女贞子-墨旱莲药对提取物的指纹图谱和化学成分鉴定研究

目的建立女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱以控制其质量,并对提取物中所含有的化学成分进行结构鉴定。方法采用HPLC法,固定相为ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;建立15批不同产地女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱,对其进行相似度评价、聚类分析和正交偏最小二乘方判别分析;采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)联用技术,分别在正、负离子扫描模式下对提取中的化学成分进行检测,基于高分辨质谱一级和二级数据进行结构鉴定。结果由不同产地药材随机组合的15批女贞子-墨旱莲药对提取物的相似度介于0.865~0.992之间,药对指纹图谱中共确定了16个共有峰,指认了其中7个色谱峰;液质联用共检测到55个化合物,采用对照品准确鉴定了7个成分的化学结构,并推测了其它48个化合物的可能化学结构。结论建立的指纹图谱方法简便可靠,重复性好,可用于女贞子-墨旱莲药对提取物的质量控制研究;UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS联用技术可实现对女贞子-墨旱莲药对提取物中化合物的结构鉴定,为其后续研究奠定了基础。

墨旱莲及蟛蜞菊内酯抗骨质疏松研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种常见的骨代谢疾病,以骨量减少、骨微观结构改变、易发生骨折为特征的骨质病变。目前,西药治疗OP往往会引起不同程度的不良反应,中药治疗OP具有一定优势和特色。以中医理论“肾主骨生髓”为指导,补肾中药常用于临床治疗OP,效果显著。墨旱莲(Ecliptae Herba)为滋补肝肾的传统中药。新近研究表明,墨旱莲及其主要成分蟛蜞菊内酯具有良好的抗骨质疏松作用。对墨旱莲及蟛蜞菊内酯防治OP的骨形成、骨吸收作用及潜在分子机制进行综述,旨在为墨旱莲及蟛蜞菊内酯的临床应用与开发提供借鉴。

墨旱莲化学成分及药理作用研究进展

墨旱莲Eclipta prostrata L.为菊科植物鳢肠的干燥地上部分,是二至丸、凉血安神片等中成药的重要组成部分之一。近些年,对墨旱莲展开了大量的化学成分和药理作用方面研究,证实了墨旱莲中含有三萜、甾体、黄酮、香豆素、噻吩、酚酸、生物碱等化学成分,该植物及其提取物具有保肝、抗骨质疏松、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、止血、乌发等药理作用。文章参阅近些年文献以及相关研究深入阐述墨旱莲化学成分以及药理作用,以期为墨旱莲临床应用研究提供理论依据。

反相高效液相色谱法同时测定墨旱莲中的蟛蜞菊内酯和异去甲基蟛蜞菊内酯

建立了同时测定墨旱莲中香豆草醚类成分蟛蜞菊内酯和异去甲基蟛蜞菊内酯含量的高效液相色谱法。采用Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5um），流动相为甲醇-0．5％醋酸水溶液（体积比为55：45），流速为1．0mL／min，检测波长为351nm，柱温为30℃，进样量为20uL。在上述条件下测得的异去甲基蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯的质量浓度分别在1．6～32．0mg／L和5．6～112．0mg／L时与色谱峰面积之间的线性关系良好，二者高、中、低浓度条件下的平均加标回收率分别为97．5％～98．2％和99．0％～100．2％。该方法简便、快速、准确，可作为墨旱莲质量控制的一个有效方法。

高效液相色谱法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量

目的建立了同时测定旱莲草中木犀草素和芹菜素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法采用Shim-pack CLC-ODS色谱柱（150mm×6mm，5μm），流动相为乙腈-2％的醋酸水溶液（体积比为30：70），流速1．0ml·min6^-1，检测波长340nm，柱温为40℃。结果在上述条件下，木犀草素和芹菜素的质量浓度分别在0．003～0．24mg·ml^-1和0．0025～0．20mg·ml^-1时与色谱峰面积之间的线性关系良好，两者的平均加标回收率分别为100．6％和102．5％。结论该方法快速、简便、准确，可用于旱莲草中木犀草素和芹菜素的HPLC测定。

旱莲草水提物对荷S_(180)实体瘤小鼠抗肿瘤作用

目的研究旱莲草水提物对S180实体瘤的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法将小鼠S180实体瘤模型随机分为5组:0.9%氯化钠溶液组,环磷酰胺0.02 g.kg-1组和旱莲草水提物低、中、高剂量(10.00,15.00,20.00 g.kg-1)组。旱莲草水提物各剂量组灌胃给予旱莲草水提物,qd,连续10 d;环磷酰胺组与0.9%氯化钠溶液组腹腔注射(ip)给药,qod。观察小鼠肿瘤生长情况、体重及免疫器官变化。结果旱莲草水提物低、中、高剂量组荷瘤小鼠肿瘤生长均受到显著抑制,抑瘤率分别为42.94%(P<0.01),55.91%(P<0.01)和52.06%(P<0.01);旱莲草水提物低、中、高剂量组小鼠胸腺指数均高于0.9%氯化钠溶液组和环磷酰胺组,环磷酰胺组脾指数和胸腺指数均显著降低(均P<0.05)。结论旱莲草水提物对荷瘤小鼠的肿瘤生长有抑制作用,并对小鼠的免疫系统有增强作用。

