含苍耳类药材复方的数据挖掘及抗肿瘤机制探讨

为挖掘复方中苍耳类药材抗肿瘤的用药规律,并探讨核心药物抗肿瘤的分子机制,通过检索《肿瘤方剂大辞典》等资料,筛选治疗肿瘤的含苍耳类药材的复方制剂,基于关联规则和系统聚类,分析用药规律并获取核心药物组。基于中药系统药理学分析平台筛选核心药物组的化学成分及对应靶点;检索GeneCards等数据库获取肿瘤疾病靶点;二者取交集后获得药物、疾病交集靶点。构建核心药物组抗肿瘤的“中药-成分-靶点”网络及交集靶点的蛋白互作网络。基于R语言行基因本体(gene ontology,GO)功能与京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,基于AutoDock Vina软件行分子对接验证。结果表明:共筛选出相关复方118首。基于数据挖掘结果综合分析,将苍耳子等10味中药作为核心药物组。网络药理学分析共获得交集靶点144个,筛选出β-谷甾醇等5种核心成分,TP53(tumor antigen P53)等5个关键靶点,涉及通路174条,主要包括PI3K-Akt(phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B)、P53、肿瘤坏死因子等信号通路。分子对接提示核心成分与关键靶点结合活性强烈。可见,数据挖掘初步揭示了含苍耳类药材复方的抗肿瘤用药规律,获取了核心药物组;其核心成分β-谷甾醇等可通过作用于TP53等靶点,调控PI3K-Akt等信号通路,发挥抗肿瘤作用。

HPLC法同时测定苍耳类药材中酚酸及蒽醌类成分的含量

建立HPLC同时测定苍耳子、苍耳草药材中绿原酸、新绿原酸、原儿茶醛、原儿茶酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、阿魏酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、芦荟大黄素、大黄素及大黄酚含量的方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（250×4.6 mm,5μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长254 nm,进样量10μL。14种成分的浓度与峰面积的线性关系良好（r〉0.9931）;加样回收率为97.18%~101.09%。苍耳类药材中酚酸和蒽醌类14种成分的含量存在差异,其中绿元素、原儿茶酸含量较高,芦荟大黄素、大黄素、大黄酚含量较低。该方法简单、准确,重现性较好,可用于苍耳类药材内在质量的评价和控制。

UPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定苍耳类药材中酚酸、蒽醌及黄酮类成分

建立了超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱（UPLC-QTRAP-MS/MS）同时测定苍耳草、苍耳子药材中酚酸、蒽醌及黄酮类18种活性成分的方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（250mm×4.6mm×5μm）,以甲醇-0.2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为35℃,选择电喷雾离子源（ESI）,负离子多反应监测（MRM）扫描方式检测。结果表明：在一定的浓度范围内,18种目标化合物的线性关系良好,线性相关系数均大于0.999 4,精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3%;加样回收率在96.81%-102.78%之间,RSD小于3%。该方法简便准确、灵敏度高、重复性好,适用于苍耳类药材中多元活性成分的同时测定,可为苍耳类药材内在质量的综合评价和全面控制提供方法参考。

基于GC-MS技术分析苍耳草与苍耳子的挥发性成分差异

基于气相色谱-质谱(GC-MS)结合多元统计分析法对不同产地苍耳草与苍耳子中挥发性成分组分差异进行研究。样品经GC-MS分析,对所得数据进行峰对齐、切割、滤噪等预处理,用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行数据处理。结果显示,苍耳草与苍耳子样品之间挥发性成分组成得到有效区分,初步筛选并鉴定出33种差异化学成分,其中9种共有差异化学成分呈现不同的变化规律。从苍耳草与苍耳子挥发性成分差异的角度,可为揭示二者药性、药效差异的物质基础提供依据。

枸杞子、白术、细辛、苍耳子对白细胞介素-2受体表达的影响

目的 :观察在刀豆素 A( Con A)刺激下 ,枸杞子、白术、细辛、苍耳子对外周血淋巴细胞表面的白细胞介素 - 2 ( IL- 2 )受体表达的影响。方法 :采用自愿献血者外周血 ,肝素抗凝 ,分离人外周血淋巴细胞 ,配制所需细胞浓度 10 6 /m l。 4种中药为水煎剂 ,对照组用 RPMI- 16 40培养液。在 Con A刺激下观察中药对 IL- 2受体的表达。结果 :枸杞子、白术能明显增强 IL- 2受体的表达 ;而细辛、苍耳子对 IL- 2受体的表达则有明显的抑制作用 ,这种抑制作用并非药物的细胞毒作用。结论

细辛、苍耳子对小鼠干扰素诱生的影响

目的:观察细辛、苍耳子对小鼠干扰素诱生的影响,以探讨其免疫调节作用.方法:将小鼠分为正常对照组、细辛组和苍耳子组.苍耳子与细辛浓度均为1g/ml,前者为0.4g/只小鼠.后者为 0.1g/只小鼠.用新城疫病毒(NDV)诱生α干扰素.用Con A诱生γ干扰素.应用微量细胞病变抑制法滴定干扰素,以Log干扰素滴度的几何平均数为指标.结果:与正常对照组比较,细辛组和苍耳子组对α或γ干扰素的诱生显示显著抑制作用(P<0.01).结论:细辛及苍耳子均有明显抑制NDV和Con A诱导的小鼠脾细胞产生干扰素的作用.

