百蕊草药材中山奈酚和总黄酮的含量测定

目的:应用高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法(UV),分别测定百蕊草药材中山奈酚和总黄酮的含量。方法:以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相,Elite C18柱,在波长为365nm处进行HPLC、UV测定。结果:山奈酚在HPLC进样0.0594～1.896μg和在UV 0.00164～0.0164mg.ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为94.6%、91.8%。结论:该方法较简便、准确、可靠,可以用于百蕊草的质量控制。

百蕊草提取工艺研究

目的 确定百蕊草提取工艺的条件。方法 以山奈酚提取转移率为指标 ,采用正交试验法优选百蕊草提取的工艺条件 ,然后考察提取次数、加水量、提取时间以及溶液醇浓度对提取效果的影响。结果 以 10倍量的水分别提取 2次 ,提取时间分别为 2 h,可使百蕊草药材中总黄酮基本浸出 ,其提取转移率达 73%。

基于UPLC特征图谱和指标成分定量的百蕊草电子束辐照前后品质影响研究

目的研究电子束辐照灭菌对三个产地百蕊草的特征图谱与各指标成分的影响,为评价辐照百蕊草质量提供依据。方法以百蕊草中5-O-阿魏酰奎宁酸、4-O-阿魏酰奎宁酸,百蕊草素Ⅰ和山柰酚-3-O-(2″-O-α-鼠李糖基-6″-O-丙二酰基)-β-葡萄糖苷的含量作为评价指标,通过指标成分含量和特征图谱的检测,同时联合主成分分析(PCA)与聚类分析(CA),评价不同辐照剂量(1、3、6、10、15、20 kGy)对百蕊草质量的影响。结果不同辐照剂量的百蕊草的特征图谱标定5个共有峰,对比辐照样品与未辐照样品的相似度均大于0.99,PCA与CA结果显示各辐照剂量样品的特征峰面积无明显差异,不同辐照剂量的百蕊草药材整体质量相对稳定;含量测定结果显示,百蕊草辐照后,各指标成分含量有所减少但与辐照剂量并无太大相关性,整体波动范围较小,5-O-阿魏酰奎宁酸与4-O-阿魏酰奎宁酸两个酚酸类成分随着辐照剂量的增大呈下降趋势,是受辐照影响较大的活性成分。结论经电子束不同剂量辐照后的百蕊草的特征图谱并无明显变化,各指标成分含量略有降低,总体变化在可接受范围内,辐照灭菌在研究辐照剂量范围内均适用于三个产地百蕊草药材的灭菌。

基于指纹图谱联合化学计量学评价不同产地百蕊草质量的研究

目的:建立不同产地百蕊草的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,结合化学计量学分析方法对不同产地百蕊草的质量进行有效的评价和分析。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,检测波长330 nm,柱温30℃;对不同产地的百蕊草样品进行分析并建立指纹图谱;运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS)技术对其化学成分进行鉴定,同时联合层次聚类(HCA)、正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)分析方法筛选出造成不同产地质量差异的指标成分,以共有峰面积为指标构建灰色关联度模型对样品进行质量评价。结果:30批百蕊草指纹图谱中有8个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均在0.99以上,不同产地的百蕊草药材整体质量相对稳定。HCA与OPLS-DA结果显示各产地样品的部分化学成分差异明显,并筛选出对分组贡献值较大的2个差异性成分,分别为百蕊草素Ⅰ(峰6)和山柰酚-3-O-(2”-O-α-鼠李糖基-6”-O-丙二酰基)-β-葡萄糖苷(峰8),灰色关联度分析显示各省百蕊草质量优劣排序为甘肃、河南、陕西、山西。结论:指纹图谱联合HCA、OPLS-DA、灰色关联度等化学计量学对百蕊草进行质量评价与分析,并对其共有峰进行鉴定的方法稳定、可靠,可全面评定不同产地百蕊草样品的质量情况,为百蕊草综合质量控制与评价、人工栽培引种等研究提供有效手段。