免疫荧光染色在呼吸道深部真菌感染快速病理诊断中的应用价值

目的 探讨免疫荧光染色在呼吸道深部真菌感染快速病理诊断中的应用价值。方法 选取40例于2021—2023年在江西省胸科医院行肺部切除手术诊断为真菌感染患者的呼吸道标本为研究对象,将其进行免疫荧光真菌染色、PAS染色及PASM染色三种检测方法,对比免疫荧光真菌染色、PAS染色和PASM染色的检测结果,分别比较其检测所需要的时间。结果 统计三组特殊染色在冰冻诊断时所需时间总体均数,P<0.001为差异有统计学意义,其中免疫荧光真菌染色组所需时间为(2.90±1.143) s、PAS染色组所需时间为(32.73±2.708) s、PASM染色组所需时间为(107.00±7.348) s。染色检测阳性率差异无统计意义(P>0.05),其中免疫荧光染色阳性率为100%、PAS染色阳性率为97.5%、PASM染色阳性率为100%。结论 免疫荧光真菌染色是一种快速、敏感和特异的呼吸道标本的真菌检测方法,为临床早期真菌诊治提供了可靠的参考依据。

血小板全自动免疫荧光染色控制系统设计

基于可视化血小板超微结构的血液活检技术在急性缺血性脑卒中等疾病的监测与诊断领域有重要应用。但目前血小板的免疫荧光染色严重依赖手动操作,任务繁重、效率低且一致性差,难以应对日益增长的血液样本监测需求。为了解决人工染色的不足以及弥补国内全自动血小板免疫荧光染色设备的空白,首创了一种血小板全自动免疫荧光染色控制系统,其主要包括电源模块、主控模块、传感反馈模块、运动执行模块和上位机软件等。该控制系统能够实现十样本通量的免疫荧光染色操作的精准控制,操作步骤覆盖打孔、封闭、一抗标记、一抗漂洗、二抗标记、二抗漂洗、PFA(polyformaldehyde fixative,多聚甲醛固定液)固定、漂洗等。测试结果表明,所设计的控制系统可将X、Y、Z运动轴的重复定位精度控制在±0.1 mm内,滴加微量试剂精度达到1μL,滴加大量试剂精度达到1 mL,多次实验的故障率小于1%,这可在降低血小板免疫荧光染色成本的同时获得清晰度、可判度与人工染色相当的染色结果。血小板全自动免疫荧光染色控制系统具有稳定性高、准确性高及效率高的优点,所获得的血小板超微结构荧光染色结果在超分辨率显微镜下的清晰度很高,这可为基于超分辨技术的血小板超微结构检测提供高效的实验工具,具有重要的工程意义。

免疫荧光技术在近视相关生物标志物检测中的应用进展

免疫荧光(IF)技术亦称荧光抗体技术,是通过结合荧光团标记的特定抗原或抗体在紫外线发出荧光来实现的一种示踪技术。IF具有极高的灵敏度和信号放大能力,被广泛应用于细菌病毒和寄生虫的鉴别诊断、部分疾病免疫学机制的研究、器官移植的鉴定、抗原组织定位等方面。近视作为一种屈光不正性疾病,严重影响着人们的视力健康,IF在近视机制及治疗措施的研究中发挥了重要作用。本文就近年来IF在近视相关生物标志物检测中的应用进展进行综述。

4℃丙酮液固定剂对肾穿刺活检组织免疫荧光染色的效果观察

肾脏疾病的治疗方案与临床精准诊断和分型有关,而临床表现和实验室检查常无法做出明确诊断,需要依靠病理检查作为“金标准”进行最终判定[1]。肾穿刺直接免疫荧光染色是肾脏疾病病理检查的基本手段之一[2]。固定剂的选择对免疫荧光染色效果会造成较大的影响[3],若固定剂选择不适宜,则会导致组织破坏及边缘结构不清晰,对免疫荧光染色产生很大影响,如假阳性率高及定位不准确,严重影响送检标本的临床病理诊断[4]。

