蛋白激酶CK2-β在涎腺腺样囊性癌肺转移中的作用

目的 :探讨蛋白激酶CK2 β(PKCK2 β)在涎腺腺样囊性癌 (SACC)肺转移细胞中的表达及其与转移的关系。方法 :利用RT PCR方法进行mRNA表达分析。结果 :在SACC肺转移细胞中 ,随着PKCK2 β被抑制程度的提高 ,nm2 3 H1的表达增加 ,肿瘤转移能力下降。结论 :PKCK2 β的表达与SACC的肺转移呈正相关。

蛋白激酶CK_2-β在SACC-83及SACC-LM细胞中的表达

通过对蛋白激酶CK2-β在涎腺腺样囊性癌及涎腺腺样囊性癌肺转移细胞中表达的研究,探讨蛋白激酶CK2-β与涎腺腺样囊性癌肺转移的关系。利用Western blot方法对两种细胞进行蛋白检测分析。蛋白激酶CK2-β在两种细胞的细胞核中的表达都高于在细胞质中的表达,与SACC-83细胞相比,SACC-LM细胞的细胞核及细胞质中蛋白激酶CK2-β都有较高表达。蛋白激酶CK2-β的表达与涎腺腺样囊性癌的肺转移呈正相关。

正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-M侵袭、迁移的影响及机制研究

背景与目的:有研究证实,正丁酸钠(sodium butyrate,Na B)对肿瘤细胞具有抑制增殖、诱导分化和促凋亡的作用,但对涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)的作用机制尚不明确。该研究主要探讨不同浓度Na B对SACC细胞株ACC-M侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:MTT法探索Na B作用ACC-M细胞的最佳浓度并观察细胞的生长情况,Transwell小室实验检测Na B对ACC-M细胞侵袭、迁移能力的影响,实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测5组浓度药物作用后ACC-M细胞中高迁移率蛋白-1(high mobility group box-1,HMGB1)、toll样受体-4(toll like receptor-4,TLR4)m RNA和蛋白的表达。结果:与对照组相比,加入Na B 0.625、1.25、2.5、5及10 mmol/L的5组均能抑制ACC-M细胞增殖且呈明显浓度依赖性(P<0.05)。5组浓度Na B均可抑制ACC-M细胞体外侵袭和迁移能力(P<0.05),同时能降低ACC-M细胞HMGB1、TLR4 m RNA及蛋白的表达(P<0.05);相关性分析显示TLR4蛋白表达的降低与HMGB1的抑制呈正相关(r=0.810,P<0.05)。结论:Na B可抑制ACC-M细胞增殖,显著降低ACC-M细胞的侵袭和迁移能力,同时降低HMGB1、TLR4 m RNA和蛋白的表达,且2者表达量呈明显正相关,提示Na B可能是通过下调HMGB1、TLR4 m RNA和蛋白的表达来实现对ACC-M细胞侵袭、迁移能力的抑制。

蛋白激酶CK2-α′在腺样囊性癌细胞中的表达

目的通过检测蛋白激酶CK2-α′在涎腺腺样囊性癌中的表达分布特征,探讨蛋白激酶CK2-α′与涎腺腺样囊性癌的关系及临床病理意义。方法应用免疫荧光技术对蛋白激酶CK2-α′在同一来源不同转移能力涎腺腺样囊性癌细胞(SACC-83)及涎腺腺样囊性癌肺转移细胞(SACC-LM)的表达进行分析。结果蛋白激酶CK2-α′在涎腺腺样囊性癌细胞及涎腺腺样囊性癌肺转移细胞中都存在高表达,并且细胞核中的表达都高于在细胞质中的表达。结论蛋白激酶CK2-α′的表达与涎腺腺样囊性癌的肺转移呈正相关。

