Analysis of Pesticide Raid^(█) in Feed of Wistar Rat by High-Pressure Liquid Chromatography (HPLC)

The distribution of pesticide by-product in tissues of wistar rats were analyzed using high pressure liquid chromatography. The limit of detection of the HPLC was 0.1 μg. Results show bioaccumulation factor of pesticide “Raid?” in lipid, up to three times that of the feed at the first concentration and gradually decreased as the concentration increased in the muscle > (0.7), brain > (0.5) and liver > (0.3) as indicated in the text. At higher concentration of 961 μg/g, bioaccumulation factor decreased in the lipid to 1.2 and 0.6 in the muscle, 0.03 in the brain and 0.08 in the liver respectively. High Pressure Liquid Chromatography (HPLC) analysis of raid extract suggests the presence of micprothrin and palethrin. The implications are numerous, but simply put that accidental ingestion of chlorinated hydrocarbon as in “Raid?” may involve convulsions, collapse and coma after only brief excitation and ataxia at the onset.

黑参炮制工艺优化及成分变化分析

以人参为原料,采用高温高压法炮制黑参,加工过程中使用蒸制与焖制结合的方法,缩短黑参的炮制时间,利用单因素试验和正交法优化黑参的炮制工艺,以感官评价为参考值,考查蒸制时间、烘干时间、烘干温度3个因素对黑参品质的影响。结果表明,在蒸制时间120 min,烘干时间8 h,烘干温度60℃时,炮制出的黑参的品质最佳;其含水量平均为10.132 513%,人参皂苷含量分别为0.033 g/100 g (Re),0.141 g/100 g (20(S)-Rg3);0.256 g/100 g(20(R)-Rg3)。与原参相比,黑参的稀有人参皂苷Rg3含量增加,人参皂苷Re含量减少。

HPLC法测定龙牡壮骨颗粒中甘草酸的含量

目的建立以高效液相色谱法(HPLC)测定龙牡壮骨颗粒中甘草酸含量的方法。方法采用Capcell pak C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(40∶60)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为20μL,检测波长为254 nm。结果甘草酸铵在质量浓度为0.814~40.70μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系[相关系数(r)≥0.999],平均加样回收率为96.52%[相对标准偏差(RSD)为0.85%]。结论此实验所建立的方法简便、准确、专属性强,测定结果重复性好,可为龙牡壮骨颗粒的质量控制提供依据。

皮革中19种含氯苯酚的快速测定方法研究

建立了高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定皮革中19种含氯苯酚。样品采用甲醇(10%乙酸铵)混合溶液超声萃取,经色谱柱ZORBAX RRHD StableBond C18(21 mm×100 mm,18μm)分离,HPLC-MS/MS测定。结果表明,19种含氯苯酚在1~50μg/L浓度范围内呈现线性(R2>099),3个不同添加水平的平均回收率在813%~1237%,精密度(n=7)为08%~97%。本方法简化了前处理过程,灵敏度高,重现性好,可用于皮革中19种含氯苯酚的快速检测。

基于捕集柱阵列的制备型二维液相色谱纯化烟草中的4个组分

二维液相色谱(2D-LC)因具有较高的峰容量,在复杂样品的分离分析中获得了广泛的关注。然而,制备型2D-LC以纯化高纯单体为目标,在方法开发和设备构成等方面与分析型2D-LC有较大的不同,目前尚未得到充分的开发,在大规模的制备纯化中应用较少。本文以一套制备液相色谱模块为分离系统,以稀释泵、切换阀和捕集柱阵列为接口,构建了新型的制备型2D-LC系统,旨在规模化纯化多个活性成分。以烟叶中可以用作医药原料的烟碱、绿原酸、芦丁和茄尼醇等组分为目标物,考察了不同类型填料对样品的捕集效率、过载条件下的色谱保留行为等,优化了制备色谱条件。进而利用在线2D-LC系统实现了烟叶提取物的纯化,通过一次运行获得了4个高纯化合物。该系统具有中压色谱纯化成本低、系统在线运行自动化程度高、稳定性好及容易放大等优点。烟叶中活性化学成分的回收利用对促进烟草行业的发展及带动地方农业经济开发具有重大的意义。

