半夏白术天麻汤在大鼠心脏的代谢产物研究

目的半夏白术天麻汤在大鼠心脏的代谢产物研究。方法采取大鼠灌胃给药,建立了半夏白术天麻汤代谢产物的超高效液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间/质谱(ultra-high-performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-ESI-Q-TOF/MS)分析方法。采用安捷伦SB-C18色谱柱(3 mm×150 mm,1.8μm)。流动相由0.1%甲酸水溶液(A)和乙腈(B)组成,流速为0.3 mL/min。采用0~15 min,15%→90%B的梯度洗脱程序用于分离,质谱采用正、负离子模式检测心脏组织样品。根据分子量以及质谱的碎片离子数据,结合体内代谢反应规律,对复方中各味药中主要成分进行指认和分析研究。结果半夏白术天麻汤各味药中主成分及其代谢产物共鉴定了38个,其中正离子模式下有32个,负离子模式下有6个。大鼠灌胃给药后,半夏白术天麻汤在大鼠心脏中依次发生I相和II相代谢反应,主要的代谢方式为氧化、还原、水解、谷胱甘肽化、亚硫酸化、葡萄糖醛酸化、甲基化和乙酰化。结论首次研究半夏白术天麻汤在大鼠心脏的代谢产物及代谢途径,为半夏白术天麻汤治疗心血管疾病的药理作用机制及临床应用提供科学依据。

用反相高效液相色谱-紫外检测法测定1-脱氧野尻霉素的含量

以0.05 mol/L HC l为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的1-脱氧野尻霉素(DNJ),并用9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC)为衍化剂,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,再用反相高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为100.7%。精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法稳定可靠,可以作为测定家蚕、桑叶及有关药物样品中DNJ含量的有效方法。

柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度

建立了柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度的方法。以对溴苯甲酸为内标，样品经醋酸钠缓冲液酸化后，用V（正己烷）：V（异丙醇）=95：5萃取。以Chiralcel OJ-H柱（Daicel Chemicals，250mm×4．6mm，5μm）为分析柱，UltimateTM SiO柱（50mm×4．6mm，5μm）为预处理柱；流动相为V（正己烷）：V（异丙醇）：V（三氟醋酸）=96．5：3．5：0．1，流速为0．5mL／min；预处理流动相为V（正己烷）：V（异丙醇）=99．5：1，流速为1mL／min；柱切换时间为1．70-4．09min；紫外检测波长为230nm。布洛芬消旋体和s-（＋）-布洛芬标准曲线线性范围分别为0．21－20mg／L和0．10－10mg／L；日内RSD小于6．5％，日间RSD小于6．1％；方法回收率为93．3％－107．1％，萃取回收率为80．0％－86．6％。本法简便、准确，重现性好，可用于布洛芬对映体人体药代动力学研究。

饮用水中9种卤乙酸的超高效液相色谱法测定

建立了固相萃取／超高效液相色谱（SPE／UPLC）测定饮用水中9种痕量卤乙酸（HAAs）的分析方法。对固相萃取和液相色谱等分析条件进行了优化，选择LichmlutEN固相萃取小柱富集饮用水中的HAAs，三乙胺一磷酸缓冲液和甲醇作为UPLC的流动相。在优化的分析条件下，9种卤乙酸在6vain内实现基线分离，所有目标物在一定质量浓度范围内线性良好，相关系数为0．9957～0．9999；一氯乙酸（MCAA）的检出限为10．85μg/L，其它8种化合物的检出限为0．25～0．70μg/L；除MCAA外，其它目标物在低、中、高3种加标水平的回收率为60％-106％。方法的相对标准偏差（RSD，n=5）为2．0％～5．7％。将此方法应用于我国北方某城市自来水中卤乙酸的测定，5种HAAs被检出。方法灵敏度高、简便快捷，可用于生活饮用水中痕量卤乙酸的测定。

UPLC-LTQ/Orbitrap MS快速筛查确证化妆品中89种禁用物质

采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱结合高分辨质谱法（UPLC-LTQ/Orbitrap MS）同时测定化妆品中抗生素、激素、邻苯二甲酸酯、农药以及孔雀石绿和结晶紫等5大类共89种化合物。不同剂型的化妆品基质用甲醇超声提取,以Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1mm×100mm×1.7μm）分离;正离子模式下,以含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相;负离子模式下,以5mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,进行梯度洗脱。以保留时间和Orbitrap获得的一级母离子精确质量数以及同位素丰度比,实现对化妆品中多种类物质的快速筛查;以Orbitrap碰撞诱导解离（CID）获得的碎片离子精确质量数进行确证。结果表明：化合物的线性关系良好,线性相关系数R2〉0.99;除邻苯二甲酸二苯酯外,其他化合物的最低检出限（LOQ）均在5~10μg/kg之间;在添加浓度为1倍、2倍、10倍LOQ 3个水平下,绝大多数化合物的平均回收率在60%~117%之间,相对标准偏差小于13%。该方法简便、快速、可靠性高,适用于化妆品中多种类别禁用物质的检测。