固定化脂质体色谱研究二至丸及其组成药物的经肠吸收成分

目的:应用固定化脂质体色谱(ILC)分析中药复方二至丸及其组成药物的经肠吸收成分及质量控制。方法:分别观察不同溶剂提取时提取液在ILC色谱柱上的色谱保留与分离,同时对在ILC色谱柱上保留的槲皮素及芹菜素进行了定量分析。结果:从ILC色谱柱保留峰的数目和峰面积两方面观察,墨旱莲的75%乙醇提取优于水提取。二至丸75%乙醇提取液中槲皮素的含量为9.6μg.g-1,芹菜素的含量为2.7μg.g-1。墨旱莲提取液中槲皮素的含量为2.8μg.g-1,芹菜素的含量为3.8μg.g-1。女贞子提取液中槲皮素的含量为9.1μg.g-1,而芹菜素用ILC未检测到。结论:槲皮素和芹菜素是二至丸中主要的可在ILC色谱上保留的成分,其中槲皮素来源于两个组成药物女贞子和墨旱莲,芹菜素仅来源于墨旱莲。槲皮素和芹菜素可能是二至丸的经肠吸收活性成分。固定化脂质体色谱有望成为中药及其复方肠吸收成分的初筛选和定量评价方法之一。

旱莲草对免疫系统的影响

中药旱莲草为菊科一年生草本植物鳢肠(Eclipta prostrata L.)的全草,具有滋阴益肾、凉血止血之功效,临床用于治疗肝肾阴虚、阴虚血热引起的头晕目眩、须发早白、吐衄。

二至丸及其组成药味保肝药理作用研究进展

二至丸由女贞子和墨旱莲两味中药组成,这两味药及其组方均有不同程度的保肝作用。二至丸中含有多种保肝有效成分,主要有三萜类、环烯醚萜类、苯乙醇-苷类、香豆素醚类等,它们能对抗多种化学性肝损伤、抗缺血再灌注性肝损伤以及抗肝纤维化等,其保肝作用机制包括抗氧化应激、抗炎、抑制肝星状细胞增殖和活化、促进肝星状细胞凋亡以及影响肝细胞代谢过程等。总结二至丸及其组成药味女贞子和墨旱莲的保肝作用,探讨其保肝作用机制,以期为进一步研究二至丸药效物质基础提供参考。

墨旱莲对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的药效学研究

目的探讨中药墨旱莲对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的药效作用。方法 3月龄SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组(RA,75 mg/(kg·d))、墨旱莲组(1.46、0.73、0.37 g/(kg·d))、仙灵骨葆组(1.5 g/(kg·d))。除正常组外,其余各组给予维甲酸造模2 w,造模同时给予墨旱莲、仙灵骨葆。实验过程每日称量体重,连续给药6w后测定血钙(S-Ca)、血磷(S-P)、血清中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)的水平,尿液中钙(U-Ca)、磷(U-P)、脱氧吡啶啉(DPD)的水平。采用DXA型骨密度仪检测大鼠的股骨、第4椎骨、胫骨的骨密度(bone mineral density,BMD)。三点弯曲试验检测左侧股骨生物力学性能:最大载荷、结构硬度、能量吸收、最大应力、弹性模量。Micro CT法分析右侧股骨骨微结构。结果墨旱莲1.46 g/(kg·d)能显著升高模型组大鼠的血钙水平,同时降低尿钙、ALP、OCN和DPD(P<0.05)水平。与模型组相比,墨旱莲1.46 g/(kg·d)对维甲酸所致骨质疏松大鼠的股骨、第四椎骨及胫骨骨密度分别提高8.17%、11.79%、14.59%(P<0.05),对最大载荷、结构硬度、能量吸收、最大应力、弹性模量等生物力学参数分别提高13.98%、16.33%、40.18%、12.45%、34.96%(P<0.05),同时能有效抑制维甲酸所致大鼠股骨干骺端骨小梁微结构的退化(P<0.05)。结论墨旱莲1.46 g/(kg·d)对维甲酸所致大鼠的骨质疏松症有防治作用,其作用机制可能与增强钙吸收、促进成骨细胞活性、降低骨转换率有关。

旱莲草水提物对低氧模型小鼠的影响

目的观察旱莲草水提物对低氧模型小鼠的保护作用。方法分别采用异丙肾上腺素、亚硝酸钠、小鼠断头和失血性休克等方法制备低氧模型,观察旱莲草水提物对低氧小鼠耗氧量、存活时间、心脏搏动时间和张口呼吸时间的影响。结果灌胃给予旱莲草水提物15和30 g.kg-1,能降低异丙肾上腺素所致心肌低氧小鼠的耗氧量,延长低氧存活时间;增加离体鼠头的张口呼吸次数;但缩短亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间和失血性休克小鼠的心脏搏动时间。结论旱莲草水提物对异丙肾上腺素所致心肌低氧小鼠具有保护作用。

