基于网络药理学探讨仙鹤草治疗慢性疲劳综合征作用机制

目的 采用网络药理学方法研究仙鹤草治疗慢性疲劳综合征潜在作用机制。方法 通过SymMap、HERB数据库获取仙鹤草化学成分和潜在靶点,通过DisGeNET数据库获取慢性疲劳综合征疾病靶点,将化学成分对应靶点与疾病相关靶点去重后获得交集靶点,采用Cytoscape3.9.1软件绘制仙鹤草-化学成分-交集靶点网络,采用STRING数据库并结合Cytoscape3.9.1软件绘制交集靶点相互作用图,DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析,采用CB-Dock平台对关键成分及核心靶点进行分子对接。结果 获得仙鹤草化学成分21个,潜在靶点360个,慢性疲劳综合征相关靶点118个,仙鹤草和慢性疲劳综合征交集靶点22个。GO功能和KEGG通路富集分析显示,仙鹤草调节慢性疲劳综合征涉及181个生物过程、9个细胞组分、10个分子功能及58条信号通路。分子对接结果表明,槲皮素、蛇床子素、木犀草素、β-谷甾醇与核心靶点IL1B、IL6、TNF、PTGS2有一定结合力。结论 仙鹤草抗慢性疲劳综合征可能通过蛇床子素、β-谷甾醇、山柰酚、槲皮素、木犀草素等成分,作用于IL1B、IL6、TNF等靶点,作用机制有调节炎症及免疫反应、改善肠道免疫网络及作用于糖尿病和癌症相关通路等。

仙鹤草干预溃疡性结肠炎的有效活性成分分析及体外作用靶点研究

目的 体外水平初步探究仙鹤草有效活性成分治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。方法 通过数据库筛选仙鹤草的有效活性成分并获得仙鹤草-UC交集靶点,对其靶点进行KEGG和GO通路富集分析,通过分子对接筛选出结合紧密的靶标蛋白。体外构建RAW264.7和Caco-2细胞模型,验证筛选出来的有效活性成分对炎症因子、巨噬细胞极化和肠紧密连接蛋白表达的影响。结果 仙鹤草主要活性成分为:木犀草素、山柰酚、槲皮素、儿茶素、鞣花酸,以上成分能明显调控巨噬细胞极化和炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS、CD86的表达,但是对肠紧密连接蛋白水平没有明显改善。其重要靶标基因为:MMP3、MMP2、BCL2L1、CD40、FOS,主要富集在NF-κB、PI3K-Akt、MAPK、HIF-1、TGF-β等信号通路上。结论 仙鹤草有效成分能降低炎症水平,调节巨噬细胞极化,其机制可能是通过调控MMP3、MMP2、BCL2L1、CD40、FOS等基因从而调控NF-κB、PI3K-Akt、MAPK、HIF-1、TGF-β等信号通路达到治疗UC的作用。

仙鹤草醇提取物对高致病性弧菌感染凡纳滨对虾的防治效果探究

本研究旨在评估仙鹤草醇提取物对高致病性弧菌感染的凡纳滨对虾的防治效果。通过在饲料中添加90%含量的仙鹤草醇提取物,分析投喂3、6、9 d后,感染高致病性弧菌的凡纳滨对虾的肠道微生物、免疫相关基因和肠道组织。结果表明,在病虾肠道内,菌群种类与数量增加,其中希瓦氏菌属、弧菌属和海绵假单胞菌属等致病菌的数量均显著高于健康对虾,且菌群的组成与健康对虾的菌群组成差异较大,对投喂仙鹤草醇提取物添加剂饲料再攻菌的凡纳滨对虾,以上致病菌群的相对丰度显著降低,而有益菌群的溶杆菌属有了大幅的提升。另外,仙鹤草醇提取物还可以保护对虾的肠道组织,提高对虾免疫相关基因TLR、ALF、Crustin与HSP70的表达。饲料中添加仙鹤草醇提取物,能够显著提高对虾感染高致病性弧菌后的免疫力,增强对虾抗菌能力。