免疫荧光染色法在基层医院诊断肺结核中的应用价值分析

目的:评估肺活检病理组织免疫荧光染色法与TB-DNA-PCR检测法诊断肺结核的一致性,并与抗酸染色法比较,以得出免疫荧光染色法是基层医院可替代TB-DNA检测的快速、准确、经济的检测方法。方法:回顾性分析2022年1月至2022年12月长沙市中心医院收治的考虑肺结核并已做TB-DNA检测和抗酸染色检测的患者387例,分析免疫荧光染色法、抗酸染色法与TB-DNA检测的一致性,以TB-DNA结果为参照,比较其灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值的差异,并且评估不同方法联合的诊断性能。结果:免疫荧光染色法与TB-DNA一致性的kappa值为0.746(0.681-0.811)。免疫荧光染色法的受试者工作曲线(ROC)下的面积(AUC)为0.889(95%CI=0.859-0.918)。免疫荧光染色法与抗酸染色法的灵敏度(81.6%vs 49.6%,P<0.001)、阴性预测值(77.4%vs 55.8%,P<0.001)的差异具有统计学意义。病理形态学或免疫荧光染色法联合的敏感度和阴性预测值分别为99.1%(95%CI=96.9%-99.9%)和97.8%(95%CI=92.4%-99.7%)。结论:免疫荧光染色法与TB-DNA法检测结果一致性高,病理形态学和免疫荧光染色法的联合对于肺结核诊断的阴性预测值高,是缺乏分子病理诊断能力的基层医院的潜在替代诊断方案。

免疫荧光染色在真菌性角膜炎刮片标本中的诊断价值

目的探讨免疫荧光染色技术在真菌性角膜炎诊断中的价值。方法选择我院眼科就诊疑似真菌感染患者的角膜刮片标本,分别运用免疫荧光染色一步法、PAS染色法、KOH湿片法对这些标本进行检测,记录数据;以真菌培养结果为金标准,比较三种真菌检测方法的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果与KOH湿片法、PAS染色法真菌检测结果对比,免疫荧光染色真菌检测的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值较高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在角膜真菌感染的诊断中,免疫荧光染色真菌检测的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均高于KOH湿片法和PAS染色法,而且此方法检测速度快,易于观察。

不同后固定时间对脑组织免疫荧光染色效果的影响

为探讨延长后固定时间是否能改善在体快速灌注固定后脑组织的免疫荧光染色效果,该文用雄性长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)经心脏升主动脉插入灌注针,依次快速灌注4℃生理盐水和质量分数为4%的多聚甲醛溶液,断头取脑,分别浸泡于质量分数为4%的多聚甲醛溶液中固定24 h和72 h后进行30μm厚冰冻切片和免疫荧光染色,观察并比较后固定24 h和72 h下丘脑室旁核(PVN)OT免疫阳性神经元胞体数量、下丘脑前部(AH)免疫阳性神经纤维密度及其形态学结构.研究结果表明:后固定72 h组的PVN OT免疫阳性神经元胞体数量以及AH免疫阳性纤维密度均高于后固定24 h组的.与后固定24 h组相比,后固定72 h组的OT免疫阳性神经元胞体形态更加完整,境界更加清晰,神经元核周和突起免疫荧光标记强度更强.且后固定72 h组OT免疫阳性神经纤维形态比后固定24 h组的更清晰、更连续,呈串珠状.在快速灌注固定后延长后固定时间有助于改善免疫荧光染色效果.

肾活检组织病理诊断中采用石蜡切片免疫荧光染色法的临床价值分析

目的:分析肾活检组织病理诊断中应用新式石蜡切片免疫荧光染色法的可行性与效能。方法:研究开展的时间为2021年1月至2022年12月,共纳入83份肾组织样本,其中10份来源于贵州电力医院,73份来源于贵州医科大学附属医院。对全部样本均实施常规冰冻切片免疫荧光染色诊断与新式石蜡切片免疫荧光染色诊断,将前者列为冰冻组,将后者列为石蜡组,对照两种诊断方式对于常见肾病的诊断效能。结果:肾病理组织活检的阳性检出结果显示,石蜡组23例膜性肾病患者、30例狼疮性肾病患者和30例IgA肾病患者免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C1q的阳性检出率均高于冰冻组,但两组仅在膜性肾病患者IgA、狼疮性肾病患者IgA、IgG、补体C1q的检出率方面存在统计学差异(P<0.05),其他组间对比均无统计学差异(P>0.05)。结论:在肾病患者肾组织病理活检诊断中,新式石蜡切片免疫荧光染色法的诊断效能优于传统冰冻切片免疫荧光染色法,有助于更为准确地检出不同类型的肾病,具有较高的临床应用价值。