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定扶正补血食疗方胶原蛋白含量

目的基于RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定,并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法于2021年12月至2022年1月将样品以6 mol/L盐酸于110℃水解24 h,利用AQC试剂进行衍生,采用Diamonsil-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以流动相A:无水乙酸钠11.48 g,三乙胺1.72 g,EDTA 1 mg,溶于1 L水中,用磷酸调pH为4.95;流动相B:乙腈水溶液(体积分数60%),梯度洗脱;柱温37℃;检测波长254 nm;流速1 mL/min;进样量10μL。以羟脯氨酸含量为评价指标,考察煎煮时间、料水比、煎煮温度对胶原蛋白含量的影响,优化其制备工艺。结果羟脯氨酸在10~500 mg/L浓度范围内线性关系良好(Y=0.0365X+0.5173,R^(2)=0.9991),平均回收率95.11%,相对标准偏差(RSD)为1.12%(n=6)。猪蹄胶原蛋白的最佳提取工艺为:A_(3)B_(1)C_(3),即加热温度为100℃,料水比为1∶8,提取时间为3 h。结论该方法快速准确,稳定可行,可作为扶正补血食疗方中胶原蛋白含量的测定方法,为该产品质量控制及临床应用提供科学依据。

超高效液相色谱波长切换法同时测定芪参还五胶囊中4种成分含量

目的建立超高效液相色谱(UPLC)波长切换法同时测定芪参还五胶囊中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷4种化学成分含量。方法2021年5月至2022年1月,采用UPLC,色谱柱为WATERS ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,进样量1μL,检测波长分别为检测波长为400 nm(羟基红花黄色素A)、230 nm(芍药苷)、320 nm(阿魏酸)和260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)。结果羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的线性范围分别为1.34~26.80 mg/L(r=0.9998),2.46~49.20 mg/L(r=0.9999),0.582~11.64mg/L(r=0.9999),0.62~12.40 mg/L(r=0.9999);平均加样回收率分别为101.11%(RSD=1.64%)、99.62%(RSD=0.79%)、100.66%(RSD=2.13%)、101.93%(RSD=1.08%)。结论该方法简便、快速、准确性好,可为全面控制芪参还五胶囊的质量提供参考。

生长抑素三硫化物的制备与质谱分析

采用生长抑素与硫代硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(3))反应生成生长抑素三硫化物,并使用高压制备液相色谱法将其纯化后冻干,利用高分辨质谱对其精确分子量、肽序列与三硫键连接位点进行检测。结果表明,当生长抑素与Na2S2O3摩尔比为1∶2时,60℃水浴下反应1 h,即可生成生长抑素三硫化物,对其纯化、脱盐、冻干后,最终获得纯度大于95%的目标物。通过质谱分析,其加合离子[M+2H]^(2+)的m/z为835.3539、[M+3H]^(3+)的m/z为557.2369,肽序列为A-G-C-K-N-F-F-W-K-T-F-T-S-C,三硫键连接位点为Cys(3)-Cys(14),均与理论结构一致。该研究可为生长抑素的质量研究提供依据。

HPLC法测定妇康宝口服液中芍药内酯苷和芍药苷的含量

目的建立妇康宝口服液中芍药内酯苷和芍药苷的高效液相色谱含量测定方法。方法采用ACE Excel 5 C18-AR色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(13∶87)为流动相,测定波长为233 nm,流速为1.0mL/min,柱温为30℃。结果芍药内酯苷和芍药苷进样量分别在0.0252~0.5049μg(r=1.0000)和0.0480~0.9602μg(r=1.0000)范围内与峰面积呈现良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为103.66%和99.31%,RSD分别为0.72%和1.21%。结论该方法简单,重现性好,可以应用于妇康宝口服液中芍药内酯苷和芍药苷的含量测定。

逍遥丸高效液相色谱指纹图谱的建立

目的建立逍遥丸的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法以CAPCELLPAK C18(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水溶液(0.1%磷酸)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长230nm建立逍遥丸HPLC指纹图谱。结果建立6批样品的指纹图谱,指纹图谱中经匹配共标定11个共有指纹峰,指认3个指纹峰,分别为芍药苷、甘草酸铵和柴胡皂苷B2。结论所建立的逍遥丸HPLC指纹图谱可以有效地用于逍遥丸的鉴别和质量评价。

Plasma amino acid profiling of cancer patients with abnormal Savda based on high-performance liquid chromatography