正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响及机制研究

目的探讨不同浓度正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响与其作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法探索正丁酸钠作用ACC-2细胞的最佳浓度,Transwell小室实验检测正丁酸钠对ACC-2细胞侵袭、迁移能力的影响,Western blot和实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测5组浓度药物作用后ACC-2细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)、TLR4的mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mmol/L 5组浓度的正丁酸钠均能抑制ACC-2细胞增殖(P<0.05)且呈明显浓度依赖性;5组浓度正丁酸钠对细胞侵袭能力的影响差异无统计学意义(P>0.05);2.500、5.000、10.000mmol/L浓度正丁酸钠可以抑制ACC-2细胞的迁移能力(P<0.05),同时降低ACC-2细胞HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达(P<0.05);相关性分析显示TLR4蛋白表达的降低与HMGB1的抑制呈正相关(r=0.810,P<0.05)。结论正丁酸钠能够抑制ACC-2细胞增殖,浓度较高时可以抑制ACC-2细胞的迁移能力,同时降低HMGB1、TLR4的mRNA与蛋白表达,提示NaB对ACC-2迁移能力抑制可能通过下调HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达来实现。

蛋白激酶CK_2-β在腺样囊性癌肺转移细胞中的表达及意义

目的探讨蛋白激酶CK2-β在唾液腺腺样囊性癌肺转移细胞(SACC-LM)中的表达及其与肺转移的关系。方法利用Western印迹对蛋白激酶CK2-β在SACC-LM和SACC-83细胞核及细胞质中的表达进行检测分析;采用RT-PCR方法检测蛋白激酶CK2-β被不同浓度抑制剂(DRB)处理后nm23-H1的mRNA表达。结果与对照组SACC-83细胞相比,SACC-LM细胞中蛋白激酶CK2-β具有较高的表达;在SACC-LM细胞中,其在细胞核中的表达高于在细胞质中的表达。并且随着蛋白激酶CK2-β被抑制程度的提高,nm23-H1的表达增加。结论蛋白激酶CK2-β的表达与唾液腺腺样囊性癌的肺转移呈正相关。

蛋白激酶CK2-β在SACC-83及SACC-LM细胞中的活性变化

目的 :探讨蛋白激酶CK2 β在涎腺腺样囊性癌 (SACC)及肺转移涎腺腺样囊性癌 (SACC LM )中的活性变化。方法 :利用激酶活性测定方法进行活性测定分析。结果 :与未转移SACC(SACC 83)细胞相比 ,SACC LM细胞中蛋白激酶CK2 β具有较高的活性 ;在两种细胞中 ,细胞核中的活性都高于在细胞质中的活性。 结论 :蛋白激酶CK2

蛋白激酶CK_2-β在腺样囊性癌中的活性变化

探讨蛋白激酶CK2-β在涎腺腺样囊性癌及涎腺腺样囊性癌肺转移细胞中的活性及表达变化。2种细胞进行细胞培养,分别提取胞浆及胞核蛋白,然后利用激酶活性测定及Westernbloting方法进行活性及蛋白表达检测分析。与SACC-83细胞相比,SACC-LM细胞中蛋白激酶CK2-β具有较高的活性及表达;在2种细胞中,细胞核中的活性及表达都高于细胞质。蛋白激酶CK2-β在涎腺腺样囊性癌中活性与蛋白表达一致,并与涎腺腺样囊性癌的肺转移呈正相关。

长非编码RNA lncRNA ADAMTS9-AS2促进唾液腺腺样囊性癌侵袭转移的研究

目的检测不同转移能力的唾液腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞中差异表达的长非编码RNA(lncRNA),探讨lncRNA在唾液腺腺样囊性癌侵袭转移中的作用。方法以腺样囊性癌高转移细胞株SACC-LM为实验组,低转移细胞株SACC83为对照组,采用lncRNA芯片初步筛选差异表达的lncRNA,通过qRT-PCR进一步验证差异表达的lncRNA。通过侵袭迁移实验检测转染差异表达的lncRNA siRNAs前后腺样囊性癌细胞株侵袭迁移能力的变化。并对差异表达的lncRNA与SACC患者的临床病理特征和预后进行分析。结果芯片筛选出ADAMTS9-AS2在高转移细胞系(SACC-LM)中高表达,实时定量RT-PCR进一步验证了其在高转移细胞系(SACC-LM)显著上调,通过侵袭迁移实验发现在转染后下调ADAMTS9-AS2的表达水平后侵袭迁移能力明显降低(P<0.001)。临床病理资料分析表明,ADAMTS9-AS2在SACC组织中高度表达。高表达的ADAMTS9-AS2与SACC患者预后不良和肿瘤转移率高有关。结论高表达ADAMTS9-AS2促进SACC细胞迁移和侵袭,ADAMTS9-AS2在SACC组织中上调,并且与高转移率和不良预后相关。