党参原产地及其迁地引种后AFLP与HPLC指纹图谱分析

目的:探讨自然环境对不同基原党参原植物遗传和化学成分的影响。方法:采用AFLP分子标记与HPLC指纹图谱技术分别对3个种群24个居群和10批党参药材进行遗传多样性和指纹图谱分析。结果:UPGMA方法聚类分析结果显示24个居群按照物种分类聚为3类。自甘肃文县和四川九寨沟县迁地引种的素花党参居群聚为第Ⅰ类。自湖北省板桥镇引种的川党参居群单独归为第Ⅱ类。迁地引种的党参居群与山西不同地理分布的野生及家种党参居群聚为第Ⅲ类。迁地引种的3个基原10批党参药材与对照图谱之间的相似度大于0.8,其化学成分趋于相似,有较好的一致性。结论:包括原产地及其迁地引种的不同基原党参种群间遗传差异由其物种内在的遗传特性引起,党参种内居群间遗传相似性与地理分布又呈一定相关性,而3个基原党参药材的化学成分则更易受到栽培环境因素的影响。

帕金森病患者血浆谷氨酸和γ氨基丁酸水平改变与睡眠障碍的关系

目的探讨帕金森病(PD)患者血浆谷氨酸(Glu)和γ氨基丁酸(GABA)水平的改变与睡眠障碍的关系。方法选择PD患者98例为PD组,根据有无睡眠障碍分为睡眠障碍组52例,无睡眠障碍组46例;另选健康体检者86例为对照组。采用高效液相色谱检测法检测血浆Glu和GABA水平,应用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评估所有研究对象睡眠状况,采用Pearson相关及分层回归分析法分析血浆Glu和GABA水平的改变与睡眠障碍的关系。结果 PD组患者血浆Glu和GABA水平及Glu/GABA比值显著低于对照组(P<0.05),睡眠障碍组Glu和GABA水平显著低于无睡眠障碍组(P<0.05)。PD患者PSQI评分与Glu(r=-0.409,P<0.05)及GABA(r=-0.597,P<0.05)呈负相关。多元线性回归分析显示,血浆Glu和GABA水平改变可显著影响PD患者睡眠质量。结论血浆Glu和GABA水平下降可能与PD伴睡眠障碍的发病有关。

高效液相色谱法测定食品中嘌呤含量

为测定食品中嘌呤含量,建立了食品中多组分嘌呤含量测定的反相离子对高效液相色谱（RP-IP-HPLC）分析方法,对几种主要食品中的腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤含量进行测定。结果表明,采用Agilent XDB-C18色谱柱,水-甲醇-冰乙酸-10%四丁基氢氧化铵（V/V/V/V,879/100/15/6）为流动相,检测波长为254nm,流速为1mL/min时4种嘌呤可完全分离。测得4种嘌呤物质的回收率在91.8%~108.7%之间,方法的相对标准偏差（RSD）为2.7%~6.5%。不同种类食品中嘌呤总含量由高到低依次为：动物肝脏、动物肌肉、果蔬、菌类和蛋类。

乌头类生物碱组分在CYP450中的代谢指纹图谱及对CYP450活性的影响

利用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的多反应监测(MRM)技术,结合多探针底物方法,对单酯型及双酯型乌头类生物碱组分对细胞色素P450(CYP450)亚型的活性影响进行了研究;同时利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对单酯型和双酯型乌头类生物碱组分在CYP450中的代谢指纹图谱进行了研究.活性影响研究结果表明,单酯型生物碱组分对CYP2C及2D的抑制能力较强,其IC50值分别为7.44和6.74μmol/L;双酯型生物碱组分对CYP1A2,3A,2C和2D均有较弱的抑制作用,其IC50值分别为39.48,70.44,17.36和86.04μmol/L.代谢指纹图谱显示,双酯型生物碱组分在大鼠肝微粒体中有6个特异性产物可以作为该反应的特征峰.