仙鹤草提取物对兔血压的影响

目的:研究仙鹤草对兔血压的影响。方法:用颈动脉插管法,连接MS2000多媒体生物信号记录系统,测定仙鹤草水提物和醇提物(相当于原药材0.75、1.5、3.0g/kg,iv)给药前及药后0.5、1.5、3、5、10min时的收缩压、舒张压、平均动脉压和心率。结果:小剂量水提物降压作用不明显,但使心率加快,中、高剂量则使血压下降;3个剂量的醇提物均见血压下降,且中、高剂量组可见心率减慢;药后0.5～1.5min作用达高峰,3～5min后血压和心率基本恢复正常;醇提物对去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的作用无明显影响,但阿托品能减弱其降压作用。结论:仙鹤草提取物能降低兔血压,且醇提物降压作用强于水提物。

中药仙鹤草不同药用部位的体外药效学研究

目的:研究仙鹤草药材不同药用部位的体外抗氧化、抗肿瘤、抗凝血活性,为生药不同部位的合理应用奠定实验基础。方法:采用HPLC色谱法建立仙鹤草不同药用部位的指纹图谱;采用MTT比色法研究仙鹤草不同药用部位对人肝癌细胞株HepG2细胞、人胃癌细胞株HGC-27细胞、人结肠癌细胞株Caco-2细胞增殖作用的影响;采用2,2’-联氮-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法检测仙鹤草不同药用部位的抗氧化能力;采用ELISA法测定仙鹤草不同药用部位对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响。结果:仙鹤草不同药用部位的指纹图谱之间存在明显差异,根、茎、叶、花均显示不同程度抗肿瘤、抗氧化、抗凝血药效,其中茎对HepG2、HGC-27、Caco-2三种癌细胞株的增殖抑制作用强于根、叶、花;叶、花清除DPPH、ABTS自由基的能力强于根、茎;茎、叶降低小鼠血浆凝血酶原水平的能力强于根、花。结论:仙鹤草不同药用部位的抗氧化、抗肿瘤、抗凝血药效存在差异,为仙鹤草药材以药效为导向的不同药用部位的合理使用提供实验依据,为生药不同部位的精准应用奠定实验基础。

仙鹤草提取物镇痛抗炎试验的实验研究

目的：初步探讨中药仙鹤草提取物的镇痛抗炎作用。方法：取仙鹤草的水提取物和乙醇提取物,应用醋酸致小鼠扭体法、小鼠热板法、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和大鼠角叉菜胶足跖肿胀法研究其镇痛抗炎作用。结果：仙鹤草乙醇提取物和水提起物可减少醋酸致小鼠扭体次数,延长小鼠舔足时间,减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀程度,减小角叉莱胶致足跖肿胀程度；乙醇提取物作用强于水提取物。结论：中药仙鹤草乙醇提取物具有明显的镇痛抗炎作用。

基于人肝癌细胞HepG2的仙鹤草挥发性成分体外抗肝肿瘤活性评价研究

目的研究仙鹤草挥发性成分物质组成及其体外抗肝肿瘤活性,为其作为天然抗肝肿瘤药物的开发利用奠定实验基础。方法采用GC-MS法对仙鹤草挥发性成分进行化学成分分析,采用MTT比色法对仙鹤草挥发性成分及其主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸作用于人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制率进行研究;采用AnnexinV-FITC/PI双染法对仙鹤草挥发性成分作用HepG2细胞后凋亡率的变化进行研究。结果仙鹤草挥发性成分中共鉴定出23种化合物,其中主要包括醇类成分(26.54%)、脂肪酸类成分(15.70%)、甾醇类成分(13.96%)、烃类成分(7.49%)和酯类成分(13.82%);仙鹤草挥发性成分能显著抑制HepG2细胞的增殖、促进HepG2细胞凋亡,其主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸均表现出显著体外抗HepG2细胞增殖活性。结论仙鹤草挥发性成分通过抑制癌细胞增殖、促进其凋亡发挥抗肝肿瘤作用,其发挥药效的单体成分有棕榈酸、反式角鲨烯、α-亚麻酸,该研究为仙鹤草挥发性成分作为天然抗肝肿瘤药物的开发利用及进一步的抗肿瘤单体研究等提供理论依据。