OBJECTIVE: To investigate metabolic signatures in plasma of cancer patients with abnormal Savda using plasma-free amino acid profiles, and to evaluate the diagnostic potential of these profiles for the detection and explanation of the mechanisms of different symptoms in traditional Uyghur medicine.METHODS: Plasma samples from cancer patients with abnormal Savda(n=85) or non-abnormal Savda(n=105) and a healthy control group(n=65)were analyzed using high-performance liquid chromatography(HPLC). Orthogonal projection to latent structures with discriminant analysis was used for the classification and prediction of abnormal Savda, and spectral profiles were subjected to Student's t-tests to assess statistical significance.RESULTS: Compared with the healthy group, the levels of aspartic acid, glutamate, glycine, histidine,arginine, threonine, alanine, proline, methionine,isoleucine, leucine and phenylalanine decreased significantly in plasma of cancer patients with abnormal Savda(all P<0.05). Serine, cystine, tyrosine,valine and lysine levels showed no significant differences(all P>0.05). Compared with non-abnormal Savda syndrome patients, abnormal Savda syndrome patients showed high concentrations of glutamate, serine, valine, isoleucine, leucine and phenylalanine(all P<0.05). The remaining plasma amino acids showed no significant differences(all P>0.05).CONCLUSION: Plasma-free amino acid profiling has the potential to assist in understanding and determining abnormal Savda. A HPLC-based metabonomic platform could be a powerful tool for the classification of symptoms in traditional medicine.

高效液相色谱多波长切换法同时测定更年宁中7种有效成分的含量

目的 建立高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定更年宁中7种有效成分的含量。方法 2021年6月至2022年2月,采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%磷酸水溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为35℃,检测波长为232 nm、226 nm、276 nm。结果 芍药苷、特女贞苷、黄芩苷、汉黄芩苷、丹皮酚、黄芩素、汉黄芩素分别在6.24~103.96、8.21~136.80、14.48~241.36、2.29~38.10、3.33~55.46、1.16~19.36、0.43~7.22 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r≥0.999 5,平均回收率分别为100.00%、99.30%、98.48%、97.26%、97.94%、102.01%、99.33%,相应的相对标准偏差(RSD)为2.09%~4.05%。结论 该法准确、可靠、灵敏度高,为进一步完善更年宁的质量标准提供依据。

大黄代煎液中5种蒽醌类成分的稳定性研究

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)检测大黄代煎液中5种蒽醌类成分(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)的含量,考察不同储存状态对其含量的影响。方法采用HPLC-DAD,流动相为0.1%甲酸水-乙腈体系,线性梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,色谱柱温度为25℃,进样体积为5μl,测定不同储存温度和时间下大黄代煎液中5种蒽醌类成分的浓度。结果5种蒽醌类成分在相应浓度范围内线性关系良好,其精密度、重复性、稳定性和加样回收率良好;低温储存28 d内药液5种蒽醌类成分基本稳定,常温和高温储存3 d内基本稳定。结论所建立的HPLC-DAD法稳定性、快速、重复性好,可应用于大黄代煎液中5种蒽醌类成分的含量测定;大黄代煎液在冷藏条件下稳定性较好。

基于柱前衍生高效液相色谱法测定蚕蛾中丙氨酸含量的研究

目的建立柱前衍生蚕蛾中丙氨酸含量的测定方法,为不同产地蚕蛾品质评价和质量控制实验依据。方法采用柱前衍生高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm);柱温20℃;流动相A为乙腈-水(1∶1),流动相B为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液(pH=6.4),梯度;流速1.0 ml/min;检测波长为360 nm。结果丙氨酸进样量在0.04~0.2μg范围内呈良好线性,回归方程为Y=274444X+9597.5;相关系数r=0.9996。结论建立的含量测定方法专属性强、准确度高,重复性良好,可用于蚕蛾药材的质量控制。

高效液相色谱测定大鼠心肌组织腺苷酸含量

目的:优化高效液相色谱(HPLC)法检测大鼠心肌组织腺苷酸的含量.方法:ODS HYPERSIL C18分析柱,检测波长254 nm,流动相为50 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 6.5).结果:心肌三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)平均回收率分别为99%～107%,96%～104%和95%～119%;日内和日间相对标准偏差(RSD)分别在1.5%和5.1%以下.结论:优化高效液相色谱法快速准确、简便易行.

