东北大黑鳃金龟幼虫高毒力球孢白僵菌菌株的筛选及应用

为了筛选到针对靶标害虫东北大黑鳃金龟幼虫高毒力球孢白僵菌菌株,通过室内生物测定,明确球孢白僵菌Bb QCGZL-1对东北大黑鳃金龟幼虫的致病力,并与其他药剂进行防效对比;同时通过盆栽试验测定了球孢白僵菌BbQCGZL-1在不同农作物上对东北大黑鳃金龟幼虫的防治效果。球孢白僵菌BbQCGZL-1在施药14d时校正死亡率达到75%以上,高于其他供试菌株;施药7d时LC50为1.21×10^(7)cfu/mL,当菌悬液浓度为1.0×10^(8)cfu/mL时,LT_(50)为8.82 d;室内生测试验和室外盆栽试验结果表明,在东北地区利用球孢白僵菌防治东北大黑鳃金龟幼虫时,球孢白僵菌Bb QCGZL-1与商品化的微生物源药剂在防治效果上无显著差异。球孢白僵菌BbQCGZL-1可作为防治东北大黑鳃金龟幼虫的有效微生物源药剂。

东北大黑鳃金龟嗅感器超微结构

利用扫描电镜和透射电镜对东北大黑鳃金龟Holotrichia diomphalia成虫触角嗅感器进行超微结构研究。结果表明：其嗅感器集中于触角鳃片上,着生在表皮内陷形成的凹腔里。嗅感器包括锥形感器和板形感器两种,锥形感器根据锥体形状的差异可分为4种类型,板形感器根据盘体形状的不同可分为5种类型。嗅感器表皮为单壁,壁上具有微孔和孔道微管。嗅感器内神经元的数目并不一致,1 ~3个不等。雄性触角鳃片的长度长于雌性触角鳃片,并且雄性触角嗅感器的总数远远多于雌性,其中雄性板形感器的数目与雌性差异不大,但雄性锥形感器的数目却远远的多于雌性,几乎是雌性的9倍。由此推测锥形感器是感受性信息素的感器,而板形感器用于感受植物气味。

卵孢白僵菌防治苗圃地蛴螬的应用技术

报道了利用卵孢白僵菌 (Beauveriabrongniatii)防治苗圃地下害虫蛴螬的应用技术。防治东北大黑鳃金龟子 (Holotrichiadiomphalia)幼虫 ,每公顷施菌量 6 0～ 90kg ,防治效果为 6 8.8%～ 86 .0 %。白僵菌和化学农药混用有一定的增效作用 ,防治效果最高可达 91%。同时结合苗圃不同的耕作方式 ,提出了床基施菌、苗木沟施菌、垄式床基施菌、垄式中耕施菌、苗木生长期施菌 5种施菌方法 ,除垅式床基施菌外 ,其它 4种施菌方法的防治效果达 76 .1%～ 83 .1% ,虫量和苗木被害率都较对照有明显降低 ,并且通过生产示范 。

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。

虫类中药蛴螬中含氮化合物研究

从虫类中药蛴螬Holotrichia diomphalia Bates的乙醇提取物中分离得到13个化合物,其结构经谱学数据和与已知化合物比较,分别鉴定为N-[2-(4-羟苯基)-乙基]乙酰胺(1)、环(酪氨酸-脯氨酸)(2)、吡啶-3-甲酰胺(3)、胸苷(4)、戊内酰胺(5)、5-(羟甲基)-1H-吡咯-2-醛(6)、环(脯氨酸-缬氨酸)(7)、环(脯氨酸-丙氨酸)(8)、羟吲哚(9)、1,2,3,4-四氢-1,3,4-三氧-β-咔啉(10)、吲哚-3-醛(11)、黄苷(12)和苯基丙氨酸(13)。化合物1～13均为首次从该种动物药中分离得到。

不同产地蛴螬中蛋白质、氨基酸和无机元素分析

目的:对不同产地蛴螬的蛋白质、氨基酸和无机元素进行综合分析,考察各地的差异,为蛴螬药材质量评价及临床应用提供参考依据。方法:采用凯式定氮法、氨基酸分析仪、原子吸收光谱仪、元素分析仪等对全国不同产地蛴螬中的蛋白质、氨基酸、无机元素等含量进行分析。结果:全国不同产地蛴螬中含有的成分有一定差异,蛋白质含量为33.4%～44.4%,江西产蛋白质含量最高;各产地蛴螬均含有17种氨基酸,其中7种为人体必需氨基酸,含量较高的有谷氨酸(5.21%～7.03%)、酪氨酸(4.10%～5.27%)、天门冬氨酸(3.21%～5.35%);含有丰富的宏量元素Mg、Ca与微量元素Fe、Zn等。结论:蛴螬中含有多种人体必需的氨基酸和无机元素,不同产地含量有一定差异。

