和胃安神方对失眠模型大鼠5-羟色胺、多巴胺及去甲肾上腺素水平的影响

目的:探讨和胃安神方对失眠模型大鼠下丘脑5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)水平的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,即正常对照组、失眠模型组、地西泮组、和胃安神方低剂量组、和胃安神方中剂量组、和胃安神方高剂量组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠下丘脑组织5-HT、DA、NE的水平。结果:与正常对照组比较,失眠模型组大鼠5-HT水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),DA、NE水平较正常对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与失眠模型组比较,地西泮组、和胃安神方低剂量组5-HT、DA、NE水平差异均无统计学意义(均P>0.05);和胃安神方中剂量组、和胃安神方高剂量组5-HT水平均较失眠模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),DA、NE水平较失眠模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:和胃安神方治疗失眠症的疗效机制可能与调节脑内5-HT、DA、NE水平有关。

和胃安神方治疗失眠的网络药理学和分子对接机制研究

目的:通过网络药理学和分子对接研究和胃安神方(HWASF)治疗失眠的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),筛选出HWASF主要有效成分和各中药靶蛋白;在生物信息综合数据库(GeneCards)搜索失眠疾病靶点;利用R语言将HWASF-Insomnia靶点取交集并绘制韦恩图,上传STRING和Cytoscape构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图;交集靶点投射到Metascape基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;采用Cytoscape插件构建调控网络图;以蛋白自带配体为中心完成分子对接等可视化操作、构象评分和结合模式分析。结果:通过TCMSP并结合文献,筛选出HWASF中19个有效成分与134个中药靶点数;GeneCards数据库获得1074个失眠靶点,经韦恩图得到49个HWASF-Insomnia共有靶点;GO富集发现HWASF治疗失眠可能参与第二信使介导信号传输、凋亡等多项生物过程,体现突触后膜整体成分、细胞体等多种细胞功能,包括肾上腺素能受体活性、神经递质受体活性等多类分子功能;筛选其靶点富集于多巴胺能突触、5-羟色胺能突触等多条KEGG信号通路,涉及药物代谢、神经递质、细胞凋亡、免疫等功能。分子对接发现HWASF可通过山柰酚等有效成分作用于RELA等失眠靶点达到治疗失眠作用。结论:HWASF治疗失眠的作用机制可能与其调控RELA、TNF、FOS等核心基因及其通路的多靶点、多成分、多途径有密切关系。

和胃安神方治疗应激性失眠男性患者52例随机对照试验

目的观察和胃安神方治疗应激性失眠的临床疗效和安全性。方法将104例应激性失眠男性患者随机分为治疗组和对照组各52例,治疗组口服和胃安神方,每日1剂;对照组口服酒石酸唑吡坦片,每次10 mg,每日1次,两组均治疗4周。分别于治疗前后应用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)总分评价睡眠质量,采用福特应激失眠反应量表(FIRST)评分评价失眠易感性,健康调查简表(SF-36)[包括生理健康(PCS)和心理健康(MCS)两个领域,PCS包括一般健康(GH)、生理功能(PF)、生理职能(RP)、躯体疼痛(BP),MCS包括情感职能(RE)、社会功能(SF)、精力(VT)、精神健康(MH)]评分评价生活质量,疲劳量表-14(FS-14,包括躯体疲劳、脑力疲劳评分)评价疲劳程度,并采用自拟失眠中医证候调查表进行中医证候评分。治疗后判定临床疗效和中医证候疗效。治疗过程中记录不良事件及不良反应的发生情况。结果治疗组临床疗效总有效率为90.38%(47/52),对照组为80.77%(42/52),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组中医证候疗效总有效率为80.77%(42/52),高于对照组的44.23%(23/52),差异有统计学意义(P<0.01)。两组治疗后中医证候积分,FIRST评分,FS-14评分中躯体疲劳评分、脑力疲劳评分及总分均降低,且治疗后治疗组各评分均低于对照组(P<0.05)。两组治疗后SF-36评分各项转化分均较本组治疗前升高,且在PF、RP、VT、MH四个维度方面优于对照组(P<0.05)。两组患者均未有不良事件及不良反应的发生。结论和胃安神方能提高应激性失眠男性患者的睡眠质量,有效缓解疲劳、疼痛等临床症状,改善中医证候,提高生活质量,降低失眠易感性,且安全性好。

和胃安神方对失眠模型大鼠下丘脑生物钟基因CLOCK、BMAL1表达的影响

目的探讨和胃安神方治疗失眠的可能作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾司唑仑组与和胃安神方低、中、高剂量组。除正常组外其余各组大鼠采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)2天构建大鼠失眠模型。造模成功后,艾司唑仑组予以0.33 mg/(kg·d)艾司唑仑水溶液灌胃,和胃安神方低、中、高剂量组分别给予浓度为1、2、4 g/ml的和胃安神方10 ml/kg灌胃,正常组和模型组大鼠给予10 ml/kg的生理盐水灌胃,均每天1次,连续7天。实验期间观察大鼠一般情况,给药后每天测量大鼠体质量。最后一次给药后次日采用戊巴比妥钠协同实验观察各组大鼠睡眠情况,记录睡眠潜伏期及睡眠时长;采用免疫组化法和Western Blot法检测大鼠下丘脑时钟节律调节蛋白(CLOCK)、脑和肌肉芳香烃受体核转运样蛋白1(BMAL1)表达情况。结果模型组大鼠在各时间点体质量较正常组大鼠降低(P<0.01);与艾司唑仑组同时间比较,和胃安神方低剂量组大鼠在给药第5、6、7天体质量升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠睡眠时长缩短(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠睡眠时长增加(P<0.01);和胃安神方高剂量组与艾司唑仑组睡眠时长比较差异无统计学意义(P>0.05),而和胃安神方中、低剂量组睡眠时长较艾司唑仑组缩短(P<0.01)。各组大鼠睡眠潜伏期比较差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化法和Western Blot法检测结果均显示,与正常组比较,模型组大鼠下丘脑中CLOCK、BMAL1表达显著减少(P<0.01);和胃安神方低、高剂量组大鼠下丘脑中CLOCK、BMAL1表达均较模型组增多(P<0.05或P<0.01)。结论和胃安神方可改善模型大鼠的失眠状况,其作用机制可能与上调下丘脑生物钟基因CLOCK、BMAL1蛋白表达有关。