涎腺腺样囊性癌伴肺转移的治疗方案及预后

涎腺腺样囊性癌(SACC)是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一,约占头颈部恶性肿瘤的3%～5%,最常发生于腭部小唾液腺及腮腺。该肿瘤浸润性强,呈现嗜神经侵袭、高血行性转移、低淋巴结转移等生物学特性,这些特性决定了其临床治疗的特殊性。SACC伴肺转移的系统性研究报道较为罕见,远期疗效不佳,治疗方案尚未达成共识。本综述的目的是回顾并总结SACC伴肺转移的治疗方案及预后,为其临床治疗提供依据。

超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统对人腺样囊性癌的体外抑制作用

目的:研究超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统(biodegradable hyperbranched polyglycerol-hydroxy camptothecin,d HPG-HA)对体外培养的人腺样囊性癌(高肺转移)细胞(salivary adenoid cystic carcinoma-lung metastases,SACC-LM)的抑制作用。方法 :细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK8)检测药物浓度为0.001、0.01、0.1、1、10、100μg/m L的羟喜树碱(hydroxy camptothecin,HA)和含等量HA的d HPG-HA,在24、48 h对肿瘤细胞的抑制作用;流式细胞仪检测浓度为0.001、0.01、0.1、1、10μg/m L的d HPG-HA是否能诱导SACC-LM细胞凋亡。结果:HA和d HPG-HA对SACC-LM细胞增殖均有明显抑制作用,且作用呈剂量依赖性和时间依赖性;d HPG-HA对SACC-LM细胞的细胞毒性明显低于HA;d HPG-HA能诱导SACC-LM细胞凋亡。结论:dHPG的构建能达到使药物HA缓释的作用并降低其细胞毒性。

epiregulin在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨表皮生长因子epiregulin在涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)肺转移中的作用。方法 SACC石蜡组织标本30例。通过免疫组织化学方法(SP方法)检测epiregulin在SACC石蜡组织标本中的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果 (1)Epiregulin广泛地表达于细胞质或细胞核。(2)SACC发生肺转移15例,阳性着色率86.7%(13/15),H-score(Hs)定量分析平均为1.26±0.65;未发生肺转移15例,阳性着色率33.3%(5/15),Hs为0.48±0.25。与Ⅰ+Ⅱ期相比,epiregulin在SACCⅢ+Ⅳ期表达显著升高。(3)Kaplan-Miere生存曲线分析未发现epiregulin的表达与SACC患者的预后相关。结论 Epiregulin的表达与涎腺腺样囊性癌肺转移有一定相关性,但仍需要大样本研究进一步证明。

BrdU体内标记腺样囊性癌肺转移灶的实验观察

目的 动态观察非放射性标记物 Brd U在动物体内标记情况 ,为 Brd U取代 3H- Td R提供依据。方法 6只裸鼠经尾静脉分别注入 Acc- M细胞 1× 10 6 / 0 .2 m l,4周后腹腔注射 Brd U2 0 0 μg/ g体重 ,注射 0 .5 h～ 2 0 h期间分别取材固定 ,免疫组化 ABC法染色 ,统计标记指数。结果 所有裸鼠形成肺转移癌阳性细胞核标记指数 (L I)约2 0 %～ 40 %。单次注射 Brd U后 ,L I不随注射时间延长而增加。正常组织中 ,肝窦和肠绒膜上皮有标记阳性细胞 ,肾、胰、脾等器官未见。结论 Brd U体内标记法可替代 3H- Td R应用于细胞增殖研究 ,避免放射性污染 ,但在人体内标记 ,尚需进一步探索。

