基于JNK/AP-1信号通路探讨广西毛冬青在放射性脑损伤中的作用机制

目的:探讨广西毛冬青(IPH)对放射性脑损伤的改善作用及其机制。方法:将40只SPF级昆明小鼠随机分为对照组、IPH、放射组和放射+IPH组,每组10只。采用γ射线建立放射性脑损伤模型,放射前、后连续灌胃给药14 d。采用Morris水迷宫实验、避暗实验检测小鼠认知功能,苏木精—伊红(HE)染色和尼氏染色观察脑组织病理形态变化,电镜观察胶质细胞超微结构,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白介素-6(IL-6)水平,免疫组织化学染色法检测脑组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化(p-)JNK、激活蛋白-1(AP-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达,免疫荧光检测脑组织星型胶质细胞标记物GFAP和小胶质细胞标记物Iba-1蛋白表达,western blotting法检测脑组织JNK和p-JNK蛋白表达。结果:与对照组相比,放射组小鼠放射后7 d体重减低,血清IL-6含量升高,脑组织AP-1、MCP-1表达水平及p-JNK/JNK比值升高,小胶质细胞Iba-1和GFAP表达水平升高(均P<0.05)。与放射组比较,放射+IPH组小鼠放射后7 d体重增加,血清IL-6含量降低,脑组织AP-1、MCP-1表达水平及p-JNK/JNK比值降低,小胶质细胞Iba-1和GFAP表达水平降低(均P<0.05)。HE染色和尼氏染色显示,放射组大量细胞和神经元出现核固缩现象,小胶质细胞激活,呈圆形;电镜下可见细胞内溶酶体增多,星形胶质细胞细胞核及胞质肿胀;经IPH干预后,小鼠脑组织神经元变性情况和胶质细胞形态明显改善。结论:广西IPH能改善放射性脑损伤小鼠的认知功能,减少小胶质细胞和星形胶质细胞激活,其机制可能与减轻神经炎症反应、抑制JNK/AP-1信号通路有关。

响应面法优化天仙果总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究

目的:优化天仙果总黄酮提取工艺,并测定其抗氧化活性。方法:通过响应面优化建立数学模型,考察乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数4个因素,得到天仙果总黄酮最优提取条件。考察天仙果抗氧化活性,进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、羟自由基清除能力的测定。结果:天仙果总黄酮最佳提取工艺为乙醇体积分数60%、料液比1∶23、提取时间18 min、提取1次,在此条件下,提取率为16.25 mg·g^(-1),天仙果总黄酮对DPPH、ABTS、羟自由基清除率分别为92.84%、89.34%、69.73%。结论:优化后的提取工艺可操作性强、稳定可靠,天仙果抗氧化活性好。

裸花紫珠艾纳香洗衣液的制备和性能检测

提取分离裸花紫珠和滇桂艾纳香的成分,以起泡性、抑菌性、粘度为4个考察因素筛选裸花紫珠艾纳香洗衣液的最优处方,即为11%辛癸基葡糖苷、3.5%椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB)、13%月桂酰胺丙基氧化胺、7%十二烷基苯磺酸钠、5%裸花紫珠提取浓缩液、5%艾纳香提取浓缩液、0.7%的柠檬酸和0.3%氯化钠以及54.5%去离子水组成;该洗衣液的起泡性能稳定,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为22 mm,去污力能满足人们的需求。

裸花紫珠艾纳香抑菌洗手液的制备和性能检测

制备一种含有裸花紫珠与滇桂艾纳香成分的抑菌洗手液,并通过其起泡性、黏度、抑菌性评价其性能。其处方由18%脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、9%椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB)、3%甘油(丙三醇)、7%裸花紫珠艾纳香提取浓缩液、0.26%10%NaOH溶液和62.74%去离子水组成;该洗手液的起泡性能稳定,黏度与市售洗手液相比无显著差异,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为22 mm,该洗手液性能良好。

