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人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定
被引量:
7
1
作者
杨辉
张英起
+3 位作者
颜真
韩苇
药立波
苏成芝
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第1期55-58,共4页
RT PCR获取的血管形成素AngiogenincDNA片段 ,克隆入融合表达载体 pRSETB中 ,表达产物为N端融合了His6的融合蛋白 ,以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 10 %。用 8mol/L脲溶解包涵体 ,利用His6与过渡态金属离子Ni2 +高亲合力结合的性质 ,...
RT PCR获取的血管形成素AngiogenincDNA片段 ,克隆入融合表达载体 pRSETB中 ,表达产物为N端融合了His6的融合蛋白 ,以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 10 %。用 8mol/L脲溶解包涵体 ,利用His6与过渡态金属离子Ni2 +高亲合力结合的性质 ,经Ni2 + NTA亲和树脂一步法纯化 ,获得纯度达 98%以上His6 ANG融合蛋白 ,Western blot结果表明在相应分子量处有一条特异性条带。重组蛋白复性后活性测定表明 ,在体外可促进鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM )血管形成 ,并可降解tRNA。
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关键词
血管形成素
his6融合蛋白
配体亲和层析
肿瘤发生
大肠杆菌
表达
下载PDF
职称材料
题名
人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定
被引量:
7
1
作者
杨辉
张英起
颜真
韩苇
药立波
苏成芝
机构
第四军医大学生物技术中心
第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第1期55-58,共4页
文摘
RT PCR获取的血管形成素AngiogenincDNA片段 ,克隆入融合表达载体 pRSETB中 ,表达产物为N端融合了His6的融合蛋白 ,以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 10 %。用 8mol/L脲溶解包涵体 ,利用His6与过渡态金属离子Ni2 +高亲合力结合的性质 ,经Ni2 + NTA亲和树脂一步法纯化 ,获得纯度达 98%以上His6 ANG融合蛋白 ,Western blot结果表明在相应分子量处有一条特异性条带。重组蛋白复性后活性测定表明 ,在体外可促进鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM )血管形成 ,并可降解tRNA。
关键词
血管形成素
his6融合蛋白
配体亲和层析
肿瘤发生
大肠杆菌
表达
Keywords
angiogenin,
his6
fusion protein, affinity chromatogra
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定
杨辉
张英起
颜真
韩苇
药立波
苏成芝
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
7
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