不同浓度蒿甲醚对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及其机制

目的观察不同浓度的蒿甲醚(ART)对人涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响,并探讨其机制。方法将SACC细胞系ACC-2分为4组,分别加入125、250、500μg/m L的ART或等量0. 1%DMSO培养液进行培养,记为125μg/m L组、250μg/m L组、500μg/m L组、对照组。采用CCK-8法测算各组细胞增殖率,采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测算各组细胞凋亡率,采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力,采用Transwell迁移实验检测各组细胞迁移能力,采用Western blotting法检测各组细胞HMGB1蛋白。结果培养0、24、48、72、96 h时,125μg/m L组细胞增殖率分别为100. 7%±8. 7%、77. 5%±5. 2%、61. 0%±7. 7%、50. 6%±3. 3%、39. 0%±2. 6%,250μg/m L组细胞增殖率分别为99. 5%±7. 3%、63. 3%±3. 6%、50. 4%±3. 4%、38. 1%±2. 7%、25. 5%±2. 3%,500μg/m L组细胞增殖率分别为101. 5%±2. 4%、56. 0%±2. 9%、38. 2%±3. 7%、28. 9%±2. 3%、11. 0%±2. 4%,对照组细胞增殖率均为100. 0%,各组培养24、48、72、96 h时细胞增殖率相比,P均<0. 01。125μg/m L组、250μg/m L组、500μg/m L组、对照组细胞凋亡率分别为21. 98%±0. 44%、34. 76%±1. 74%、49. 94%±1. 43%、2. 30%±0. 17%,侵袭细胞数目分别为(61±3)、(39±3)、(15±1)、(99±8)个,迁移细胞数分别为(93±13)、(69±3)、(30±3)、(164±16)个,细胞HMGB1蛋白相对表达水平为0. 798±0. 064、0. 667±0. 079、0. 424±0. 019、0. 887±0. 045,上述各指标组间相比,P均<0. 01。结论 125、250、500μg/m L的ART对SACC细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移均可发挥调节作用,ART可能通过下调HMGB1蛋白的表达调控SACC细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移。

茶多酚对ACC-M细胞PCNA、NCAM表达的影响

目的观察茶多酚对人肺高转移性腺样囊性癌细胞株(ACC-M)增殖细胞核抗原(PCNA)、神经细胞黏附因子(NCAM)表达的影响。方法免疫细胞化学SP法检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中PCNA、NCAM表达的影响,以不含茶多酚的细胞作对照组。结果与对照组相比,ACC-M细胞呈浓度依赖性PCNA表达降低,NCAM表达增高(P<0.05)。结论茶多酚可通过抑制PCNA表达、促进NCAM表达而影响ACC-M细胞生长。

甲基莲心碱抑制腺样囊性癌生长的机制研究

目的研究甲基莲心碱对腺样囊性癌生长的作用及其作用机制。方法涎腺腺样囊性癌细胞SACC-83随机分为对照组、甲基莲心碱低剂量组、甲基莲心碱中剂量组、甲基莲心碱高剂量组。甲基莲心碱低、中、高剂量组分别用10,20,40μmol·L^(-1)甲基莲心碱处理细胞,对照组细胞用等量的培养基处理。以噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况;以流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;以Transwell检测细胞迁移;以蛋白质印迹(Western Blot)法检测高温需求因子A2(Omi/HtrA2)、X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)表达水平以及增殖、凋亡、迁移相关蛋白表达水平。结果对照组和甲基莲心碱低、中、高剂量组细胞凋亡率分别为(3.31±0.68)%,(13.43±1.76)%,(24.71±2.43)%和(42.37±2.95)%,迁移细胞数分别为134.18±8.28,94.86±6.90,68.81±6.43和50.24±5.27。对照组细胞中Omi/HtrA2蛋白、XIAP蛋白、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、切割型胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达水平分别为0.91±0.08,0.73±0.03,0.78±0.09,0.22±0.04和0.93±0.07,不同剂量甲基莲心碱作用后Omi/HtrA2蛋白、XIAP蛋白、CyclinD1蛋白和MMP-9蛋白的表达水平明显降低,cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),且甲基莲心碱对SACC-83细胞的作用具有剂量依赖性。结论甲基莲心碱可以通过调控Omi/HtrA2和XIAP蛋白对腺样囊性癌细胞的生长起到抑制作用。