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题名稻曲病菌UV-2菌株细菌人工染色体文库构建及分析
被引量:5
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作者
刘庆丽
王晓明
王革娇
罗朝喜
谭新球
罗美中
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机构
华中农业大学生命科学技术学院
华中农业大学植物科学技术学院
湖南省农业科学院植物保护研究所
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1715-1722,共8页
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基金
农业部公益性行业专项项目(No.200903039-3)
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文摘
【目的】稻曲病(Rice false smut)是由稻曲病菌[Villosiclava virens(Cooke)Tak.]引起的严重危害水稻的真菌病害。构建稻曲病菌UV-2的大片段DNA细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库,为致病相关基因的鉴定及在图位克隆、比较基因组学等方面的研究奠定基础。【方法】以幼嫩菌丝为材料制备大分子基因组DNA包埋块,用Hind III部分酶解后经脉冲凝胶电泳筛选,回收大片段DNA并与pIndigoBAC536-S载体连接,连接产物转化大肠杆菌菌株DH10B T1 Phage-Resistant细胞后进行蓝白斑筛选,白色菌落捡入384孔板置于80°C低温保存。【结果】成功构建UV-2菌株的高质量、高覆盖度的BAC文库,该文库共含10 368个克隆,平均插入片段为124.4 kb,空载率小于1%,约覆盖该菌基因组的36.8倍。【结论】克服了真菌大分子基因组DNA制备难控制的技术难题,建立了首个稻曲病菌的BAC文库。该文库已作为一种公共基因组资源向研究者开放(http://GResource.hzau.edu.cn)。
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关键词
大分子dna
细菌人工染色体
水稻
稻曲病
稻曲病菌
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Keywords
high molecular weight dna, bacterial artificial chromosome, rice, rice false smut, villosiclava virens
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分类号
S435.111.4
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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