糙海参中三萜皂苷活性成分的研究

目的:研究糙海参(HolothuriascabraJaeger)的三萜皂苷类抗癌活性成分。方法:应用大孔树脂柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和HPLC进行三萜皂苷成分的分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。并对提取到的化合物进行了稻瘟霉和体外细胞毒(针对MKN45人胃癌肿瘤细胞和HCT116人肠癌肿瘤细胞)的活性检测。结果:分离鉴定了5个三萜皂苷化合物,分别为24dehydroechinosideA(1),echinosideB(2),echinosideA(3),holothurinB(4)和holothurinA(5)。化合物1～5对稻瘟霉的最小活性浓度分别为<7.9、<15.7l、<7.9、<15.7、<7.9μg/ml,对MKN45人胃癌肿瘤细胞的IC50值分别为1.60、0.18、1.86、1.59、2.37μmol/L,对HCT116人肠癌肿瘤细胞的IC50值分别为1.46、3.31、1.98、1.60、0.24μmol/L。结论:化合物1为首次以原生产物形式得到的单体天然产物,2～5为首次从糙海参中分离得到。5个化合物均显示显著的体外细胞毒活性。

糙海参酸性粘多糖的分离及特性研究

研究了糙海参酸性粘多糖酶水解及乙醇沉淀的分离纯化方法,通过GPC测定其重均分子质量为59 934u,研究了其光谱特性。其氨基半乳糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖、硫酸根含量分别为16.40%、19.40%、11.08%和28.15%,通过对其理化性质的研究,为更好地利用这一生物资源提供了依据。

糙海参酸性粘多糖的提取纯化工艺探讨

本文研究了糙海参多糖的提取纯化方法,提取的最适提取条件为:pH6.0,木瓜蛋白酶浓度为250U/g,水解温度为60℃,水解时间为9.0h。

糙海参多糖纯化工艺优选及其产物的药理活性比较

通过正交实验发现糙海参多糖粘度和脱色时的温度、时间、多糖浓度和H2 O2 浓度有关。温度升高、时间延长、多糖浓度减小和H2 O2 浓度增大使产物粘度减小。并且不同粘度的糙海参多糖对小鼠急性脑缺血死亡时间的影响不同 ,在一定的范围内 ,随粘度减小 ,死亡时间延长 。

白沙参(斯里兰卡)人工繁育关键技术研究

研究了白沙参的人工繁育关键技术,观察了白沙参从受精卵到稚参的发育过程,并详细记录了各发育期距离受精的时间及各发育期完成发育的时间。确定角毛藻是其浮游幼虫期的主要饵料,发育成稚参后前5 d,开始施肥培育池壁上生长的底栖硅藻,在变为稚参10 d后投喂海藻磨碎液。发现桡足类的影响使稚参存活率、收获密度显著降低。

白沙参多糖与真鱿多糖的对比研究

采用蛋白酶水解白沙参与真鱿软骨,从组织中释放出多糖糖链,乙醇沉淀去除蛋白质,得到白沙参多糖与真鱿多糖,检测两种多糖中硫酸软骨素的二糖组分、多糖分子量及其抗凝活性。结果表明,白沙参多糖与真鱿多糖中硫酸软骨素均含有硫酸软骨素E二糖单位,在硫酸软骨素中的含量分别为34.8%和31.1%,两种硫酸软骨素分子量分别为105 000和259 000。两种多糖的硫酸化程度高,硫酸基含量分别为13.4%和10.2%。白沙参多糖与真鱿多糖均具有一定的抗凝活性,白沙参多糖的抗凝活性更高。

白沙参苗种中间培育关键参数研究

为了解决白沙参参苗个体小、抗逆性及抵御敌害生物的能力弱、成活率低、不利于增养殖的缺陷,研究了白沙参室内水泥池中间培育过程中的关键参数,并在最优条件下进行室内水泥池和室外池塘网箱的培苗,试验结束时测量参苗的体长和体重,计算成活率。结果表明,室内水泥池培育的关键技术参数如下：水温25~30℃,盐度25‰~35‰,培育密度2 000~3 000头/m2,光照强度2 000 lx。在上述最佳条件下,将体长0.3~0.5 cm、体重0.004 g的参苗16万尾,置于室内水泥池培育1个月后,参苗规格平均达到0.8~1 cm,存活率达到50%以上。然后将其转到室外网箱培养,更换网箱规格并及时疏苗,培育40 d时,参苗规格平均达到3 cm左右,存活率达到60%。

白沙参池塘生态养殖的关键参数及技术

为了缓解目前海参市场供不应求的局面,研究了白沙参的池塘生态养殖关键技术及参数,包括养成环境与条件,清池消毒及肥水的方法,种苗选择、运输及投放方法,以及水质管理、投饲管理、敌害清除等养成管理,并介绍了采捕方法。按照此套技术,开展了白沙参池塘生态养殖,记录了白沙参生长及存活情况,进行了经济效益分析,并对成品白沙参进行了检测。结果表明,在该套技术参数条件下,经过约10个月的养殖,白沙参的体长相对日增长率为5.73%,体重相对日增长率为781%,存活率达92%左右;白沙参池塘生态养殖经济效益显著,投入产出比达到400%;养成的白沙参质量优异,符合GB2762-2012的标准要求。

糙海参营养成分的探究

目的:探究干品糙海参的营养成分。方法:考察了糙海参的蛋白质、脂肪、水分、灰分以及氨基酸含量的差异,并研究了糙海参多糖的分子量和组成。结果:干品糙海参含有较多的蛋白质,其次是水分。氨基酸的总百分含量为60.45%,其中鲜味氨基酸占47.19%,抗氧化氨基酸含量6.94%,羟脯氨酸6.31%。糙海参多糖重均分子量(Mw)是68592u,并含有较多的羟基、氨基、羧基、硫酸酯,均为硫酸软骨素E。结论:糙海参具有很高的营养价值。

糙海参中具有细胞毒活性的三萜皂苷

目的研究糙海参(Holothuria scabraJaeger)具有生物活性的三萜皂苷类成分。方法应用大孔树脂柱色谱、正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱和HPLC对糙海参体内三萜皂苷活性成分进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果分离并鉴定了5个三萜皂苷类化合物,分别为:scabraside C(1)、holothurin A1(2)、echinoside A(3)、24-dehydroechioside A(4)和holothurin A(5),化合物1～5对人白血病细胞HL-60、MOLT-4和人肺癌细胞A-549的抑制率较强。结论化合物1～5为首次从糙海参中分离得到,其中化合物1为新化合物。5个化合物均显示显著的体外细胞毒活性。

糙海参质量标准研究

目的：对糙海参进行质量研究,初步建立糙海参的质量标准。方法：利用显微法鉴别骨片,显色法鉴别己糖醛酸和酸性多糖;采用1,9-二甲基亚甲蓝显色分光光度法测定酸性多糖的含量,其余检查项按照《中国药典》2010年版一部进行检测。结果：糙海参骨片有扣状体,少量桌形体、穿孔板和杆状体;糙海参体壁中含有己糖醛酸和酸性多糖;酸性多糖含量不低于2.0%,其含量测定方法在0.04～0.18 mg·mL-1范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为94.51%（RSD4.4%）,精密度RSD0.58%;杂质含量限度不超过15.0%,水分含量限度10.0%,总灰分和酸不溶性灰分含量限度60.0%和20.0%。结论：对糙海参的来源、性状、鉴别、检查、含量测定等进行了研究,为糙海参质量标准的建立、规范和完善提供科学依据。