胱硫醚合成酶基因突变与同型胱氨酸尿症临床表型关系的探讨

目的 了解由胱硫醚合成酶 (CBS)基因缺陷引起的同型胱氨酸尿症的基因突变类型 ,探讨其基因突变与临床表型的关系 ,确立同型胱氨酸尿症基因诊断方法。方法 对 2 0 0 0年至 2 0 0 2年深圳市儿童医院收集的 6例 ,来自 5个家系的同型胱氨酸尿症患儿进行了分子生物学研究。培养患儿的皮肤成纤维细胞 ,提取总的RNA和genomicDNA ,用PCR法、反转录PCR法、质粒扩增、DNA序列分析、限制性内切酶图谱等技术检测CBS基因的突变 ,并用基因表达和酶活性测定等技术确定致病变异。结果 我们发现了 8个变异 (H6 5R ,G116R ,E14 4K ,G2 5 9S ,K4 4 1X ,Ivs9+1g to a ,Ivs10 +3to +8aagaca to tc ,和 15 90del4 ) ,所有患儿均为杂合子。把这些变异在大肠杆菌细胞中进行基因表达 ,证实它们为致病变异。结论 CBS基因的变异是多样性的。在杂合子状态下 ,基因突变与维生素B6不反应性之间的关系难以确定。即使基因突变相同 ,临床表型也有差异。