沈阳地区花生田苗期蛴螬危害损失及防治指标

为研究沈阳地区不同虫口密度下的蛴螬危害损失,在大田条件下以东北大黑鳃金龟3龄幼虫为试虫,采用人工接虫的方法,研究蛴螬虫口密度与花生产量之间的关系。结果表明,蛴螬的虫口密度(x)与花生产量(y)存在线性相关(y=-8.315x+417.87),相关系数r=0.996,二者相关性极显著。田间每1m2面积上每增加1头蛴螬时,花生产量损失约增加8.315g,产量损失率为1.99%。根据防治的直接收益不低于防治成本原则,确定了沈阳地区花生田东北大黑鳃金龟3龄幼虫的防治指标为1.98头/m2。

蛴螬脂溶性成分的气相色谱-质谱联用分析及抗炎、镇痛活性研究

目的:对蛴螬脂溶性成分进行分析,并对其抗炎、镇痛活性进行初步研究。方法:采用气相色谱-质谱联用技术对蛴螬脂溶性成分进行分析;采用小鼠耳廓肿胀法实验研究其抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法观察其镇痛作用。结果:共鉴定出22个成分,占峰面积的88.81%,其中含量较高的成分为油酸、棕榈酸和棕榈油酸;蛴螬脂溶性成分能够抑制二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度;可提高热板所致小鼠痛阈值,减少醋酸所致小鼠的扭体次数。结论:蛴螬脂溶性成分有一定的抗炎、镇痛作用。

不同耕作方式对花生田蛴螬发生及产量的影响

花生田分别采用免耕清理秸秆、免耕秸秆还田、翻耕秸秆还田、休耕田、翻耕清理秸秆五种耕作方式来进行田间比较试验。结果表明,在不同耕作方式下,以免耕秸秆还田处理花生蛴螬(Holotrichia diomphalia)数量最多,为每平方米12.8头,其次是免耕清理秸秆处理每平方米11.4头,以休耕田处理蛴螬数量最少,为每平方米8.6头,虽然各不同处理花生田间蛴螬的数量不相同,但各处理间蛴螬数量差异不明显。其中以免耕秸秆还田处理经济效益最优。

蛴螬生物碱提取工艺及体内外抗肿瘤活性研究

目的研究蛴螬生物碱的提取工艺并对其抗肿瘤活性进行评价。方法采用单因素实验和L9(34)正交实验得到最佳提取蛴螬生物碱的方法;采用MTT和荷瘤小鼠抑瘤率的方法测定生物碱的体内外抗肿瘤活性。结果最佳提取工艺为蛴螬粗粉用体积分数95%乙醇浸泡提取24h;蛴螬生物碱对体内外肿瘤细胞有明显抑制作用,且具有质量浓度依赖性。结论蛴螬粗粉用体积分数95%乙醇浸泡24h提取,浓缩浸膏经过酸化萃取得到的生物碱抗肿瘤活性显著。

重要地下害虫东北大黑鳃金龟研究进展

东北大黑鳃金龟 Holotrichia diomphalia 是我国东北地区重要的蛴螬类地下害虫,主要危害麦类、玉米、豆类等大田作物,以及薯类、花生等经济作物。华北大黑鳃金龟 Holotrichia oblita 和江南大黑鳃金龟 Holotrichia gebleri 是华北及江南地区的主要蛴螬类害虫。近年来,传统分类学、杂交实验以及分子生物学的研究都证明, 3种鳃金龟是同一个物种的不同地理种群,这些研究成果使东北大黑鳃金龟从一个区域性害虫转变成为分布范围从东北到长江流域的广布害虫。本文综合介绍了东北大黑鳃金龟(包括华北大黑鳃金龟、江南大黑鳃金龟)近二十年来的研究成果,包括分类学、发生规律、防治措施,以及生理生化及分子生物学等,并对东北大黑鳃金龟的综合治理研究进行了展望。

昆虫病原线虫对东北大黑鳃金龟防治效果研究

采用温室盆栽试验研究了昆虫病原线虫Heterorhabditis bacteriophora-NJ施用剂量、施用次数和在盐碱土、风沙土及黑土等不同土壤类型条件下对东北大黑鳃金龟（Holotrichia diomphalia）幼虫防治效果的影响。结果显示，嗜菌异小杆线虫施用浓度在线虫5条／cm^2-80条／cm^2剂量时，施用2～3次，可有效地控制东北大黑鳃金龟幼虫，施用浓度对线虫防治东北大黑鳃金龟幼虫效果的影响较施用次数要大。在黑土、盐碱土和风沙土中，嗜菌异小杆线虫对东北大黑鳃金龟幼虫的防治效果都较高，其中盐碱土防效更好一些。表4，参24。