仙鹤草降血糖的实验研究

目的 :研究仙鹤草对小白鼠血糖的影响。方法 :分别对正常、肾上腺素诱导高血糖和四氧嘧啶糖尿病小白鼠 ,以 0 .5和 1.0g·kg 1 仙鹤草浸膏灌胃给药 ,对照组给予相同体积纯化水 ,观察给药后的降血糖作用。结果 :仙鹤草连续给药 4～ 7d ,可显著降低正常小白鼠血糖 ,与纯化水对照组比较 ,血糖降低水平差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;仙鹤草连续给药 7d ,可显著抑制肾上腺素诱导的小白鼠血糖升高 ,与纯化水对照组比较 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1) ;仙鹤草能明显降低四氧嘧啶糖尿病小白鼠的血糖 ,与纯化水对照组比较 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 :仙鹤草降血糖作用显著。

仙鹤草对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及炎性因子的干预作用

目的观察仙鹤草提取物对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、胰岛素抵抗及血清中炎性因子的影响。方法采用高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素STZ的方法制备2型糖尿病动物模型,随机分为4组(n=9):模型组、吡格列酮组、仙鹤草高剂量组、仙鹤草低剂量组。灌胃给药4周后取血检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),采用放射免疫法测定空腹血清胰岛素(Fins)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP),并根据Fins,FBG计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果仙鹤草高剂量可显著降低大鼠FBG,FINS,HOMA-IR;可降低甘油三酯,升高高密度脂蛋白;降低血清中炎性因子TNF-α和CRP含量。结论仙鹤草提取物对2型糖尿病大鼠具有降糖调脂的治疗作用,可缓解2型糖尿病胰岛素抵抗,并推测可能与降低血清炎性因子含量有关。

仙鹤草主要化学成分与药理作用研究进展

仙鹤草(Agrimoniae Herba)在我国具有丰富的临床使用经验,据古籍记载其多用于治疗咯血,吐血,脱力劳伤等,随着人们对仙鹤草化学成分和药理作用研究的不断加深,更多的治疗作用被提出和证实,在此基础上对仙鹤草当前研究现状进行综述,为进一步探究仙鹤草的药用价值提供依据。

仙鹤草中鞣质提取研究

研究了仙鹤草中鞣质的提取方法 ,探讨提取溶剂的种类、提取方法对鞣质收率的影响。结果表明 ,以工业甲醇冷浸 2次 ,结合溶剂萃取方法 ,提取效果较佳 ,鞣质的提取率可达 5 0 % ,经定性鉴定 ,所得鞣质主要为缩合鞣质部分。

HPLC测定仙鹤草中山奈酚-3-O-(6-p-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷含量

目的：建立高效液相色谱法测定仙鹤草药材中山奈酚-3-O-（6-P-香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷含量的方法。方法：采用依利特ODS C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-0．05％磷酸（30：70），流速为1．0mL min-1，柱温为30℃；检测波长315nm。结果：山奈酚-3-O-（6-P-香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷的线性范围为1．272—8．904μg·mL-1（r=0．9999）；加样回收率为100．5％，RSD为1．94％。结论：该方法简便易行、准确、重复性好，为仙鹤草药材的质量控制提供了依据。

仙鹤草乙醇提取物抗炎镇痛作用的实验研究

目的 观察仙鹤草乙醇提取物的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯致炎法、酒石酸锑钾扭体法和热板法观察仙鹤草乙醇提取物连续给药 (相当于生药 8 0、16 0 g/kg ,ig ,qd× 5 )后对小鼠的抗炎镇痛作用。结果 仙鹤草乙醇提取物能显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓炎性肿胀 ,对热板所致的小鼠疼痛和酒石酸锑钾所致的小鼠扭体反应均有显著抑制作用。结论 仙鹤草乙醇提取物具有显著的抗炎镇痛作用。

仙鹤草总黄酮纯化工艺研究

目的优选仙鹤草总黄酮纯化工艺条件。方法采用大孔吸附树脂法,以总黄酮含量为评价指标,分别对树脂型号、树脂径高比、上样药液浓度、上样药液速度、洗脱液浓度、洗脱剂用量进行考察。结果优选的纯化工艺条件为选用D101型大孔树脂,上样药液浓度为0.15g/ml,上样速度为1BV/h,树脂径高比为1∶10,洗脱液为3BV 50%乙醇洗脱。固形物中总黄酮含量为31.05%。结论该纯化工艺条件合理、稳定,可用于工业化生产。

