辣椒细胞质雄性不育基因的AFLP分析

本文采用AFLP(amplified fragment length polymorphism)技术对辣椒(Capsicum annuum L.)细胞质雄性不育系21A及其相应的保持系21B基因组DNA进行多态性比较,筛选了64对AFLP选择性引物PstⅠ-NNN+MseⅠ-NNN组合,有60对引物组合均在两系间扩增出5447条带,多态性位点为4个,其中在不育系材料中仅有2个多态性片段AGC/CGC378和ATC/GAG446,对特异片段进行克隆、测序,其序列全长分别为340bp和408bp,它们编码的氨基酸序列与烟草基因组线粒体DNA序列同源性达94%和96%。

辣椒AFLP反应体系的优化与建立

以5个辣椒(Capsicum annuum L.)材料为研究对象,对AFLP反应体系中的DNA用量、酶切连接时间、预扩增产物的稀释倍数等关键因素进行优化分析,建立了适宜辣椒作物的AFLP反应体系。研究结果:酶切连接反应中,基因组DNA适宜用量为100ng,反应时间是6h最为合适,预扩增产物适宜稀释倍数在30～50倍时较为理想。

辣椒SRAP-PCR反应体系的建立与优化

SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑橘类果树、樱桃、梅子、大蒜、莴苣及芹菜等植物和水稻稻瘟病的研究中,对开展遗传图谱构建、基因定位与克隆、比较基因组学、cDNA指纹图谱、生物多样性研究、预测杂种优势等研究是一个十分实用的工具。本研究对辣椒SRAP反应体系的程序、模板、Mg2+等参数进行优化研究,结果表明:辣椒的PCR程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环,94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,最后72℃延伸10min;25滋l反应体系中,模板量为15ng,Mg2+为2.0mmol/L。本研究建立的辣椒SRAP体系重复性好、稳定性强。

辣(甜)椒胞质雄性不育系杂种优势利用及其制种技术

自 198 0年开始 ,利用从法国引进的长灯笼形甜椒胞质雄性不育系“LANES”为不育源 ,通过回交转育方法 ,于 1984年选育出羊角形辣椒胞质雄性不育系“2 1A”、灯笼形甜椒胞质雄性不育系“8A”和“17A”。至 2 0 0 0年测配6 17个辣 (甜 )椒杂交组合 ,其中F1育性完全恢复的组合为 196个 ,占全部组合数的 31.7%。在这 196个组合中 ,辣 /辣组合 12 7个 ,占 6 4.8% ;甜 /甜组合仅 11个 ,占 5 .6 %。经配合力测定 ,选育出 3个具有优质、抗病、丰产特点的一代杂种 2 1/LS3 (“苏椒 3号A”)、2 1A/LS2 和 8A/LS7(“碧玉”)。辣椒雄性不育系繁种、制种技术研究表明 ,利用大棚繁种 ,不育系∶恢复系为 2∶1,采用人工辅助授粉生产的杂交种子量明显高于露地繁种。应用辣椒雄性不育系繁制一代杂交种子 ,比常规去雄繁种节省工本 5 0 % ,且纯度达到 10 0 %。

辣椒苗期耐热耐湿鉴定方法的研究

以辣椒各生理指标的耐逆系数为衡量辣椒单项耐逆能力大小的指标,用聚类分析法、主成分分析法、隶属函数法对辣椒不同品种(系)耐热耐湿性予以综合评价。综合评价的结果,将10个供试品种(系)按耐热耐湿由强到弱划分为4级:高度耐热耐湿(I)、中度耐热耐湿(G、J、W、H)、不耐热耐湿(C、E、F、K)和极不耐热耐湿(D)。几种关于辣椒品种(系)耐热耐湿综合评价的方法具有较好的一致性,同时利用耐热耐湿性的综合评价值与单项指标间建立的最优回归方程可以预测其他辣椒品种(系)耐热耐湿性大小。

枯草芽孢杆菌Bs-15产嗜铁素条件及其对甜椒的防病促生效应

研究了不同培养条件对枯草芽孢杆菌Bs-15嗜铁素产量的影响。结果表明,以改良MM培养基为基础培养基,以葡萄糖为碳源,以色氨酸为外源氨基酸,在pH7.2、装液量100mL/250mL、37℃、200r/min下培养,可获得较高产量的嗜铁素。盆钵试验结果表明:若同时接种Bs-15和枯萎病菌,Bs对枯萎病菌的防效为44.44%;若施用Bs-152d后再接种枯萎病菌,防效可达56.94%。说明Bs-15可能通过产生系统诱导抗性增强了对枯萎病的防效。研究结果还表明,Fe离子可大大降低Bs-15对枯萎病的防治效果,防效仅为12.50%和23.43%。另外,经Bs-15浸种处理播种后第14,21,28和40d的甜椒苗比对照增高27.24%～54.53%;与对照相比,处理组中有50%的甜椒开花时间提前了17.26d,平均单果重和单株产量分别提高36.92%和49.68%。表明枯草芽孢杆菌Bs-15在甜椒枯萎病防治及生长促进作用方面具有较好的效果。