变性高效液相色谱分析检测人类糖皮质激素受体基因变异

目的 :以变性高效液相色谱分析 (DHPLC)检测糖皮质激素受体基因 (NR3C1)在中国人群中的变异情况。方法 :提取 6 4例中国人基因组DNA ,参照文献所报道的引物序列 ,PCR方法扩增糖皮质激素受体基因编码区(2～ 9α外显子 )及其邻近的部分内含子序列 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定产物后 ,以DHPLC检测PCR产物 ,对洗脱曲线异常者进行DNA测序。结果 :经DHPLC分析和DNA测序证实 ,研究人群的NR3C1基因中存在 8处变异 ,5处为新发现 ;其中有 2组变异呈紧密连锁的单倍型 ,均为首次报道 ,它们在人群中的基因型频率达 3.1%与 14 .1% ;另一处变异出现频率相对较低。结论 :成功地建立了以DHPLC检测NR3C1基因变异的方法及技术参数 ,证实在中国人群中NR3C1基因存在变异 ,其中 2种频率较高的单倍型为新发现。

大鼠脑组织单胺类递质及其代谢产物的检测方法研究

目的 :研究大鼠脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相反相离子对色谱测定法。方法 :采用LiChrosorbC18,10 μm色谱柱 ,流动相为甲醇 :水 (4 0 :60 ) ,含 0 .0 2 8g LEDTANa2 ,0 .15g LSDS ,0 .2ml LH2 SO4(pH 2 .5～ 3 ) ,荧光检测波长 :λEX=2 85 ,λEM=3 3 3。结果 :对 87只大鼠脑组织中 4种单胺类递质及其代谢产物的含量进行了同时测定 ,高香草酸 (HVA) 2 .5 0～ 40 .0 μg ml、去甲肾上腺素 (NE) 0 .0 1～ 0 .5 0 μg ml、多巴胺 (DA)0 .0 5～ 1.0 0 μg ml、5 羟色胺 (5 HT) 0 .0 2 5～ 0 .5 0 μg ml,峰面积与其含量呈良好的线性关系。 结论 :该法操作简便、快速、准确 ,为组织中单胺类递质及其代谢产物检测的一种理想方法 ,并适用于临床相关研究。

超高压提取丹参素的研究

该文研究常温下超高压提取丹参素的最优工艺。采用超高压常温提取,正交试验对丹参素超高压提取工艺优化,高效液相色谱法测定丹参素的含量,并与传统的热回流提取法进行比较。结果显示优选的最优工艺为:提取压力300 MPa,溶剂乙醇浓度80%,溶液pH 13,浸泡时间16 h,在此条件下丹参素得率为0.465%。超高压提取不仅得率高、时间短、耗能低,而且提取产物易于分离、纯化,同时超高压提取可以维持在低温下进行,特别适宜于受热不稳定化合物的提取,该技术适合中药有效成分的快速提取。

加压溶剂提取高效液相色谱法测定天然和人工虫草中的麦角甾醇、核苷及其碱基

目的 建立同时测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基含量的简便方法。方法 正交法优化加压溶剂提取条件 ;HPLC法同时测定天然和人工虫草中上述成分的含量。结果 以甲醇为提取溶剂 ,提取温度 16 0℃ ,提取时间 5min ,提取压力 10MPa ,循环 1次 ,提取 1次。采用ZorbaxNH2 分析柱 (2 5 0mm× 4 6mmID ,5 μm) ,流动相为A(乙腈 ) B(10mmol·L- 1 醋酸铵溶液 )二元梯度洗脱 :0 - 5 0min ,B %为 0→ 15 % ;5 0 - 2 5 0min ,B %为 15 %→ 2 0 % ;2 5 0 - 35 0min ,B %为 2 0 %→ 4 0 % ;35 0 - 4 5 0min ,B %为 4 0 %→ 80 % ;4 5 0 - 5 0 0min ,B %为 80 %。结论 本法能够快速、简便地测定虫草中麦角甾醇、核苷及其碱基的含量。

蜜蜂毒中蜂毒素的分离纯化方法及含量测定

目的 :从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 (melittin) ,建立以 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)及 HPL C进行蜂毒素定性定量分析的方法。 方法 :用 Sephadex G- 2 5、Sephadex G- 5 0、Sephadex G- 75三步层析法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,以SDS- PAGE定性 ,以 HPL C进行含量测定。结果 :样品经 SDS- PAGE测定为单一条带 ,相对分子质量约 30 0 0。 HPL C含量测定 ,平均回收率为 95 .97% ,相对标准差 (RSD)为 1.0 7%。结论 :以上述分离纯化法可制得高纯度的蜂毒素 ,检测方法准确、可靠、简单。