仙鹤草治疗儿童原发免疫性血小板减少症

原发免疫性血小板减少症是儿童时期常见的出血性疾病。一般认为,本病的发病机制为血小板破坏过多和血小板生成减少。笔者在多年临床实践中采用仙鹤草的收敛止血作用治疗儿童免疫性血小板减小症,取得比较满意的效果。附典型案例1则,以资验证。

仙鹤草总生物碱提取工艺研究

【目的】确定仙鹤草总生物碱提取的最佳工艺,为仙鹤草的开发利用奠定理论基础。【方法】采用乙醇浸提法对仙鹤草总生物碱进行提取,探讨溶剂浓度、浸提温度、浸提时间和料液比对总生物碱提取的影响,并采用正交法对提取工艺进行优化。【结果】溶剂浓度对仙鹤草总生物碱提取的影响较大,其次是温度,料液比影响较小。优化后的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%、浸提时间1.5h、浸提温度70℃、料液比1∶20,在此工艺条件下仙鹤草总生物碱的平均提取量为1.31mg/g。【结论】以乙醇浸提法提取仙鹤草总生物碱简单方便,且提取率较理想。

邱志楠治疗咳喘用药经验

慢性咳喘患者,病机以肺肾两虚为本,治疗应以扶正固本、温补肾阳为要,邱教授临证常用紫河车、淫羊藿,对于肾阳虚损的久咳顽喘患者,邱教授常加入熟附子;慢性咳喘病人病久入络,络脉不通,邱教授使用虫类药物止咳平喘,且认为虫类药物有抗过敏的作用;久咳顽喘患者,日久肺气上逆,邱教授常用酸枣仁、仙鹤草配伍使用,取其酸收之性;慢性咳喘病痰瘀互结证,邱教授常使用青天葵;对于久咳顽喘有瘀血之象的病人,邱教授常使用五味子、丹参药对。邱教授使用中医药治疗咳喘病具有个人的用药特色,在熟读古典医籍以及谙熟前人的相关经验基础上,借鉴现代中药药理学的研究结果,并验之于临床,遵古而不泥古。

超声波辅助提取仙鹤草多酚工艺研究

为探讨仙鹤草中总多酚的最佳提取工艺,以仙鹤草为材料,采用单因素试验和正交试验优选超声波辅助提取仙鹤草多酚的工艺条件.结果表明,用体积分数为60%甲醇溶液作提取剂,仙鹤草多酚的最佳提取工艺条件为提取温度35℃、料液比1∶20(g/m L)、提取时间25 min、超声功率480 W.在此条件下,仙鹤草总多酚提取率为1.46%,加标平均回收率为96.69%.

正交试验法优选仙鹤草的提取工艺

目的优选仙鹤草的提取工艺。方法采用正交试验设计,以仙鹤草中总黄酮和总多酚含量为指标优选其提取工艺。结果优选提取工艺条件为仙鹤草加8倍量50%乙醇,回流提取3次,每次1 h。结论确定的工艺合理,有效成分提出率高。

仙鹤草降糖有效部位筛选研究

目的筛选仙鹤草降糖作用的有效部位,并初步探讨其降糖机制。方法分别选正常小鼠、四氧嘧啶糖尿病小鼠模型和由葡萄糖灌胃高血糖小鼠模型,观察比较仙鹤草的水、95%乙醇、石油醚和乙酸乙酯提取部位的降糖效果,灌胃剂量为2.0 g.kg-1.d-1,采用苯乙双胍为阳性对照,葡萄糖氧化酶法测定血糖。结果仙鹤草乙醇提取部位连续给药7 d,可显著降低正常小鼠血糖值,与正常对照组比较,血糖降低水平有显著性差异(P<0.05);仙鹤草乙醇提取物能显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖,与模型组比较,有极显著性差异(P<0.01);仙鹤草乙醇提取物能显著降低葡萄糖灌胃高血糖小鼠模型血糖,与模型组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论仙鹤草乙醇提取部位为有效降糖部位。