顶空进样GC-MS结合保留指数分析墨旱莲挥发性成分

采用顶空-气相色谱-质谱法(HS-GC-MS)对墨旱莲的挥发性成分进行检测,并结合保留指数对其分析鉴定。结果检测到60个组分,鉴定出33个可能的组分,占挥发性成分的70.0%。该研究为墨旱莲药材挥发性成分的指纹图谱研究奠定了基础。

反相高效液相色谱法分离测定墨旱莲中的鳢肠醛

对墨旱莲中的有效成分鳢肠醛进行了分离和结构鉴定,并对其含量进行了分析。色谱条件:Kromasil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(体积比为65:35),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为365nm,进样量为10μL。结果表明,鳢肠醛的峰面积与其质量浓度有良好的线性关系(r=0.9993)。方法的加样回收率为96.7%～100.0%。该方法简便、快速、准确,可作为墨旱莲质量控制的一个有效方法。

墨旱莲水提物的抑菌活性研究

以大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为供试菌,研究墨旱莲水提物的抑菌活性。制备不同含量的墨旱莲水提物的培养基,接种大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,测定不同培养时间的抑菌效果。结果表明,墨旱莲水提物对大肠杆菌有轻微的抑制作用,抑菌活性较弱;对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,抑菌活性较强。

HPLC法同时测定大鼠口服墨旱莲提取物后血浆中四种黄酮类化合物

目的：建立同时测定大鼠口服旱莲草提取物后血浆中4种黄酮含量的HPLC法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Neocleodur 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇-0.2%磷酸溶液（50∶50）,B为乙腈,梯度洗脱。流速为1.0 m L/min,检测波长为350 nm,柱温40℃。结果：木犀草素、芹菜素、野黄芩素和香叶木素在浓度为0.02-50μg/m L时与色谱峰面积比之间的线性关系良好,平均回收率为71.5%-90.2%。结论：该方法快速、简便、准确,可用于大鼠血浆中木犀草素、芹菜素、野黄芩素和香叶木素的HPLC测定及药动学研究。

墨旱莲化学成分与药理活性的研究进展

综述墨旱莲的化学成分、药理作用和临床应用。墨旱莲含有三萜、香豆草醚、黄酮、噻吩、甾体和挥发油等物质,具有保肝、免疫调节、抗纤维化、抗炎镇痛、抗自由基抗氧化、抗肿瘤和酶激活等药理作用,以墨旱莲为组方的各类制剂也在临床上广泛应用。

精乌颗粒质量标准研究

目的:研究精乌颗粒定性定量质量标准。方法:利用 TLC 作为墨旱莲的定性鉴别方法,展开剂为苯-正己烷-石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(2.5:2.5:1:3.5:1);HPLC 作为2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定方法,采用迪马 C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(25:75),流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为320nm。结果:TLC 定性鉴别能检出供试品中墨旱莲;2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围为0.02～0.3mg·mL^(-1),r=0.9998;平均回收率为99.03%,RSD 为0.97%(n=5)。结论:本方法快速、简便、准确,重现性好,结果可靠,可用于精乌颗粒质量控制。

旱莲草对酪氨酸酶激活作用的动力学研究

酪氨酸酶是黑素生物合成途径中的主要限速酶 ,旱莲草有促进酪氨酸酶活性的作用。通过对旱莲草的水提液和乙醇提取液促进酪氨酸酶活性作用的观察研究及旱莲草提高酪氨酸酶活性的动力学观察研究 ,得到lineweaver burk曲线、动力学回归方程及米氏Km值。为进一步研究中药有效成分能使白发变黑的分子机理奠定了基础。

旱莲草水提物对小鼠的抗炎镇痛作用

目的观察旱莲草(HEP)水提物的抗炎镇痛作用。方法采用二甲苯致炎法、光辐射热甩尾法、冰醋酸扭体法观察旱莲草灌胃给药后对小鼠的抗炎镇痛作用。结果 HEP水提物能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓炎性肿胀,对光热辐射所致的小鼠疼痛和冰醋酸所致的小鼠扭体反应均有显著抑制作用。结论旱莲草具有显著的抗炎镇痛作用。

响应曲面法优化墨旱莲三萜总皂苷提取工艺研究

目的利用响应曲面法优化墨旱莲三萜总皂苷提取过程,比较普通粉碎与超微粉碎对墨旱莲三萜总皂苷提取过程的影响。方法通过单因素试验探讨了粉碎度、提取时间及乙醇体积分数对墨旱莲三萜总皂苷提取率的影响,利用响应曲面法优化提取工艺。结果最佳提取工艺参数:药材为超微粉碎12分钟的粉末,提取溶剂为70%的乙醇溶液,提取时间为44分钟。结论超微粉碎技术可显著提高墨旱莲三萜总皂苷的提取率,所优选提取工艺稳定可行,适于工业化推广。