FTIR和色谱仪对甲醇汽油醛类排放检测结果的研究

在一台满足国III排放法规的多点电喷汽油机上,分别使用傅里叶红外光谱仪(FTIR)(在线)、气相色谱仪和液相色谱仪(离线),对同一工况和相同燃料条件下的甲醛排放物进行检测和对比。结果表明:FTIR检测的发动机尾气中甲醛排放规律与气相和液相色谱仪检测出的规律一致,但FTIR法的检测值要比色谱法高。另外,使用FTIR测量了常规车用三效催化转化器前后的甲醛、乙醛、甲醇等非法规排放,结果表明:随着掺醇比例的增加,甲醛和甲醇排放急剧增加,乙醛排放则减少。三效催化转化器对甲醇汽油掺混燃料的甲醛、乙醛和甲醇排放转化效果显著,经处理后,基本上可实现零排放。

基于高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱的寡糖轮廓分析用于蜂蜜中淀粉糖浆的掺假鉴别研究

采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱（HPLC-Q/Orbitrap MS）建立了寡糖轮廓分析的方法。通过对纯天然蜂蜜和淀粉类糖浆中的麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖进行定性定量分析,发现淀粉类糖浆中含有未被酶解完全的微量麦芽类寡糖,且麦芽七糖在所有检测样本中干扰小,对结果的定量无影响,而其他寡糖类物质的定性和定量结果会存在干扰。最终选择麦芽七糖作为蜂蜜中掺入淀粉糖浆的典型标志物。在实际样品分析中,根据麦芽七糖的保留时间和离子对的相对丰度比可以定性判断蜂蜜中是否掺有淀粉糖浆;通过标准曲线法可以定量测定样液中麦芽七糖的含量。在20,50,100 mg/kg 3个加标水平下,麦芽七糖的平均回收率为75%-82%,相对标准偏差（RSD,n=5）为3.1%-6.7%,方法检出限为0.1μg/m L。应用该方法可在10 min内完成整个分析过程,且样品前处理简单,结果可靠,灵敏度高,可用于纯天然蜂蜜中掺入淀粉糖浆的快速确证和检测。

N-(4-甲基苯甲酰基)苯甘氨酸手性固定相的合成及对多种手性化合物的拆分

合成了N-(4-甲基苯甲酰基)苯甘氨酸手性固定相,采用湿法装柱(250mm×2.0mm i.d.),在V(正己烷)∶V(异丙醇)=90∶10的高效液相色谱正相色谱条件下,测得理论塔板数为40800m-1,该柱成功地分离了醇类、胺类、氨基酸的对映异构体以及一些手性药物。结果表明:所拆分的16种手性化合物,有12种手性化合物得到基线分离,最好的分离度Rs=4.66,表现出良好的手性分离性能。

分散固相萃取/高效液相色谱-离子阱飞行时间高分辨质谱法对纺织品中全氟化合物的快速筛查和确证

采用液相色谱离子阱飞行时间串联质谱（LC-MS-IT-TOF）技术,结合分散固相萃取净化方法,建立了纺织品中全氟化合物快速筛查、定性识别和准确定量的分析方法,构建了14种全氟化合物的多级碎片离子质谱图数据库。样品用甲醇超声提取,提取液经C18吸附剂净化后,以C8色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）分离,5 mmol/L乙酸铵-甲醇为流动相梯度洗脱。考察了吸附剂种类和用量对加标回收率的影响,优化了净化条件。结果显示,14种全氟化合物的检出限为1-10μg/kg,在10,50,100μg/kg 3个加标水平下的平均回收率为49.2%-101.4%,相对标准偏差为1.1%-14.0%。该方法利用精确质量数匹配和自建标准谱库检索进行快速筛查,并使用保留时间和多级特征碎片离子进行定性确证,具有简便、快速、高效、准确等优点,可用于纺织品中全氟化合物的快速筛查和确证。

正相液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

建立并比较了正相色谱与反相色谱测定婴幼儿配方乳粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的方法。利用乙醚和石油醚提取婴幼儿配方乳粉中的油脂,经旋转蒸发浓缩后,分别采用银离子色谱柱和C18色谱柱,配合蒸发光散射检测器检测。其中采用银离子色谱柱以二氯甲烷-丙酮为流动相梯度洗脱的正相色谱法完全分离了1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（OPO）和1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油三酯（OOP）两种同分异构体,方法的重复性和线性关系良好,回收率为93.0%~101.5%,精密度（RSD）为2.89%~4.56%,检出限为20 mg/kg。该方法可准确测定婴幼儿配方乳粉中OPO的含量。

辛辣组分对高良姜提取物抗菌活性的影响

采用减压硅胶柱层析(VLC)法分离提取出高良姜中的辛辣组分,对分离前后各部分的抗菌作用进行评价和比较,探讨辛辣组分的分离对高良姜抗菌活性的影响。结果表明,高良姜提取物中辣味成分得到较好的分离,经薄层色谱(TLC)和高效液相色谱分析,分离出的辣味成分主要为二苯基庚烷A;以抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)评价提取分离前后各部位的抗菌活性,辛辣组分非高良姜提取物抗菌活性的主要成分。该项研究为高良姜依其辣味风味和抗菌药效分别开发、综合利用提供了科学依据。

