Hedgehog/GLI与胃癌的研究进展与现状

刺猬/胶质母细胞瘤相关蛋白(相关癌基因同源物)(hedgehog/glioblastoma-interrelated-protein,Hh/GLI)是一个重要的信号通路.现已在多种癌症研究中得到证实,突变或失调的Hh信号可能为干扰肿瘤行为表型,导致多种癌症的发生.异常激活的Hh通路赋予肿瘤细胞发生、增殖和迁移的倾向.近几年又研究发现Hh信号通路诱导胃癌(gastric cancer,GC)侵袭和上皮间质转化.本文就Hh/GLI与GC相关的研究进展与现状作一评述.揭开GC发生的新面纱,将为Hh/GIL靶向治疗GC开辟了新途径.

高三尖杉酯碱对人三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨高三尖杉酯碱(HHT)对人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞系MDA-MB-231迁移和侵袭的影响,并初步分析潜在机制。方法 采用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞活力。采用EdU结合实验以评估细胞增殖。分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭。采用流式细胞术分析乳腺癌干细胞(BCSC)含量。采用球体形成试验评估MDAMB-231细胞“肿瘤球”形成能力。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Hedgehog(HH)信号通路效应因子Gli1 mRNA和乳腺癌细胞干性指标Oct4、CD44、Sox2和Nanog mRNA的表达。采用蛋白免疫印迹分析上皮间质转化(EMT)标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白以及Gil1蛋白表达。结果 HHT以剂量依赖性的方式降低MDA-MB-231细胞活力(P<0.05)。HHT可抑制BC细胞的增殖、迁移和侵袭。此外,HHT可下调BC细胞中CD44+/CD24-细胞比例、降低MDA-MB-231细胞形成“肿瘤球”的能力并抑制Oct4、CD44、Sox2和Nanog mRNA表达,提示HHT可抑制MDA-MB-231细胞干性。HHT可通过抑制“肿瘤球”中E-cadherin表达并增加N-cadherin和Vimentin蛋白来可抑制BCSC的EMT。此外,HHT可抑制TNBC中HH/Gli1信号通路活化。同时,HHT能够消除Gli1过表达对TNBC干性和EMT的影响。结论 HHT能够抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭,这可能是通过调控HH/Gli1信号通路以抑制TNBC的干性和EMT来实现。

鼻咽癌组织中Gli-1表达与淋巴管新生及淋巴结转移的关系

目的:探讨鼻咽癌组织中Gli-1蛋白表达与淋巴管新生及淋巴结转移的关系。方法:应用免疫组织化学技术检测69例鼻咽癌及15例正常鼻咽上皮组织Gli-1蛋白表达和淋巴管密度(LVD),分析Gli-1蛋白表达水平与鼻咽癌患者临床病理特征及LVD之间的关系。结果:Gli-1蛋白在鼻咽癌组织中的表达高于正常鼻咽上皮(P<0.01),并且Gli-1蛋白表达与肿瘤淋巴管密度(r=0.464,P<0.01)和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:Gli-1在鼻咽癌过度表达可能调控淋巴管新生和促进淋巴结转移。

GLI1转录因子突变及异构体在恶性肿瘤的研究进展

Hedgehog(HH)信号通路在胚胎发育、细胞分化等过程起核心调控作用。该信号传递障碍可导致发育缺陷,而异常激活可引起人体各种恶性肿瘤。核转录因子GLI家族(GLI1、GLI2及GLI3)是经Hh配体激活HH通路的最终底物,其中GLI1是靶向阻遏该通路治疗肿瘤的最有效靶点。已发现GLI1存在突变和包含5种异构体,这些异构体呈不同的组织表达和功能模式。笔者就GLI1突变及异构体与恶性肿瘤特性的关系作一综述。