苍耳草与苍耳子的研究进展

综述苍耳草与苍耳子在化学成分、药理作用及毒理学等方面的异同点。苍耳草性微寒,味苦、辛,临床上主治慢性鼻炎、麻风、肠伤寒、皮肤癌、小儿腹泻等。苍耳子性温,味苦、甘、辛,临床上主治鼻渊、风寒头痛、湿疹、疥癣等,是治疗鼻渊的首选药。二者均含有脂肪酸、水溶性苷类、木脂素类、酚酸及其衍生物类化合物、倍半萜内酯、黄酮、蒽醌、生物碱等化学成分,但在一些化学成分的含量上存在差异。苍耳草中白桦脂酸、苍耳亭、石竹烯、伞花烃、紫云英苷等含量高于苍耳子,但α-蒎烯、α-松油醇、绿原酸、原儿茶醛(酸)和一些黄酮类化合物的含量却明显低于苍耳子。苍耳草与苍耳子均具有抑菌、抗肿瘤、抗炎镇痛及抗氧化等药理活性,苍耳草还具有兴奋、抑制、利尿及电解质平衡等作用,苍耳子则还在降压、抗过敏、免疫调节、镇咳及对调节血管系统等方面发挥作用。目前对苍耳草及苍耳子的毒理学研究主要集中在毒性物质和毒性机制两方面,以苍耳子的研究居多,苍耳草的毒理学研究报道较少。本文系统比较苍耳草与苍耳子近年来的研究现状,以期为今后苍耳的进一步开发利用提供科学依据。

毛细管电泳同时测定苍耳类药材中7种酚酸类成分的含量

目的建立高效毛细管电泳法（HPCE）同时测定苍耳类药材中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、异绿原酸A、异绿原酸C、新绿原酸和1,3-O-二咖啡酰奎宁酸含量的方法。方法以50 mmol·L^-1硼砂-水（p H 9.54）为缓冲溶液,未涂渍标准熔融石英毛细管（75μm×64.5 cm,有效长度56 cm）为分离通道,运行电压为25 k V,检测波长为326 nm,毛细管温度为25℃,压力进样为25 k Pa×5 s。结果 7种酚酸的浓度与峰面积的线性关系良好（r〉0.999 4）;加样回收率为99.85%-102.70%。用此法测定了苍耳类药材中7种酚酸的含量,得到满意结果。结论该方法简单、准确,重复性较好,可用于苍耳类药材内在质量的评价和控制。

基于HSGC-MS技术分析苍耳草与苍耳子挥发性成分差异

目的:基于顶空气相色谱-质谱(HSGC-MS)技术,建立了分析不同产地来源的苍耳草和苍耳子中挥发性成分的方法。方法:采用HSGC-MS技术对苍耳草和苍耳子20批样品进行测定,通过NIST05标准质谱检索库对主要化合物进行鉴定,数据处理用SIMCA-P 11.5软件进行主成分分析。结果:主成分得分图显示,苍耳草及苍耳子样品间的差异得到明显区分,通过载荷图和T检验筛选出差异显著的11种标志物丙醛(Propanal,t R/min1.64)、二甲基硫醚(Dimethyl sulfide,t R/min 1.73)、2-甲基丙醛(Propanal,2-methyl-,t R/min 1.83)、正丁醛(Butanal,t R/min 1.95)、2,3-丁二酮(2,3-Butanedione,t R/min 2.07)、2-甲基丁醛(Butanal,2-methyl-,t R/min 2.48)、丙二酸(Propanedioic acid,t R/min 2.74)、1-氯戊烷(Pentane,1-chloro-,t R/min 3.62)、己醛(Hexanal,t R/min 4.62)、庚醛(Heptanal,t R/min 7.97)、a-蒎烯(1R.alpha-pinene,t R/min 9.53)。结论:从苍耳草与苍耳子挥发性成分差异的角度,可为揭示二者药性、药效差异的物质基础提供依据。

苍耳草中多元活性成分动态积累的分析与评价

目的建立超高效液相色谱-三重四级杆／线性离子阱质谱（UPLC—QTRAP—MS／MS）同时测定苍耳草中酚酸、蒽醌及黄酮类18种活性成分的方法，并对其多元活性成分的动态积累进行分析与评价。方法采用Agilent ZORBAX SB—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），以甲醇-0.2％甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，负离子多反应监测（MRM）模式测定；用灰色关联度分析对多元活性成分进行综合评价。结果18种活性成分的浓度与峰面积的线性关系良好（r〉0．9994）；平均加样回收率为96．96％～102．55％，RSD值均小于3％。苍耳草中各成分的积累动态不一，7月中、下旬综合质量较好。结论为揭示苍耳草中多元活性成分的动态积累规律及确定其药材的适宜采收期提供基础资料，同时为苍耳草药材内在质量的综合评价提供新的方法参考，

不同采收期苍耳草中酚酸类及蒽醌类成分的动态积累分析

目的分析不同采收期苍耳草Xanthium sibiricum中酚酸类及蒽醌类成分的动态变化。方法采用HPLC法测定不同采收期苍耳草中酚酸类成分绿原酸、新绿原酸、原儿茶醛、原儿茶酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、阿魏酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸及蒽醌类成分芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的量。结果不同采收期苍耳草中酚酸类及蒽醌类成分的量呈动态变化,总酚酸量7月中旬较高,总蒽醌量7月下旬较高;绿原酸、原儿茶醛、阿魏酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸5种主要酚酸总量7月中旬较高,其中绿原酸量以6月下旬较高,其余均以7月中旬较高。结论为确定苍耳草药材的适宜采收期提供依据。