岗梅全长转录组测序及其三萜皂苷生物合成相关基因的挖掘

目的:获得岗梅全长转录组数据库,为深入挖掘岗梅功能基因奠定基础。方法:采用基于PacBio Sequel平台的单分子实时测序技术获取岗梅的根、茎、叶样品的转录组数据,并利用非冗余蛋白(NR)、核苷酸序列(NT)、SwissProt蛋白序列数据库、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、蛋白家族(Pfam)、基因本体(GO)进行注释,分析并鉴定编码三萜皂苷生物合成的关键酶的转录本。结果:全长转录组共获得89629个转录本,其中81313个在公共数据库进行了注释。KEEG代谢通路富集分析表明,623个转录本参与岗梅中三萜皂苷合成相关的3条代谢通路,其中263个转录本编码了三萜皂苷生物合成途径的21个关键酶。此外,还预测了2471个转录因子、40421个简单重复序列位点、22119个长链非编码RNA(lncRNA)和29131个mRNA。结论:丰富了岗梅的转录组数据,并为鉴定参与三萜皂苷和其他次生代谢物生物合成的候选基因提供参考,促进其分子生物学和基因组学的研究。

裸花紫珠苯乙醇苷-纳米银复合物制备

目的制备裸花紫珠苯乙醇苷-纳米银复合物。方法以提取液与硝酸银溶液体积比、硝酸银溶液浓度、反应温度、反应时间为影响因素,吸光度为评价指标,单因素试验优化制备工艺。采用紫外-可见分光光度法确定最大吸收波长,在透射电镜下观察外观形态,测定粒径、Zeta电位,红外光谱法分析官能团结构。结果最佳条件为提取液与硝酸银溶液体积比1∶10,硝酸银溶液浓度1 mmol/L,反应温度60℃,反应时间90 min,3批样品吸收曲线稳定。所得纳米银复合物被灰色物质包裹,最大吸收波长为420 nm,平均粒径为26 nm,Zeta电位为^(-1)5.1 mV。在红外光谱图中,1082、535 cm^(-1)处吸收峰减弱,986、861 cm^(-1)处吸收峰消失,1384 cm^(-1)处吸收峰增强。结论该方法稳定可行,可用于制备裸花紫珠苯乙醇苷-纳米银复合物。

毛冬青中三萜皂苷类化合物的NMR归属

从岭南地区习用药毛冬青Ilexpubescens Hook.Et.Arn.根中分离得到2个三萜皂苷类化合物,经理化及波谱方法鉴定为ilexsaponin B1和ilexsaponin B2。首次利用2D NMR技术对此2个化合物的1H和13C NMR数据进行了全归属。药理活性研究表明,毛冬青总皂苷具有明显降低血浆粘度的作用。

基于ITS2序列的秤星树等冬青属8种药用植物的分子鉴别

[目的]建立ITS2区段的秤星树及其同属几种药用植物的分子鉴别方法。[方法]以秤星树等几种药用植物为材料,采用离心柱型试剂盒提取总DNA,采用一对通用引物对ITS2区段进行PCR扩增和测序;HMMer法对测序结果进行注释得到ITS2序列;MEGA软件分析,寻找差异位点,构建系统发生树。[结果]测序后注释得到的秤星树等8种冬青属药用植物ITS2比对序列为254 bp,种间存在85个差异位点。[结论]ITS2区可用于鉴别秤星树与同属几种药用植物。

裸花紫珠试管苗生产技术初探

以带腋芽的裸花紫珠（Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.）嫩茎段为外植体,研究其组培快繁技术.结果表明,用0.1％的升汞处理外植体15 min,接种于MS＋1.5 mg/L 6-BA＋30 g/L蔗糖培养基上,7d后萌发腋芽;丛生芽在MS＋2.0 mg/L 6-BA＋30 g/L蔗糖的培养基增殖效果最佳,增殖系数达8.50;丛生芽的继代培养周期是30 d,超出40 d时会有死株现象;培养基MS＋0.5～0.8 mg/L NAA＋0.5 g/L活性炭＋30 g/L蔗糖适宜诱导生根,生根率达100％;生根苗移栽在V河沙∶V木屑∶V园土=1∶1∶1的混合基质中,塑料薄膜保湿20 d成活率达93％,且植株生长良好.

常用黎族药物裸花紫珠种子生物学特性及萌发性研究

研究了黎族常用药用植物裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)种子的个体大小、显微结构、超微结构、生活力、吸水率和萌发率等性状。结果表明,裸花紫珠种子形态大小差异小,长度、宽度、厚度的平均值分别为1.96、1.76、1.84 mm;生物显微镜下石蜡切片观察果实,其为4室胚珠组成的种子,其中仅1~2室胚珠发育完全。扫描电镜下,裸花紫珠果实表皮具有多条脊状条带,腺鳞多数,非腺毛较少。种子的平均含水量为11.30%,吸水率平均值为80.33%,生活力平均值为33.30%;25℃为最适萌发温度,该温度下用0.3%高锰酸钾溶液、500 mg/L赤霉素或沙土包埋萌发率较高。裸花紫珠果实内部发育不全可能是导致种子的生活力和萌发率低的因素,用不同化学试剂和沙土处理种子后可以提高种子的萌发率。