单次与多次静脉滴注盐酸米诺环素在健康志愿者的药动学

目的:研究单剂量单次与多次静脉滴注盐酸米诺环素后的药动学。方法:9例中国男性健康成年志愿者,年龄(20±1．4)岁,静脉滴注盐酸米诺环素,每次100mg,bid,连续给药11次。用高效液相色谱法测定血药浓度,用3P97软件拟合药动学参数。结果:受试者静脉滴注盐酸米诺环素后,体内过程为二房室模型。连续给药11次后,AUC_(0-τ)值比首次给药显著增加,第11次给药后AUC_(0-τ)^(?)与单次给药AUC_(0-∞)^(?)比较有差异(P＜0．05)。其他参数t_(1/2)α,t_(1/2)β,k_(21),k_(10),k_(12)和V_c经t检验无显著性差异(P＞0．05)。平均稳态血药浓度C_(avg)为(7．286±1．993)μg·mL^(-1),稳态血药浓度-时间曲线下面积AUC_(0-τ)^(?)为(87．431±23．912)mg·L^(-1)·h,药物浓度的波动系数为(0．316±0．064),药物在体内的蓄积因子为(2．221±0．357)。受试者给药期间未出现严重不良反应。结论:本研究中连续给药方案在人体内可达到有效血浆浓度,但连续给药11次后体内有蓄积,建议临床按此方案用药时,使用时间不宜过长,以减少药物不良反应。

HPLC法测定多血康胶囊中6个成分

目的建立HPLC法测定藏药多血康胶囊（大花红景天、余甘子、沙棘、干姜）中红景天苷、没食子酸、柯里拉京、槲皮素、山柰素、异鼠李素等6种成分。方法多血康胶囊70%甲醇提取液分析采用Wondasil C18-WR色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相Ⅰ为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长275 nm,测定红景天苷、没食子酸和柯里拉京;流动相Ⅱ为甲醇-0.4%磷酸溶液（48∶52）,检测波长370 nm,测定槲皮素、山柰素、异鼠李素。体积流量为1 m L/min,柱温30℃,进样10μL。结果各成分均达到基线分离,在其线性范围内呈现良好的线性关系,r≥0.999 7。加样回收率值为99.1%~101.7%,RSD值为0.69%~1.7%。结论本方法以多血康胶囊的入血成分为指标,建立了简便、准确,专属性和重复性好的定量测定方法。

用基于邻苯二甲醛柱前衍生的高效液相色谱法测定稻米的γ-氨基丁酸含量

建立基于邻苯二甲醛（0-phthalaldehyde，OPA）柱前衍生的高效液相色谱法（highperformanceliquidchromato—graphy，HPLC），测定了稻米中Y-氨基丁酸（Y-aminobutyricacid，GABA）的含量。结果显示：用三氯乙酸作为提取溶剂的效果最好；检测限为0．5mg／L，提取回收率为79．1％-101．5％；巨胚糙米的GABA含量显著高于常规胚糙米的，发芽后巨胚糙米的GABA积累量也高于常规胚糙米的。

离子束诱变粟酒裂殖酵母产辅酶Q_(10)的初步研究

辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ)对心脏充血性病人有较好的疗效,是临床常用药物之一。实验研究了离子束诱变粟酒裂殖酵母对提高CoQ10的产量的影响与作用。实验筛选出六株突变菌株,研究了突变株生理生化特性。结果表明:突变菌株的CoQ10产量都有不同程度的提高,其中编号为N1菌株产量达6.9344mg/L,是对照菌株的10倍多,最低的N2菌株的产量也是对照菌株的1.3倍。

EMIT法和HPLC法监测环孢菌素A血药浓度比较研究

目的:比较酶免疫增强法(EMIT)和高效液相色谱法(HPLC)监测环孢菌素A血药浓度的相关性。方法:收集肾脏移植患者服药后的稳态谷浓度血样,分别用EMIT法和HPLC法进行测定,考察2种测定方法的相关程度。结果:以HPLC法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)所做线性回归方程如下:Y=0.816 8X+34.699(r=0.955 0),EMIT法测定全血中环孢菌素A浓度较HPLC法为高。结论:EMIT法和HPLC法测定环孢菌素A血药浓度结果差异具有统计学意义,在CsA治疗药物监测中应予以关注并作相应调整。