mL-1的浓度接种于培养板中,18 h后,分别换成2、4、6、8 mg/L的锶矿泉水和双蒸水配制的DMEM高糖培养基继续培养。根据不同细胞的增殖周期,分别于1、2、3、4、5和7 d时,以CCK-8法观察细胞的增殖情况,用细胞相对增殖率按美国药典标准评价细胞毒性。用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验检测培养3 d后的HUVEC培养基中血管内皮生长因子(VEGF)的分泌量。结果 2、4、6 mg/L锶矿泉水组中锶矿泉水对LO2、HK-2、HUVEC的毒性均为0~1级,8 mg/L锶矿泉水组中锶矿泉水在上述细胞增殖的早期或晚期对细胞的毒性为2~3级。LO2在4、6 mg/L锶矿泉水组中提前出现增殖峰,并较长时间地保持旺盛的增殖状态(P<0.05);HK-2在4、6、8 mg/L锶矿泉水组中生长周期延长(P<0.05),尤以4 mg/L锶矿泉水组的效果最突出(P<0.05)。HUVEC在2、4 mg/L锶矿泉水组中培养3 d后增殖速度加快(P<0.05),明显快于对照组和其他锶矿泉水组(P<0.05),而8 mg/L锶矿泉水组细胞增殖速度总体慢于对照组(P<0.05)。锶矿泉水组细胞分泌VEGF的总量均较对照组减少(P<0.05),但锶矿泉水组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论高锶矿泉水在锶浓度不超过8 mg/L时对肝、肾和血管内皮细胞无明显毒性,对细胞增殖有益,其中锶浓度为4 mg/L的效果最突出,以延长其增殖周期为主。VEGF可能并不是高锶矿泉水促HUVEC增殖的主要作用。 展开更多
关键词 锶矿泉水 细胞毒性 肝细胞 肾小管细胞 血管内皮细胞 增殖 血管内皮生长因子
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肝细胞生长因子对人肾小管上皮细胞转分化抑制作用初步研究 被引量:4
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作者 文晓彦 郑法雷 +2 位作者 苏震 李艳 孙阳 《中国中西医结合肾病杂志》 2002年第7期380-382,386,I001,共5页
目的 :晚近研究提示肝细胞生长因子 (hepatocytegrowthfactor,HGF)具有减轻实验性肾间质纤维化的作用 ,但其机制尚不十分清楚 ;本研究目的在于探讨HGF对人肾小管上皮细胞 (HKC)转分化的作用。方法 :将体外培养的HKC细胞分为 :(1)无血清... 目的 :晚近研究提示肝细胞生长因子 (hepatocytegrowthfactor,HGF)具有减轻实验性肾间质纤维化的作用 ,但其机制尚不十分清楚 ;本研究目的在于探讨HGF对人肾小管上皮细胞 (HKC)转分化的作用。方法 :将体外培养的HKC细胞分为 :(1)无血清培养对照组 ;(2 )阳性对照组 (MCP - 1+AAⅠ ) ;(3)HGF组 (HGF浓度为 0 .0 1,0 .1,1.0 ,10 .0ng/ml) ;(4 )MCP - 1+AAⅠ +HGF组 (HGF浓度 0 .1,1.0 ,10 .0ng/ml)。应用间接免疫荧光法检测HKC细胞内α -平滑肌肌动蛋白 (α -SMA)、波形蛋白、角蛋白表达的变化。应用流式细胞技术检测α -SMA(+)的HKC细胞百分数。结果 :不同浓度HGF分别作用于HKC细胞 48h后 ,经间接免疫荧光法测定该组HKC细胞角蛋白、波形蛋白及α -SMA抗原表达 ,与无血清对照组均无显著差异 ;流式细胞术测得HGF组α -SMA表达阳性HKC细胞百分数 ,与无血清对照组 (平均为 3.1%)也无显著差异 (P >0 .0 5 )。MCP - 1+AAⅠ培养HKC 48h后α -SMA(+)的HKC细胞平均百分数为 85 .6 %。MCP - 1+AAⅠ +HGF(0 .1,1.0 ,10 .0ng/ml)培养HKC 48h后 ,α -SMA(+)的HKC细胞百分数分别为 2 6 .7%,2 .0 %,13.6 %,比阳性对照组显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :(1)HGF对正常HKC细胞转分化无明显影响 ;(2 ) 展开更多
关键词 抑制作用 肝细胞生长因子 肾小管上皮细胞 转分化 肾间质纤维化
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消癥活络方药对TGF-β_1诱导HK-2细胞转分化的影响