提高甜椒种子活力的方法及机理初探

应用PEG、KH2PO4、GA3和低温处理方法,采用L9(34)正交试验设计处理甜椒种子,对甜椒种子活力提高的机理进行初步研究。结果表明:①在适宜条件下,PEG、KH2PO4、GA3和低温处理均能提高甜椒种子活力,其中GA3和低温处理效果最佳;②种子活力提高后,淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、SOD、POD和CAT活性增强;种子浸出液相对电导率、可溶性糖渗漏及M DA含量下降。萌发期间膜脂过氧化程度的降低和物质代谢水平的提高是甜椒种子活力提高的两个重要因素;③种子处理对甜椒种子存在两种修补作用,即物理修补和生化修补,其中以生化修补为主。

甜椒胞质雄性不育(CMS)系及其保持系花药中游离氨基酸含量

分析了不同核背景的甜椒胞质雄性不育(CMS)系ZTA、17A、8A和相应保持系ZTB、17B、8B花药中17种游离氨基酸,结果表明:不育系花药中游离脯氨酸和游离赖氨酸含量均明显低于相应的保持系;不育花药中严重缺乏游离脯氨酸;不育花药中游离苏氨酸和精氨酸含量均明显高于相应保持系的可育花药;不育系花药中游离氨基酸总量则明显低于保持系。核遗传背景差异导致3份同质异核甜椒不育系花药中同种游离氨基酸含量间存在差异。

氮磷钾施用量与辣椒品质的相关性研究

采用三因素五水平正交旋转组合设计 ,用基质盆栽法 ,研究了氮、磷、钾施用量与辣椒品质的相关性 ,建立了相应回归方程。结果表明 :氮对辣椒干物质的形成起主要作用 ,钾与辣椒果实维生素C含量呈典型曲线相关 ,氮与辣椒素含量呈显著直线相关 ,氮、磷、钾之间存在有显著的交互作用效应。无土栽培辣椒氮、磷、钾最优组合方案为氮 :35 2～388mg/L ;磷 :5 4～ 6 2mg/L ,钾 :337～ 4 0 9mg/L。

贵州地方辣椒品种主要经济性状的初步研究

为挖掘贵州地方特色辣椒品种 ,针对贵州省干辣椒及加工制品的生产和市场现状 ,对收集到的 13份贵州地方辣椒品种材料进行了熟性、农艺性状及主要品质性状的鉴定。结果表明 :参试材料除织金辣椒 (G)偏早熟、绥阳朝天椒 (L)为极晚熟外 ,其余品种多为中晚熟品种 ;参试材料多为辣椒属一年生辣椒种的各个变种 (类型 ) ,其中指形椒占 6 1.5 % ,长角椒占7.7% ,短锥椒占 7.7% ,樱桃椒占 7.7% ,簇生椒占 15 .4 % ;参试材料的维生素C含量在 70～ 186mg/ 10 0g ,>10 0mg/ 10 0g的材料占 85 %。

辣(甜)椒DUS测试技术和方法初探

针对辣椒的特异性、一致性和稳定性测试,详细介绍了测试性状的组成和描述、测试的技术和方法以及对特异性、一致性、稳定性的分析等测试流程,并对测试指南中叶形、果形等性状提出了修改建议。

辣椒抗疫病遗传与育种的最新研究进展

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌引起的叶片枯萎、果实腐烂、茎杆出现坏死斑等多种症状的真菌性病害。对国内外辣椒疫病的抗性机制、抗性遗传、抗病育种及分子生物学等方面的研究进展进行了分析,并提出了未来需要研究的问题,同时指出了今后的研究方向。

