不同浓度HEPES缓冲液对肺炎支原体培养效果的影响

目的观察在商品化肺炎支原体培养基中添加不同浓度的HEPES缓冲液对肺炎支原体培养效果的影响。方法使用未添加及添加终浓度为10、20、30、40、50、60、80mmol/L HEPES缓冲液的商品化培养基,分别接种相同菌量肺炎支原体标准株ATCC29342进行培养,每天采用微孔稀释法定时检测8种培养基中的活支原体数,同时测定8种培养基的pH值,连续检测13d,绘制8种培养基中肺炎支原体的生长曲线和培养基pH曲线。结果肺炎支原体在液体培养基中的生长曲线平台期随HEPES浓度增加逐渐延长,且培养基pH下降速度及程度随HEPES浓度增加相应变慢、变缓。10mmol/L的HEPES可提高肺炎支原体液体培养最大菌量一个数量级,但pH缓冲能力有限,不能延长肺炎支原体生长曲线平台期;〉50mmo/L的HEPES培养基缓冲能力强,可延长肺炎支原体培养平台期2d左右,但不能增加液体培养中肺炎支原体的最大菌量。结论 10--80mmol/L HEPES缓冲液均可影响肺炎支原体液体培养的生长曲线变化,较低浓度的HEPS可提高肺炎支原体液体培养的最大菌量,较高浓度的HEPS可延长肺炎支原体培养平台期,因此可依据实验目的不同添加不同浓度HEPES缓冲液以获取实验结果最优化。

缓冲剂HEPES对大鼠离体心脏缺血/再灌注性心律失常及心功能的影响

目的:研究缓冲剂HEPES对离体大鼠心脏缺血/再灌注性心律失常及心功能的影响.方法:将34只大鼠随机分为3组:心功能组(n=10),心律失常对照组(n=12)和心律失常HEPES组(n=12).在心功能组,先采用KH液(KrebsHenseleit液)灌注60min作为对照,然后改为台氏液灌注20min,最后再恢复为KH液灌注20min.在心律失常对照组和心律失常HEPES组,分别给予KH液和台氏液灌注,并阻断冠脉左前降支30min,接着再灌注30min.观察心功能指标及心律失常严重程度变化.结果:HEPES可使左室收缩峰压(LVSP),左室发展压(LVDP),左室压变化速率(±LVdp/dtmax)明显降低(P<0.05),使缺血性和再灌注性心律失常积分值明显减少(P<0.05).结论:在采用大鼠离体心脏灌注模型的心功能和心律失常研究中,必须充分考虑HEPES对实验结果可能造成的影响.

Fe(Ⅲ)-过氧化氢-亚硝酸盐催化BSA蛋白硝化的影响研究

采用分光光度法研究了不同pH Hepes缓冲液中Fe(Ⅲ)-过氧化氢-亚硝酸盐催化牛血清白蛋白(BSA)发生蛋白质硝化的情况。实验结果表明:在Hepes缓冲液中,EDTA-Fe(Ⅲ)及柠檬酸铁均能够催化过氧化氢-亚硝酸盐引起BSA的硝化。在EDTA-Fe(Ⅲ)-过氧化氢-亚硝酸盐体系中,BSA的硝化程度随pH的升高而依次增强,亚硝酸盐含量随pH值的升高而降低,说明碱性环境有利于EDTA-Fe(Ⅲ)-过氧化氢-亚硝酸盐催化BSA发生蛋白质硝化;而在柠檬酸铁-过氧化氢-亚硝酸盐体系中,BSA的硝化程度随pH的升高而依次降低,亚硝酸盐含量随pH值的升高而升高,说明酸性环境有利于柠檬酸铁-过氧化氢-亚硝酸盐催化BSA发生蛋白质硝化。进一步研究表明:EDTA-Fe(Ⅲ)催化过氧化氢–亚硝酸盐发生蛋白质硝化作用强于柠檬酸铁。

HEPES增强Tb^(3+)和Tb_2Tf的荧光发射峰强度(英文)

Tb作为镧系元素中少数几个有荧光性质的稀士离子,在荧光方面有很多重要的应用。如Tb被广泛用于与蛋白质钙位点结合的荧光探针,同时也可根据Tb的荧光特性,用荧光方法定量分析Tb-有机配体配合物。本研究发现HEPES(常用的pH缓冲剂)可显著增强Tb在585nm的特征荧光发射峰,同时微弱的增强Tb在490nm和549nm的特征荧光发射峰。一直以来,经常使用Tb在549nm处的特征荧光发射峰定量研究Tb化合物的浓度;然而,本研究却发现在进行此类实验时需要慎重选择实验条件,因为Tb荧光的定量分析结果会随缓冲试剂浓度或者含量的变化而改变。另一方面,Tb 585nm处的特征荧光发射峰的荧光强度与HEPES和Tb离子的浓度都有一定的依赖关系,因此Tb 585nm特征荧光发射峰也有被用于荧光定量分析研究的潜能。

HEPES对解脲脲原体生长的影响

解脲脲原体是能人工培养的最小微生物．但培养不易成功、通过在改良Talylor—Rob—inson固体培养中加入0．05M HEPES缓冲液，可延长解脲脲原体存活时间并维持其增殖．为进一步研究其形态、生长特点、营养要求等提供条件．