口腔鳞状细胞癌中Hh通路关键分子Shh/Ptch/Gli-1的表达及临床意义

[目的]探讨Hh通路关键分子Shh、Ptch、Gli-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法分别检测40例口腔鳞状细胞癌组织和30例口腔黏膜正常组织中Shh、Ptch、Gli-1的表达。[结果]Shh、Ptch、Gli-1在30例正常口腔黏膜中均无表达,在口腔鳞状细胞癌中,Shh、Ptch、Gli-1阳性率分别为62.5%、60.0%和65.0%。Shh、Gli-1的阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05),Ptch表达与淋巴结转移相关(P﹤0.05)。Spearman等级相关分析显示Shh、Ptch和Gli-1的表达间均存在正相关(rs=0.527、0.406、0.578,P<0.01)。[结论]Shh、Ptch、Gli-1蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中均过表达,三者可能通过配体依赖途径被激活并参与口腔鳞癌的发生发展、转移。

Hedgehog信号通路抑制因子SUFU在肿瘤中的作用机制研究进展

刺猬信号通路(Hh)首先在普通果蝇中被鉴定,是一种高度保守的信号从细胞膜传递到细胞核的进化途径,其传导失调被证实与一系列恶性肿瘤的发生、发展相关。丝氨酸/苏氨酸激酶Fused抑制物(Sufu)是Hh信号通路的关键调控因子,主要通过调节该通路的末端转录因子胶质瘤相关癌基因同源物(Gli)的表达来抑制Hh信号通路,起肿瘤抑制因子作用。本文主要就Sufu调控Hh信号通路的分子机制以及Sufu蛋白自身活性调控的研究进行综述,旨在为未来肿瘤的诊疗和预防提供依据。

SPOP调控Hh信号通路促进食管鳞癌细胞增殖和凋亡

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)SPOP表达对细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对比SPOP在正常食管上皮细胞(HEEC)和ESCC细胞(ECA109、EC9706和TE-1)中的表达。敲低SPOP,qRT-PCR检测细胞转染效率。CCK8实验和细胞克隆形成实验检测SPOP对ESCC细胞的增殖影响。流式细胞术检测SPOP对ESCC细胞凋亡及周期的影响。qRT-PCR和蛋白质印迹法检测敲低SPOP后ESCC细胞Hh信号通路相关蛋白表达的变化。结果与HEEC细胞相比,SPOP基因在ECA109、EC9706和TE-1细胞中mRNA表达升高,t值分别为2.77、3.00和3.23,P值分别为0.047、0.038和0.026。CCK8实验结果显示,与对照组相比,敲低SPOP后,第1、2、3、4和5天ECA-109细胞的活性逐渐降低,F=10.12,P<0.001。细胞克隆形成实验结果显示,与对照组相比,敲低SPOP后,ECA-109细胞克隆形成数量减少,t=6.31,P=0.002。流式细胞术检测SPOP对ECA-109细胞凋亡的影响,结果显示,与对照组相比,SPOP敲低组细胞凋亡数增多,t=6.98,P=0.001。与对照组相比,SPOP敲低组中ECA-109细胞处于G_(1)期细胞比例增多(t=4.02,P=0.012),S期和G_(2)/M期细胞比例差异无统计学意义,P>0.05。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,抑制SPOP基因的表达后,Cul3基因在mRNA水平的表达增高(t=3.91,P=0.014),Gli3基因表达降低(t=14.20,P<0.001),而Gli1和Gli2基因表达差异无统计学意义,P>0.05。蛋白质印迹法结果显示,转染siSPOP后,Gli3和Gli1蛋白表达水平均降低(t值分别为4.89和7.21,P值分别为0.005和0.001),Gli2、Cul3和PSMC3蛋白表达水平均升高(t值分别为4.19、3.01和5.13,P值分别为0.011、0.038和0.005)。结论SPOP在ESCC中高表达,可能通过调控Hh信号通路促进ESCC细胞的增殖、抑制细胞凋亡和促进细胞G_(1)/S期转换。