DA3200-ABI7500全自动核酸提取平台高敏HCV RNA定量检测性能验证

目的验证DA3200-ABI7500全自动核酸提取高敏检测HCV RNA方法性能。方法参考美国临床实验室标准化协会批准指南(CSLI-EP),采用DA3200全自动核酸提取平台及荧光定量PCR检测HCV RNA,评价检测方法的核酸提取纯度、精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、特异度和抗污染能力等性能指标。结果核酸提取后A260nm/A280nm比值为2.02。高、低两个浓度样本的批间精密度和批内精密度CV值均≤5%。正确度与抗干扰能力方面,标本实测值与靶值之间的偏离度≤±0.4lg。在13~1.3 E+06 IU/ml范围内,检测结果与靶值有良好的线性关系(Y=0.984X-0.186,r^2=0.998)。最低检出限为20 IU/ml的检出率为100%,且系统具有较强的特异度和抗污染能力。结论基于DA3200-ABI7500全自动核酸提取高敏检测HCV RNA各项分析性能指标均较好,高敏检测对治疗过程的监测及治疗终点判定具有重要意义。

高灵敏度HCV RNA检测在术前筛查中的应用

目的探讨高灵敏度HCV RNA检测在术前筛查中的应用。方法收集2019年1月至10月间本院术前筛查患者血清标本1005例,同时采用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)和高灵敏度实时荧光定量PCR法分别检测血清中的HCV抗体和HCV RNA载量。对HCV抗体S/CO值与高灵敏度HCV RNA定量检测结果进行比较与相关性分析,并对HCV抗体S/CO值预测丙型肝炎病毒血症的效能进行评价。结果1005例血清标本中,HCV抗体阳性标本228例,阳性检出率为22.7%,未检出HCV抗体阴性而HCV RNA阳性标本;在HCV抗体阳性的样本中,高灵敏度实时荧光定量PCR法检测出HCV RNA阳性样本83例,检出率为36.4%;HCV抗体S/CO值的高低与HCV RNA定量值之间无相关性。以HCV抗体S/CO值≥10.7作为预测丙型肝炎病毒血症的临界值,其灵敏度与特异度分别为92.59%和77.93%,可较好地预测HCV病毒血症。结论高灵敏度HCV RNA定量检测用于术前筛查丙型肝炎患者,可以准确反映患者体内病毒的复制情况和传染性,与传统的术前筛查方法相比,可区分现症感染和既往感染,并具有快速、灵敏和特异的优点,有良好的临床应用价值。

国产高敏HCV-RNA定量试剂与国产普敏及进口高敏试剂一致性分析

目的分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与国产普敏HCV-RNA核酸检测试剂B进行HCV-RNA定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果均为阳性的样本(≥500 IU/mL,87例)进行Bland-Altman一致性分析;选择稀释样本(15~500 IU/mL,60例),采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂C进行HCV-RNA平行定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果进行Bland-Altman一致性分析。结果Bland-Altman分析显示试剂A与试剂B定量值差值均值为(-0.0326)log_(10)IU/mL,95%置信区间为(-0.4626~0.3974)log_(10)IU/mL,95.4%(83/87)的样本检测值在95%置信区间内。试剂A与试剂C定量值差值均值为0.1800 log_(10)IU/mL,95%可信区间为(-0.0907~0.4506)log_(10)IU/mL,96.67%(58/60)的样本检测值在95%置信区间内。结论国产高敏定量试剂A与国产普敏定量试剂B在≥500 IU/mL检测结果具有一致性,国产高敏定量试剂A与进口高敏定量试剂C在15~500 IU/mL具有检测结果高度一致性。

高灵敏度HCV RNA检测在慢性丙型肝炎患者中的诊断及治疗检测应用

目的探讨高灵敏度HCV RNA检测在慢性丙型肝炎患者中的诊断及治疗评价方面的临床意义。方法收集本院就诊的130例未经治疗的丙肝抗体阳性的初治患者(初治组)和既往曾经抗病毒治疗、结束时用普通试剂检测结果低于检测下限(<1000 IU/mL)且达到停药标准的148例患者(停药组),同时采用普通检测方法(检测值下限为1000 IU/mL)和高灵敏度检测方法(检测值下限为20 IU/mL)检测HCV RNA并进行对比;另外收集46例丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因分型为1b型的慢性丙型肝炎初治患者,予患者抗病毒治疗,同时使用2种方法检测患者治疗前和治疗后2、4、12周的HCV RNA结果,进行对照分析。结果初治组普通方法检测阳性125例,阴性5例,高灵敏度检测方法阳性126例,阴性为4例,2者对比差异无统计学意义(P>0.05),停药组普通方法检测阳性6例,阴性为142例,高灵敏度方法检测阳性16例,阴性为132例,后者阳性率高于前者(P<0.05)。1b型的慢性丙型肝炎治疗2周后普通方法检测组6例(13%)阳性,高灵敏度方法组42例(91.3%),4周时普通检测方法组阳性为0例,高灵敏度方法组为4例(8.7%),12周普通检测方法组HCV RNA阳性率为0,高灵敏度方法组为1例(2.2%);高灵敏度方法组在治疗2周后检测HCV RNA阳性率明显高于普通方法组(P<0.05),治疗前、治疗4周、12周2组对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论高灵敏度检测法用于监测和评价慢性丙型肝炎患者的疗效灵敏性更高,可用于指导慢性丙型肝炎的疗效评估。