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作者 叶豆丹 郭淑婷 +2 位作者 潘志 刘庆彬 王颖航 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1286-1288,共3页
目的通过离体细胞实验研究消癥活络方药含药血清对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响。方法体外培养人肾HK-2,应用不同浓度消癥活络方药含药血清处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞,噻唑兰(MTT)法检测... 目的通过离体细胞实验研究消癥活络方药含药血清对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响。方法体外培养人肾HK-2,应用不同浓度消癥活络方药含药血清处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞,噻唑兰(MTT)法检测细胞增殖,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果 TGF-β1可刺激HK-2细胞增殖,消癥活络方药含药血清可明显抑制TGF-β1引起的HK-2细胞增殖。TGF-β1可引起HK-2细胞α-SMA及CTGF表达上调,消癥活络方药含药血清可抑制其上调。结论消癥活络方药对TGF-β1诱导的HK-2的增殖及α-SMA、CTGF的表达具有抑制作用,可拮抗TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化作用,抑制TGF-β1刺激HK-2分泌细胞外基质可能是其抗纤维化形成的机制之一。 展开更多
关键词 消癥活络方药 转化生长因子β1 人肾近曲小管上皮细胞 转分化
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酸性成纤维细胞生长因子诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用及机制 被引量:4
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作者 钟波 张璟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期778-781,共4页
目的 探讨酸性成纤维细胞生长因子 (AcidfibroblastgrowthfactoraFGF)在大鼠肾小管上皮细胞株 (NRK)转分化中的作用 ,为肾小管 间质纤维化的防治提供理论依据。方法 在NRK细胞的培养基内加入不同剂量的重组人aFGF ,并在Ⅰ型胶原处理... 目的 探讨酸性成纤维细胞生长因子 (AcidfibroblastgrowthfactoraFGF)在大鼠肾小管上皮细胞株 (NRK)转分化中的作用 ,为肾小管 间质纤维化的防治提供理论依据。方法 在NRK细胞的培养基内加入不同剂量的重组人aFGF ,并在Ⅰ型胶原处理过及未处理的玻璃表面 ,无血清培养 6d。使用透射电镜、免疫细胞化学对肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞形态及表型的转变进行评估。结果 不同剂量的aFGF(1、1 0、50ng/ml)处理后的NRK细胞形态和表型发生不同程度的改变 :体积增大、失去尖端 基底极性和微绒毛、细胞延长、具有浸润特征的前后向双末端极性、出现肌动蛋白中间丝结构。免疫组化和Westernblot分析显示加入aFGF后角蛋白表达减少 ,有肌成纤维细胞的特异性标志物α 平滑肌动蛋白 (α SMA)的表达。α SMA阳性细胞的比例与aFGF的浓度呈正相关 ,亲和抗aFGF抗体可消除这种转分化现象。加入aFGF后 ,在玻璃表面α SMA阳性细胞数 (34 4± 0 0 90 ) %较Ⅰ型胶原处理培养表面α SMA阳性细胞数 (74 6± 0 1 0 1 ) %有显著差异 (P <0 0 5)。结论 aFGF在促进肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞转分化的过程中有重要的意义 ,该过程亦与细胞的生长环境有关 。 展开更多
关键词 酸性成纤维细胞生长因子 肾小管上皮细胞 上皮细胞-肌成纤维细胞转分化 肾脏疾病 预后
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