携载人IL－12的重组1型单纯疱疹病毒溶瘤特性的观察

目的构建删除ICP47并携载人IL－12的重组HSV－1，并在体外培养细胞和荷瘤小鼠体内研究其溶瘤特性。方法利用细菌人工染色体技术获得删除ICP47的重组HSV－1 MH1005及其携载人IL－12的重组HSV－1 MH1006。检测HSV－wt、MH1005和MH1006感染多种神经肿瘤细胞时的复制水平和抑瘤效果。在小鼠背部两侧皮下注射Neuro－2a细胞建立荷瘤小鼠模型，分别于0、3和6 d在一侧瘤内注射2×106 PFU HSV－wt、MH1001（删除IR的重组HSV－1）、MH1005、MH1006和病毒储液（Mock），观察肿瘤大小和小鼠生存时间。结果MH1005、MH1006和HSV－wt在293FT细胞中的复制能力差异均无统计学意义（均P〉0.05）；重组HSV－1在G422和Neuro－2a细胞中的复制能力高于SK－N－SH细胞；重组HSV－1可显著抑杀神经肿瘤细胞。荷瘤小鼠治疗15 d时，HSV－wt、MH1001、MH1005和MH1006治疗组病毒注射侧肿瘤体积依次为（6 267±484）、（5 730±1 071）、（4 537±538）和（4 150±476） mm3，显著〈Mock组肿瘤体积（6 957±722） mm3（P〈0.01）；未注射侧肿瘤中，MH1005[（5 952±607） mm3]和MH1006[（5 473±661） mm3]治疗组肿瘤体积显著〈HSV－wt组[（6 785±1 063） mm3]、MH1001[（6 774±808） mm3]和Mock组[（6 957±190） mm3]（均P〈0.05）；小鼠治疗35 d时MH1005（100%）和MH1006组（100%）生存率显著高于MH1001组（67%）、HSV－wt治疗组（50%）和Mock组（33%）（均P〈0.05）。结论MH1005和MH1006可感染神经肿瘤细胞并高效复制，其直接抑杀肿瘤细胞的同时还可诱导小鼠对肿瘤细胞的免疫排斥，并延长荷瘤小鼠生存期。