蛴螬化学成分及药理作用研究进展

综述国内外有关蛴螬的炮制方法、化学成分和药理作用的研究,为进一步研究和利用蛴螬提供依据。

虫类中药蛴螬的酚性成分

从虫类中药蛴螬的乙酸乙酯提取物中分离得到6个化合物,其结构经波谱鉴定为3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸(1),水杨酸(2),对羟基苯甲酸(3),香草酸(4),对羟基苯丙酸(5)和对羟基苯丙酸甲酯(6)。化合物1～6均为首次从该种动物药中分离得到。

利用绿僵菌与倍硫磷混用防治东北大黑鳃金龟研究

利用绿僵菌与倍硫磷混用进行防治东北大黑鳃金龟1龄幼虫的试验,结果表明:该方法具有明显的增效作用.

白僵菌防治花生地蛴螬研究综述

文章综述了目前国内外在白僵菌高毒力菌株筛选领域的研究报道以及花生地蛴螬的防治现状,讨论了白僵菌菌株毒力退化和环境因素对药效的影响等问题;提出加强白僵菌对蛴螬致病机理、白僵菌毒素作用机制、白僵菌制剂稳定性方面的研究,以延缓白僵菌退化,提高其稳定性和防效;指出结合花生地的土壤环境条件和蛴螬的为害习性,研究白僵菌病的流行动态与环境因素对白僵菌病传染的作用,是利用该菌防治蛴螬应用研究的一个新方向。

东北春大豆田蛴螬防治指标研究

为明确全球气候变暖趋势下和国家"双减"方针指导下的东北春大豆田蛴螬防治指标,在沈阳春大豆田播种后采用人工接虫的方法,研究了不同虫口密度下的东北大黑鳃金龟3龄幼虫对大豆死亡株率和大豆产量的影响。结果表明,大豆产量(y)与虫口密度(x)呈负相关关系(y=-0.0135x+0.4232,32>x≥1,r=-0.990),产量损失率(y)与蛴螬虫口密度(x)与间存在线性相关关系(y=3.0051x+2.6781,x≥1,r=0.991);x≥4,即虫口密度≥4,产量与产量损失率均达到显著差异;基于防治收益应大于防治成本的原则,确定了东北春大豆田东北大黑鳃金龟3龄蛴螬幼虫的防治指标应为2.33头/m^2。不同时期、不同虫口密度下蛴螬危害造成的大豆死亡株率间存在较大差异。每平方米有1~5头蛴螬为害时,大豆苗期(V1)死亡株率达到48.18%~57.87%,至大豆初花期(R1)大豆死亡株率达到65.67%~75.05%,V1期死亡株率远大于V1至RI阶段的死亡株率,因此要加强苗期蛴螬的防治工作。

固相萃取小柱净化-气相色谱法测定蛴螬的有机氯农药残留

目的建立测定蛴螬中9种有机氯类农药残留量的方法。方法采用超声提取,固相萃取小柱净化,气相色谱法进行测定。结果所测定农药的回收率为84.0%～107.4%,样品中六六六的4种异构体、滴滴涕的4种异构体和五氯硝基苯的含量均符合国家的相关规定。结论该方法操作简便,灵敏,适用于蛴螬有机氯类农药的检测。

蚧螬化学成分的GC-MS分析

目的分析蚧螬石油醚提取物的化学成分。方法采用石油醚超声提取挥发油,气相色谱-质谱-计算机联用技术分析。结果共鉴定出21种成分,占挥发油总量的96.3%。结论蚧螬石油醚提取物的主要成分是反油酸50.82%,十六酸25.64%,反-11-十六碳烯酸8.98%,硬脂酸2.65%。

双孢菇菌渣养殖蛴螬技术初探

以华北大黑鳃金龟蛴螬和双孢菇菌渣为试材,研究了不同饲料厚度、虫口密度和菌渣的不同处理及混配比例对蛴螬生长的影响,以期摸清双孢菇菌渣养殖蛴螬的关键技术。结果表明:利用双孢菇菌渣饲养蛴螬不但可行而且效果较为显著。其中双孢菇菌渣饲养蛴螬的最佳饲料厚度为25cm,最佳的饲养密度为44～56只/m2;双孢菇菌渣晾干后比腐熟菌渣和玉米秸秆糠粉都更适宜养殖蛴螬。