HPLC法测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量

目的:测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量,建立裸花紫珠片具专属性的含量控制方法。方法:采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1%醋酸水溶液(40:60);流速:1.0 mL/min;检测波长:334 nm;进样量:10μL。结果:毛蕊花糖苷在0.48～9.60μg(r=0.999 4,n=7)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为95.94%,RSD为1.54%;连翘酯苷在0.54～10.80μg(r=0.999 7,n=7)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为98.33%,RSD为1.68%。结论:经过系统的方法学考察,该方法专属性强,重复性好,结果准确,为裸花紫珠片提供了科学、专属的质量控制方法。

红景天提取物对小鼠免疫功能的影响

[目的]探讨红景天[Rhodiola crenulata(Hook.f.et.Thoms.)H.Ohba]提取物对小鼠免疫功能的影响。[方法]将192只BALB/c小鼠随机分为4批,每批分为4组,分别为低、中、高3个剂量组和1个溶剂对照组,连续灌药(20 m l/kg.体重)30 d,测定各免疫指标。[结果]高剂量组红景天提取物可提高小鼠碳廓清能力(P<0.05);中剂量和高剂量组能增强绵羊红细胞诱导小鼠DTH能力(P<0.05),促进NK细胞活性(P<0.05)和血清凝血素的生成(P<0.05),增加抗体生成细胞数的生成(P<0.05),并且能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力(P<0.05),但对免疫器官/体重质量值和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力无显著影响。[结论]红景天提取物具有增强正常小鼠免疫力的功能,该研究为开发有食用价值的保健食品提供了试验依据。

裸花紫珠治疗烧烫伤模型大鼠活性部位的筛选及其作用机制研究

为筛选裸花紫珠治疗烧烫伤的活性部位,并初步研究其作用机制。实验采用90°C热水造成大鼠烫伤模型。以伤口面积大小,伤口性状,如颜色、软硬程度等为指标,通过宏观和微观检测筛选裸花紫珠治疗烧烫伤的活性部位。采用ELISA和Western blot等方法初步研究其作用机制。进入组织增生重塑期后,石油醚组相较其它各组,伤口愈合最为显著;在组织增生最后的成熟期,石油醚组的表皮和真皮恢复得最好,伤疤最小。石油醚组的VEGF浓度在早期出现了明显的上调;在第21天时,TGF-β1的表达水平最低。裸花紫珠治疗烧烫伤的活性部位初步推测在石油醚层,其治疗烧烫伤作用机制可能是早期裸花紫珠使VEGF上调,在后期下调了TGF-β1以达到。本研究为裸花紫珠治疗烧烫伤的进一步研究和应用提供依据。

黎药-裸花紫珠氯仿萃取部位的化学成分

目的研究黎药裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.Et Arn.)叶的氯仿萃取部位的化学成分。方法黎药裸花紫珠叶用水提取后,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对氯仿萃取部位采用各种柱色谱方法进行分离、纯化,通过理化性质、薄层色谱及波谱分析等方法对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从裸花紫珠叶的氯仿萃取部位中分离得到5个已知化合物,分别鉴定为:7α-Hydroxysandaracopimaric acid(Ⅰ)、香草醛(Ⅱ)、5,4′-二羟基-3,7,3′-三甲氧基黄酮(Ⅲ)、5-羟基-3,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(Ⅳ)、齐墩果酸(Ⅴ)。结论化合物Ⅱ为首次从该植物中分离得到。

微波消解—原子吸收光谱法测定岗梅根茎中铅、镉的含量

【目的】建立岗梅根、茎中铅、镉的含量测定方法。【方法】采用微波消解—原子吸收光谱法测定不同产地及不同生长年限岗梅根、茎中铅、镉的含量,消解体系是浓硝酸。【结果】方法的精密度分别为3.5%、2.1%,重复性分别为4.3%、3.5%(N=6);平均回收率分别为96.8%、97.2%,sR分别为4.2%、3.6%(N=6)。12个产地的岗梅药材根、茎中铅、镉含量普遍超标,且随着生长年限的不同,岗梅根、茎中铅、镉含量也不同。【结论】本方法准确、快速、简便,适用于岗梅根、茎中铅、镉2种重金属的含量测定。