辣椒SRAP-PCR反应体系主要影响因素的单因素和正交设计优化

SRAP标记是一种新的分子标记技术,建立和优化所研究物种的SRAP反应体系是应用SRAP标记的技术关键。本研究以3个辣椒品种为试验材料,采用单因素试验设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因子(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度)设置8个不同的水平梯度,筛选出比较适宜的Mg2+、dNTP、Primer、Taq酶、模板DNA浓度的范围。在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的五因素在四个水平上进行优化实验,得出了如下的优化体系:25μl体系中包含1.5mmol/L的Mg2+、0.2mmol/L的dNTP、0.1μmol/L的单条引物、1U的Taq酶和60ng的模板DNA。经用24个辣椒材料进行扩增验证,该体系检测的结果重复性好,稳定性强。因此,本试验所获得的优化体系适用于辣椒的SRAP分子标记研究。

辣(甜)椒细胞质雄性不育胞质基因的遗传效应

以辣(甜)椒细胞质雄性不育系(CMS)21A、延A、8A及相应的保持系21B、延B、8B和恢复系湘紫、LS7为材料,首次系统研究3个CMS不育胞质基因的遗传效应。结果表明,辣(甜)椒雄性不育细胞质基因的遗传效应之一表现为单性结果在不育系间有明显差异。不育胞质基因对F1代株高、株幅、单株结果数、果实大小、产量等主要农艺性状有一定正效应和促进作用,不育胞质基因对繁种没有影响。不育系的扩繁与保持以及F1杂交种子的繁制以大棚人工辅助授粉为最佳,单株结果数和单果种子数显著高于露地人工辅助授粉和自然授粉。

甜椒胞质雄性不育恢复系SRAP及SCAR标记

以甜椒胞质雄性不育恢复系5-2R1和相应的保持系5-2为试材,利用SRAP分子标记技术筛选与甜椒恢复基因相关的分子标记。128对SRAP引物共扩增获得了3796条从100bp至800bp大小不同的条带,平均每对引物组合可扩增出30条清晰的条带,检测到4个多态性位点,其中恢复系材料仅有1个。对该特异片段进行回收、克隆和测序,结果表明该片段全长为259bp。经数据库比对分析表明,该片段与线粒体中的NADH脱氢酶第5亚基(GenBank:EF151914.1)具有81%的同源性;同时,该片段与辣椒BAC克隆PEPBAC 158K24(GenBank:FJ597540.1)的部分序列高度同源。根据序列特点设计特异SCAR引物,对恢复系和保持系进行扩增验证,仅在恢复系中扩增出目的条带,表明已成功地将此SRAP标记转化为简单、稳定的SCAR标记。我们推测本研究获得的SCAR标记可能与胞质雄性不育恢复性状连锁。

甜椒采后生理及保鲜技术研究进展

对甜椒采后主要生理和病理特性、甜椒采后各种保鲜技术进行综述,介绍几种常见的甜椒保鲜实用方法。

甜椒胞质雄性不育雄配子发育的解剖学和超微结构研究

运用石蜡切片和电子显微镜超薄切片方法观察了甜椒(CapsicumannuumL.)细胞质雄性不育系8A和保持系8B雄配子发育过程。结果表明:不育系和保持系都能正常进行减数分裂,绒毡层细胞无明显差异,形成了正常的四分孢子。在四分体单核居中期后,不育系的绒毡层细胞异常膨大并伸进药室,挤压花粉粒,同时绒毡层细胞提前降解,不育系单核晚期花粉粒开始崩出内含物,致使不育系的雄配子在双核花粉粒形成之前就完全裂解,不能发育成正常的花粉粒。此外,超薄切片还观察到不育系花粉粒在单核早期绒毡层细胞线粒体空泡化,这种变化表明雄性不育的遗传缺陷包括在花药发育早期发生的线粒体结构变化。

抗疫病辣椒新品种‘福康2号’

利用蔬菜育种的三向选择策略和分子标记辅助育种技术选育出‘福康2号’辣椒.该品种为早中熟一代杂种,果实羊角形,绿色,味辣,品种优良,商品性好,产量37 500～45 000 kg/hm^2,抗疫病,耐青枯病.

植物新品种DUS测试技术研究(一)——辣椒新品种DUS测试性状的选择与测试指南修订

介绍了辣椒新品种DUS测试性状选择的总体要求,列举了辣椒新品种的DUS测试性状,并与原有测试指南在文本格式和性状选择方面进行了比较,为我国辣椒新品种保护审查测试体系提供较为坚实的技术支撑。

辣椒新品种‘苏椒12号’

‘苏椒12号’是以母本‘94112’与父本‘95050’配制的辣椒一代杂种,中早熟,果形大羊角,长而直,果色淡绿色,果面光滑,商品性好,果长18～20cm,平均单果质量30g,味辣,产量45000kg/hm2,抗病耐贮,适宜于露地和保护地栽培。