快速免疫荧光染色技术在肺部感染性疾病中的应用

目的探讨快速免疫荧光染色技术在肺部炎症性病变病原体鉴别诊断中的应用价值。方法对明确病原微生物类型的30例肺部感染性疾病患者的临床病理资料进行回顾性分析,并结合文献复习。结果30份支气管肺泡灌洗液标本中,放线菌5例,肺炎链球菌2例,念珠菌8例,曲霉菌4例,毛霉菌8例,隐球菌1例,抗酸分枝杆菌2例。镜下形态:放线菌呈放射状,硫磺颗粒样;肺炎链球菌,呈双球菌,矛头状,可表现为单个或短链状;念珠菌为有隔且分枝不规则的假菌丝,厚膜孢子是其特征;曲霉菌丝呈有隔且有45°分枝状,分生孢子头是其特征;毛霉菌菌丝呈无隔或少隔且有90°分枝状,球形孢子囊是其特征;抗酸分枝杆菌,特征是抗酸性,细菌形态呈金黄色,细长,略弯曲状。结论快速免疫荧光染色检测技术能快速准确区分病原微生物种类,在肺部炎性疾病的精准治疗及早期治疗中均有一定的应用价值。

免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值

目的分析免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值。方法选取2021年1月至2022年12月在首都医科大学附属北京妇产医院怀柔妇幼保健院妇科就诊的250例疑似阴道炎患者为研究对象。以实验室检验作为金标准,分析不同检验方式检测阴道炎的诊断效能及阴道清洁度检出情况。结果免疫荧光联合快速HE染色法的诊断效能高于湿片镜检法,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光联合快速HE染色与湿片镜检法的阴道清洁度检出情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值较高,能够提高诊断效能。

用间接免疫荧光染色法检测鸭病毒性肠炎病毒在人工感染鸭体内的侵染过程和分布规律

用鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CHv强毒株感染成年鸭复制鸭病毒性肠炎急性病例,分别于接种后不同时间,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺、食道、十二指肠、胰腺、法氏囊和脑组织,制作切片,应用间接免疫荧光染色法(IFA)检测DEV在鸭体内的侵染过程和分布规律。结果显示:感染后4 h可在脾脏、胸腺和法氏囊中检测到DEV抗原;感染后6 h可在肝脏、食道、十二指肠、直肠及肺脏检测到DEV抗原;IFA对各组织器官中DEV的平均检出率为肝脏46/50、脾脏48/50、肺脏46/50、肾脏0/50、肠道46/50、法氏囊46/50、胸腺47/50、胰腺0/50、大脑0/50、食道44/50、心脏0/50。研究表明:在急性病例中,脾脏、法氏囊、胸腺、食道、肠道、肝脏和肺脏为DEV的主要靶器官;接种后,病毒首先在脾脏、胸腺、法氏囊中出现,然后病毒迅速传播到肝脏、消化道和肺脏中;IFA检测石蜡切片中DEV的方法具有直观、特异性强的优点,是对DEV进行检测和抗原定位的较好方法。

不同固定剂对肾穿刺冷冻切片免疫荧光染色的影响

肾穿刺冷冻切片荧光染色是明确肾脏疾病病理检查的基本手段之一,通过荧光染色可以判断有无免疫复合物沉积,以及沉积的形态、部位和强度等。如果固定剂选择不适宜,就会导致组织破坏、结构不清晰,对随后的免疫荧光染色产生很大影响,假阳性率高,定位不准确,易造成误诊。为此,我科近2年来,对938例肾穿组织冷冻切片选择了不同固定剂固定,并进行了免疫荧光染色的观察,寻求一种最佳的固定剂。

利用间接免疫荧光染色和协同凝集技术检测梨火疫病菌

提取梨火疫病菌 (0 0 5 6菌株 )的脂多糖免疫家兔 ,获得抗血清 ,建立了检测梨火疫病菌的间接免疫荧光染色和协同凝集检测技术 ,对梨火疫病菌的不同菌株和人工接种发病样品实施了检测。结果表明 ,这 2种方法可以准确、灵敏地检测梨火疫病菌及样品 ,方法简单、快速、实用 ,可以在中国口岸推广使用 ,减少梨火疫病进入中国的风险。

石蜡切片多重免疫荧光染色优化条件探讨

【目的】探讨在石蜡切片上不同染色条件对多重荧光标记结果的影响。【方法】根据不同组织抗原选择合适的固定剂;对石蜡组织切片采用高温高压的抗原修复方式,使用柠檬酸盐缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,并在染色操作过程中增加封闭步骤,随后进行常规组织免疫荧光染色。【结果】常规石蜡切片用40g/L多聚甲醛固定、抗原糖基含量高的石蜡切片用过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定可以很好的保护切片中的抗原;pH 6.0的枸橼酸缓冲液及pH 8.0的EDTA-Na缓冲液分别对组织胞浆抗原及胞核抗原具有较好的抗原修复作用;多重荧光染色不同种属来源第一抗体染色间增加一次封闭步骤,可有效的改善多重荧光染色质量。【结论】选择合适的固定剂、抗原修复液及增加抗原封闭次数对石蜡组织切片上的多重荧光标记结果具有显著的影响。

肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色方法的探讨

目的探讨不同的抗原修复方法对肾活检标本石蜡切片免疫荧光染色的影响。方法将20例肾活检标本分别制成石蜡切片(实验组)及冰冻切片(对照组),其中实验组石蜡切片分成应用胰酶抗原修复组;高压加热抗原修复组及无抗原修复组,后行免疫荧光染色,并与冰冻切片免疫荧光染色相比较。结果石蜡切片胰酶抗原修复组免疫荧光染色结果与冰冻切片免疫荧光染色结果基本符合;高压加热抗原修复组出现较多的假阴性结果;无抗原修复组染色效果较差;以上三组间存在统计学差异。结论石蜡切片胰酶抗原修复免疫荧光染色可以作为冰冻切片免疫荧光染色标本无肾小球时较好的补救措施。

免疫荧光和几种特殊染色在肾活检病理诊断中的应用

目的:分析免疫荧光染色及其他几种特殊染色法在肾活检病理诊断中的应用效果。方法:临床纳入58例我院2014年9月至2016年9月期间收治的慢性肾脏疾病患者作为研究对象,所有患者均进行肾穿刺活检,穿刺取得组织采用石蜡制片,分别采用免疫荧光法、六胺银染色法、甲醇刚果红染色法、黏蛋白染色法(PAS)以及Masson三色染色,对比不同方法染色的结果。结果:不同类型肾病患者中,免疫荧光染色中狼疮性肾病中IgA、IgM、IgG、C3以及Clq诊断阳性率明显高于IgA肾病和膜性肾病患者,P<0.05。在不同染色方法的对比中发现,免疫荧光染色法在肾病检测IgA、IgM、IgG、C3以及Clq诊断阳性率明显低于其他染色方法的诊断率,P<0.05。其他染色方法诊断率均无差异,P>0.05。结论:免疫荧光染色相对于其他染色方式对肾活检病理诊断率稍低,临床上推荐采用其他特殊染色方法对肾组织进行病理诊断。

利用PCR和间接免疫荧光染色技术检测风信子黄腐病菌

根据风信子黄腐病菌(Xanthom onas hyacinthi,XHA)的fimA基因,合成了1对特异性引物JAAN/JARA,目的片段为226 bp,用来检测样本中有无目标细菌。用XHA全菌体免疫家兔,获得抗血清,建立了检测风信子黄腐病菌的间接免疫荧光染色检测技术。用上述两种方法对风信子黄腐病菌和人工接种发病样品进行检测。结果表明,这两种方法可以准确、灵敏地检测风信子黄腐病菌及带菌样品,方法简单、快速、实用,可以在口岸检疫中推广使用,以减少风信子黄腐病菌进入中国的风险。

尿红细胞THP免疫荧光染色在血尿红细胞来源鉴定中的应用价值

目的探讨尿红细胞T-H蛋白(Tamm-Horsfall protein,THP)免疫荧光检测在鉴定尿红细胞来源中的临床应用价值,并对2004-2007年临床诊断单纯血尿情况进行总结,了解肾性血尿与非肾性血尿的病因和分布特点。方法利用尿红细胞THP免疫荧光染色技术对明确诊断的30例肾小球性血尿和25例非肾小球性血尿标本进行尿红细胞的THP免疫荧光染色,并与病理结果进行比较分析。结果在病理诊断确定的30例肾小球性血尿中,THP检测诊断肾性血尿28例,符合率为93.3%;在临床明确诊断的非肾性血尿25例中,THP检测确定非肾性血尿22例,符合率为88%。病理分析显示肾性血尿中,IgA肾病16例(53.3%),肾小球微小病变10例(33.3%),非IgA肾病的系膜细胞增殖性肾小球肾炎3例(10.0%),局灶阶段性硬化性肾炎1例(3.3%)。结论 THP免疫荧光染色鉴别尿红细胞来源的方法特异性强,是鉴别肾性与非肾性血尿的一种有价值的诊断方法,能够为血尿患者的早期诊断与治疗提供临床依据。

个性化抗原修复方法在肾活检组织石蜡切片免疫荧光染色中的应用

肾脏活检的病理诊断在肾脏病学中起到重要作用,它的发展与病理学技术密切相关。肾脏活检的病理检查包括光学显微镜下HE、特殊染色、免疫组化,荧光显微镜下的免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,电镜等多种检查^([1-2])。其中免疫荧光在肾活检病理诊断中起相当重要的作用。日常工作中多采用冰冻切片免疫荧光染色(immunofluorescence of frozen tissue sections,IF-F)。