Box-Behnken响应面法优化裸花紫珠有效成分提取工艺

为研究裸花紫珠浸膏得率、总黄酮、总酚酸及总皂苷的最佳提取工艺,以浸膏得率和有效成分总含量(总黄酮、总酚酸及总皂苷含量之和)的加权评分值(加权评分值=浸膏得率×0.7+总有效成分含量×0.3)为指标,通过单因素和响应面设计相结合的方法,以提取方法、提取时间、料液比、乙醇浓度、提取次数为考察因素,优化裸花紫珠有效成分提取工艺。结果表明裸花紫珠有效成分的最佳提取工艺为:超声提取时间为42min,料液比1∶17,乙醇体积分数为62%,提取2次。此条件下加权评分值为119.27,预测加权评分值为120.47,两者相差较小。优化后的裸花紫珠有效成分提取工艺简单可行,重现性和可预测性较好。

裸花紫珠叶的化学成分研究

目的:研究裸花紫珠叶的化学成分。方法:运用反相制备色谱等方法对裸花紫珠叶的提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据对化合物结构进行鉴定。结果:从裸花紫珠叶中分离得到15个化合物,分别鉴定为:连翘酯苷E(1)、6″-O-trans-caffeoylcatalpol(2)、香叶木素(3)、3,7-二甲氧基-槲皮素(4)、syn-3,4-seco-12R-hydroxy-15,16-epoxy-4(18),8(17),13(16),14(15)-labdatetraen-3-oic acid(5)、(12E)-3,4-seco-labda-4(18),8(20),12,14-tetraen-3-oic acid 2(6)、梓醇(7)、芹菜素(8)、异鼠李素(9)、5,4′-二羟基-3,7,3′-三甲氧基黄酮(10)、原儿茶醛(11)、对羟基苯甲醛(12)、对羟基桂皮酸(13)、水杨酸(14)、木犀草素(15)。结论:其中,化合物1、3、4、6为首次从紫珠属植物中分离得到。

毛冬青水提物的抗氧化及抗脂质过氧化的活性研究

目的:研究毛冬青水提物抗氧化及抗脂质过氧化的活性。方法:80℃回流提取毛冬青水溶性成分,采用普鲁士蓝反应、DPPH反应、水杨酸法比色法、邻苯三酚自氧化法,研究毛冬青水提物的还原能力及对DPPH·自由基、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)的清除能力;Fe2+-半胱氨酸诱导大鼠肝脏组织发生脂质过氧化产生丙二醛(MDA),通过计算LPO抑制率研究毛冬青水提物的抗脂质过氧化能力。结果:毛冬青水提物具有一定的还原能力,对DPPH·自由基、·OH有较强的清除能力,在一定范围内,其清除能力与质量浓度呈正相关关系,EC50分别为0.026mg/mL和7.496mg/mL,对O2-·则有较弱的清除作用。毛冬青水提物能明显降低大鼠肝组织MDA含量。结论:毛冬青水提物具有一定的抗氧化和抗脂质过氧化活性。

裸花紫珠研究进展

裸花紫珠有广泛的临床应用。近5年来,国内外对其资源、栽培与种植、鉴别和质量研究、成分与活性、剂型等方面进行了大量深入的研究。本文主要从裸花紫珠基源、成分与疗效、制剂品种及质量控制等方面进行系统综述,为裸花紫珠剂型研究及质量控制,提供科学依据和理论基础。

不同溶剂提取毛冬青叶挥发油的成分的GC-MS分析

[目的]研究毛冬青叶的挥发性成分含量及其利用价值,探讨不同溶剂回流提取毛冬青叶中的挥发性成分的差异。[方法]分别用石油醚、氯仿提取毛冬青叶挥发性成分,以GC-MS联用技术对化学成分进行分离鉴定。[结果]毛冬青叶挥发油主要含有烃类、内酯类、脂肪酸、烯醇、苯丙素类等成分。其中相对含量较高为:异丁香油酚(28.967%)、二十烷(8.735%)、十九烷(8.225%)、二十四烷(7.929%)、邻苯二酸-(2-乙基)己酯(7.161%)、十八烷(6.380%)。以石油醚为溶剂提取苯丙素类成分优于氯仿,而提取饱和烃及脂肪酸时,以氯仿为溶剂效果更佳。[结论]毛冬青叶挥发油具有良好的应用价值,研究其挥发油化学成分及其含量为毛冬青叶的综合开发利用提供了一定的理论依据。